1 . 田间常施用草铵膦（含碳有机物）农药，在环境中难以降解。科学家通过图1所示方法筛选出了可降解草铵膦的植物乳杆菌（ST-3），并研究了固定态（固定在多孔载体上）和培养液中游离态的ST-3的降解效果，结果如图2所示。下列相关叙述正确的有（　　）

   

A．图1中②过程可使用无菌水，③④⑤过程应用以草铵膦为唯一碳源的培养基

B．图1中平板培养基的配制顺序为：计算→称量→溶解→调pH→定容→倒平板

C．由图2可知，固定态ST-3对土壤中草铵膦的降解效果优于游离态ST-3

D．固定态ST-3降解率高可能是因为载体避免ST-3直接接触高浓度草铵膦

2 . 中国科学院欲探究西藏不同海拔地区土壤微生物物种数目分布情况，选取了西藏三个地区亚东乡（海拔2880m）、上亚东乡（海拔3350m）和帕里镇（海拔4300m）进行采样并统计，下列说法错误的是（       ）

A．可采用取样器取样法对三个测量位点土壤菌群进行调查

B．三个不同地区菌群物种数目差异较大，体现了群落结构垂直分层的现象

C．不同地区土壤微生物物种数目差异，与多样化的植物有关

D．可根据固体培养基上菌落的形状、大小、颜色区分不同种的微生物

3 . 发酵乳中含有丰富的乳酸菌。科研人员利用CaCO₃-MRS培养基（蛋白胨10g、牛肉膏粉5g、酵母膏粉 4g、葡萄糖 20g、磷酸氢二钾 2g、乙酸钠5g、柠檬酸三铵2g、硫酸镁 0.2g、硫酸锰0.05g、琼脂15g、碳酸钙25g）从发酵乳中分离纯化乳酸菌，相关叙述正确的是（       ）

A．能为乳酸菌提供碳源的有蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉、葡萄糖、琼脂

B．接种前应将发酵乳置于121℃、100 kPa条件下处理15~30 min

C．涂布接种后应在培养皿盖上标记接种日期和接种者，并倒置培养

D．挑取溶钙圈直径与菌落直径比值较大的菌落进一步划线纯化

4 . 科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图所示。回答下列问题：

(1)发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、_______、接种、发酵、产品的_______等方面。
(2)三位同学用稀释涂布平板法测定某一时间段内嗜盐单胞菌H的数量，他们的操作及统计结果如下：
甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；
乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；
丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是209、240和250，取平均值233.
在三位同学的统计中，_________同学的统计是正确的。该方法统计出的结果往往偏低，原因是________。也能使用细菌计数板进行计数，相较前者可以在_______内获得数据。
(3)为获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株H，可将蔗糖作为液体培养基的_____，并不断提高其浓度，多代培养选择。从功能上看，所用培养基为_______。
(4)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌，分析原因：一是培养基的盐浓度设为60g/L，其他杂菌因_____而死亡；二是pH为10的条件下，其他杂菌的_____变性失活，生长繁殖受抑制。

5 . 饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。

(1)培养基中除了添加_____________以外，应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质。为防止杂菌污染，要对培养基进行_________________法灭菌。
(2)若要对上述菌株进行纯化，接种时，在第一区域划线后须将该工具_______后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是从上一区域获得菌种。
(3)中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA 等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为唯一碳源，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用__________的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有__________等（答出2种方法）。

8 . 野生型菌株X能在基本培养基上生长，亮氨酸缺陷型突变株无法合成亮氨酸，只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法（一种类似“盖章”的接种方法，使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落）纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程图。回答下列问题：

   

(1)培养微生物的培养基通常应含有水、无机盐、_______等营养成分，培养基灭菌常用的方法是_____，基本培养基与完全培养基相比，成分不同的是_______。
(2)进行过程②操作时，必须先将丝绒布转印至______（填“基本培养基”或“完全培养基”）上，从______培养基上可获得亮氨酸缺陷型突变菌株。
(3)利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同，所以应挑取_______（填“菌落A”或“菌落B”）获得亮氨酸缺陷型突变菌株。将该菌种在培养液中扩大培养时，需将菌液充分振荡，目的是_______。

10 . 纸片扩散法是药敏试验中一种常用的方法。取少量大肠杆菌的培养液，均匀涂在培养皿内的培养基上，再放上4片含有链霉素（抗生素的一种）的圆形滤纸，然后在无菌适宜条件培养12～16h，滤纸片周围出现抑制大肠杆菌生长的环圈（简称抑菌圈，见下图）。下列相关叙述正确的是（       ）

A．图1中的培养基需冷却至50℃左右时再倒平板，该操作需要在酒精灯旁完成

B．图2中所示培养基的放置方式，能防止水分过快蒸发和冷凝水珠冲散菌落

C．图3所示的抑菌圈内出现大肠杆菌菌落的原因是链霉素使其发生了基因突变

D．图3培养皿上大肠杆菌的接种方式为涂布平板法，Ⅳ号纸片上抗生素浓度最高