5 . 母源因子是初级卵母细胞在减数分裂Ⅰ前期的后段开始产生并积累的mRNA和蛋白质，其对于调控动物早期胚胎的发育十分重要。为研究不同母源因子的功能，相应母源突变体的培育显得尤为重要。
(1)母源因子由母源效应基因通过基因______过程产生，其产生并积累的时期由于同源染色体未分离，因此只有纯合突变的雌性个体的后代才是母源突变体。
(2)获得母源突变体的传统方法是反复交配与筛选。以母源效应基因A为例，科学家利用基因编辑技术将斑马鱼的一个A基因敲除后获得杂合子，记作（+/-）。如图1是获得母源突变体的杂交方案，请补全下图______。

(3)传统交配筛选的方法存在耗时长、纯合的合子突变体的致死率高等缺陷。为了解决上述问题，科学家在CRISPR/Cas9基因编辑系统的基础上进行了改进。
①sgRNA编码序列能与相应靶基因序列发生碱基互补配对。为构建含有sgRNA编码序列的重组质粒，需对含有特定sgRNA编码序列的DNA用______处理，然后将其插入到经相同酶处理过的质粒上。斑马鱼的卵母细胞与精子受精前停滞在减数分裂Ⅰ前期，此时还未开始合成母源因子，在此阶段前对卵母细胞进行基因敲除可避免母源因子的积累。
②为了实现卵母细胞中基因的特异性敲除，如图2所示，科学家将含有3个不同的但靶向相同基因的sgRNA编码基因的重组质粒组装到具有特殊元件的载体上，形成新的重组质粒后导入卵母细胞。

注：eflap—能够驱动基因广泛表达的启动子；EGFP—增强型绿色荧光蛋白基因；I-SecI一归位内切酶，可将质粒随机插入到斑马鱼的基因组中。
从理论上分析，一个sgRNA便能实现靶基因的敲除，请分析3个sgRNA串联有何优势，请答出2点_____。
(4)I-SecI介导的基因插入率并不能达到100%，请根据上述研究分析如何在斑马鱼早期胚胎中筛选出突变体，并说明理由_____。

6 . “日出而作，日落而息”是人类的生活规律。实际上，地球上的生物都表现出一种昼夜节律。为深入了解昼夜节律，科学人员以果蝇作为实验材料进行了研究。
(1)用甲磺酸乙酯处理野生型雄果蝇以获得昼夜节律突变体， 将经过处理的雄果蝇和一种特殊的X^XY雌果蝇（两条X染色体连在一起，不能分开）进行杂交，在该杂交实验中，亲本雌果蝇可以产生      。

A．2种配子，比例为1：1	B．2种配子，比例为2：1
C．2种配子，比例为1：2	D．3种配子，比例为1：2：1

(2)从F₁中筛选昼夜节律突变体。已知XXX和YY型果蝇死亡，则F₁中没有染色体变异的个体为____（编号选填）
①雄性                            ②雌性                            ③雌雄都有
(3)若F₁雄蝇昼夜节律都异常，雌蝇都正常，则可推断控制果蝇昼夜节律的基因per位于_________染色体上。
(4)野生型果蝇的昼夜节律为24h,某科研小组筛选出昼夜节律分别为28h（长节律）、19h（短节律）和无节律3种突变体以果蝇群体每小时羽化个体数作为昼夜节律的观测指标进行研究，其结果如图所示，图A对应野生型果蝇的节律，则图 B~D中表示短节律和无节律突变体的分别是________、________。

(5)以上3种突变体的相关突变基因（per^L(长节律)、per^S(短节律)和per⁰(无节律)）相对per都为隐性基因且均位于与per基因所在的染色体相同，但不能确定它们是否由同一个per基因突变产生（即是否互为等位基因）。科学家将长节律雄蝇和携带无节律基因的雌蝇杂交，培育双per突变杂合体：若per^L和per⁰为等位基因，则双per突变杂合子雌蝇的基因型可表示为X^perLX^per0,其性状应为________（编号选填填①“节律正常”或②“节律异常”）；若为非等位基因，则相关基因在该雌蝇染色体上的分布情况为下图中的_________，该雌蝇性状应与第一种假设相反。

(6)经实验确定上述的第一种假设正确，这体现了基因突变___________的特点。基因测序发现per^S、per^L和per⁰基因都只有一个碱基对发生了替换，但只有per⁰突变体完全丧失了昼夜节律，请推测per⁰突变体产生的原因：_______________________________。

8 . 学习以下材料，回答（1）~（4）题。
乳糖操纵子在转基因动物中的应用前景
乳糖操纵子只存在原核生物中，由调节基因（I）、启动子（P）、操纵基因（O）、结构基因（Z、Y、A）组成（如下图）。若诱导物（乳糖/半乳糖）不存在时，Ⅰ在其自身启动子的作用下编码阻遏蛋白，其分子构象能识别О序列并与之结合，阻止RNA聚合酶与Р的结合，使结构基因无法表达相应的酶；若诱导物存在时，诱导物能和阻遏蛋白结合，使其分子构象发生改变，无法识别О序列，RNA聚合酶与Р结合，Z、Y、A可以分别表达3种酶。

玉米-豆粕饲料是畜牧养殖中重要的蛋白质饲料，但饲料中含有半乳糖苷（抗营养因子）等物质，由于畜禽动物胃肠道内缺乏半乳糖苷酶，导致半乳糖苷在肠道内积聚，进而影响营养物质的吸收。半乳糖苷经肠道微生物发酵产生的NH，等气体还使动物产生胀气，甚至腹泻。因此生产能在动物肠道内表达半乳糖苷酶的转基因动物，可提高饲料中营养物质的利用率，但外源半乳糖苷酶基因在转基因动物中出现过量表达的现象，严重影响转基因动物的健康。
近期科学家结合乳糖操纵子的结构和功能，尝试将乳糖操纵子应用于转基因动物，并对其应用效果和前景进行了分析探讨。一旦乳糖操纵子成功应用于转基因动物，对降低转基因动物的健康风险，培育能有效利用半乳糖苷的动物新品种等方面都有重要的应用价值。
(1)将大肠杆菌接种到含乳糖的培养基中，乳糖与阻遏蛋白结合，导致该蛋白的___________发生改变，无法识别О序列，进而启动结构基因的___________过程。由此说明，大肠杆菌可在___________水平上调控相关基因的表达。
(2)乳糖操纵子介导的半乳糖苷酶能降低转基因动物的健康风险，其原因是__________。
(3)若将乳糖操纵子应用于转基因动物，可为其提供技术和理论依据的研究结果包括__________。

A．调节基因整合到动物染色体上易被甲基化而无法表达

B．操纵基因与哺乳动物的启动子整合不影响靶基因的表达

C．突变的调节基因导入小鼠细胞，无法检测到阻遏蛋白

D．半乳糖苷酶基因导入小鼠细胞，半乳糖苷酶活性显著增加

E．将操纵基因和酪氨酸酶基因整合的转基因小鼠，与表达阻遏蛋白的转基因小鼠杂交，饲喂子代小鼠含诱导物的水可调控其皮肤颜色

(4)为了将乳糖操纵子成功应用于转基因动物，科学家还准备做下列科研工作。
①修饰乳糖操纵子的I，使其甲基化程度降低。
②修饰乳糖操纵子的P，使其具有组织特异性。
请选择上述一项科研工作，分析其研究意义__________。