1 . 牛奶是适合微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要用巴氏消毒法消毒，以杀死有害微生物。某小组为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行了如图所示操作。请回答下列问题。

　

(1)牛奶用巴氏消毒法消毒的好处是_______________________________。
(2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL在培养基上进行涂布，应选择的工具是下图中的____。

　

(3)（1）问图示方法为稀释涂布平板法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65、63、64，则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为_______个，运用这种方法统计的结果往往较实际值________（填“大”或“小”），如果培养基上出现________的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
(4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，要进一步分离纯化乳酸菌，应采用下图中________（填字母）所示的划线分离操作，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧________次。

　　

3 . 制作豆酱的工艺流程如图所示。蒸熟可使组织细胞软化、细胞所含蛋白质变性、淀粉糊化，制曲是毛霉等多种微生物在大豆表面大量繁殖的过程。发酵期间需要定期搅拌，经过一个月的时间豆酱即可制成。下列叙述错误的是（       ）
大豆→浸泡→蒸熟→冷却→制曲→成曲→发酵→豆酱

A．毛霉为异养型微生物，会与大豆表面的其他微生物形成竞争关系

B．蒸熟有利于杀死大豆表面以及内部的杂菌

C．原料冷却后才能接种毛霉等微生物的目的是防止发酵时杂菌污染

D．搅拌可增加氧气含量、利于菌种与营养物质接触，促进菌种的繁殖

4 . 无菌操作技术是微生物实验的基本技术，是保证微生物实验准确和顺利完成的重要环节。下列叙述错误的是（　　）

A．紫外线照射、甲醛熏蒸、酒精擦拭超净台都属于消毒

B．接种所用的吸管、培养皿及接种针等必须经严格灭菌

C．对培养基高压蒸汽灭菌时间不足1小时会严重影响效果

D．干热灭菌和将试管口通过火焰灼烧都能杀灭芽孢和孢子

5 . 一种广泛使用的除草剂（含氮有机物）在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低；含一定量该除草剂的培养基不透明）。
       
(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释10稀释度。各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别涂布到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为__________。
(2)接种技术的核心是____________。
(3)在培养基上形成的菌落中，无透明圈菌落利用的氮源主要是___________，有透明圈菌落利用的氮源主要是___________，据此可筛选出目的菌。实验结果如图显示的A~E五种菌株中，___________是最理想菌株。

7 . 很多极端环境（高温、干旱、盐碱等）中的微生物仍未获得分离和培养。我国研究人员提出了一些从沙漠环境中获取纯培养原核微生物的策略。
(1)在采集时，需要用经过____处理的铲子、采样袋、离心管等收集土样、水样，低温保存样品，尽快进行微生物分离。
(2)培养基一般都含有____和无机盐等。配置适宜的培养基，也是培养沙漠微生物的关键步骤。沙漠炎热，其中很可能存在嗜热微生物。若要筛选嗜热微生物需在高温下进行培养，此时琼脂不凝固，非固态的培养基上无法获得微生物的____，因此需选用在高温下仍有凝固能力的物质代替琼脂。
(3)沙漠有强烈的紫外线照射。研究人员希望能从沙漠土样中培养出更多的沙漠微生物，于是将获得的沙漠样品用紫外线照射10分钟后再进行样品稀释。这样做的原因是：①紫外线可以杀死、抑制一些杂菌，减少杂菌的快速生长；②____。
(4)接下来，对上述样品进行溶解和稀释，每次稀释时需要在试管中加入____和1mL待稀释的菌液。研究人员在进行接种时，并不是只接种10^-4的稀释液，而是将下图中四个浓度均进行接种，原因是____。

8 . 高浓度的铵盐对海水养殖中的对虾有一定的毒害作用，是制约其大规模养殖的环境因素之一，具有高降解能力的硝化细菌可有效净化水体中的铵盐，降低对虾的死亡率。科研人员从当地对虾养殖池塘中筛选出对铵盐降解率高且稳定的硝化细菌菌株，将等量的三种候选菌甲、乙、丙分别接入等浓度的含铵盐培养液中，在适宜条件下培养一段时间后检测培养液中的铵盐浓度，操作流程如图1所示。回答下列问题：

(1)为了筛选出实验所需的硝化细菌，在配制选择培养基时，需要以____为唯一氨源。为了防止杂菌污染，接种工具需要严格灭菌，并需要在超净工作台上____旁进行操作。
(2)图1中M培养基上进行的是利用____纯化菌种，该过程中接种工具需要灼烧____次。
(3)若用稀释涂布平板法对细菌进行计数时，所统计的菌落数往往会比实际数目偏小，原因是____。在5个平板上各接种稀释倍数为10³的菌液样品0.1mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为28、50、52、54、313，则每升原菌液样品中细菌数为____个。
(4)将筛选出的等量的三种候选菌甲、乙、丙，分别接人铵盐浓度为40mg·L^-1的模拟养殖污水中，在适宜条件下培养48h，结果如图2。据图分析，应选择候选菌____（填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养。

9 . 野生型菌株X能在基本培养基上生长，亮氨酸缺陷型突变株无法合成亮氨酸，只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法（一种类似“盖章”的接种方法，使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落）纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程图，1一5为菌落。回答下列问题：
   
(1)统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，鉴定菌落种类的重要依据是____。从图中可以看出，培养基B中缺少了3、5两个菌落，说明培养基B中缺乏了____，导致3和5两菌落微生物无法生长，因此培养基B____（填“属于”或“不属于”）完全培养基。
(2)培养基灭菌常用的方法是____，可从培养基A中挑取菌落3、5在试管中制成菌液进行纯化培养，试管中的菌液进行充分振荡的目的是____。
(3)人工处理或自然突变往往会使菌种成为营养缺陷型菌株，现欲设计实验证明野生型大肠杆菌经紫外线照射后，可获得亮氨酸缺陷型突变菌株，请简单描述实验思路并预期实验结果：
实验思路：____；
预期实验结果：____。

10 . 获得纯净的微生物培养物的关键是防止外来杂菌的污染。无菌技术在生产、生活和科研实践中有着广泛的应用。下列有关无菌技术的叙述，错误的是（　　）

A．通过煮沸的方式可以将微生物的营养细胞和芽孢全部杀死

B．紫外线消毒常用于对培养环境的空气和一般物品的表面消毒

C．若高压蒸汽灭菌锅内的冷空气未排尽，则会影响灭菌效果

D．玻璃器皿和金属等耐高温且需要保持干燥的物品可以用干热灭菌