1 . 酿酒酵母被称为啤酒酵母，最早人们利用它进行啤酒和面包的工业化生产，后来人们从葡萄酒中分离培养出不同的菌株，进一步将其分为果酒用酵母、啤酒用酵母等不同类别。酿酒酵母的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酿酒酵母菌株，进行了下图实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，灭菌条件相同。

(1)制备培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的pH，及时对培养基进行分装，并进行______灭菌。
(2)图一中所用的分离产酒精能力强的酿酒酵母菌株的方法是_______。
(3)通过计算得出葡萄酒过滤液每L的活菌数为______个，用这种方法统计的结果往往较实际值______，原因是_____。
(4)图二中丙瓶出现的现象是_______，原因是_______。
(5)图二中乙瓶和丁瓶哪一瓶中的酿酒酵母产酒精能力强？_______。原因是______。

2 . 青霉素能够破坏细菌的细胞壁，从而杀死细菌，对革兰氏阳性菌有效，而对革兰氏阴性菌无效。工业上常用产黄青霉菌来生产青霉素，图a为生产流程图，请回答下列问题：
   
(1)在制备该培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要将pH调至___性，接种之前的过程①、②都属于___。
(2)发酵罐中发酵时要及时添加必要的营养成分，还要严格控制___等发酵条件。
(3)青霉菌在代谢过程产生的青霉素具有杀菌作用，有同学认为无需对培养液进行严格灭菌，你是否同意这样的观点？___。为什么___。
(4)青霉素发酵是高耗氧过程，发酵过程中持续高效地供氧是保证青霉素持续高产的关键。血红蛋白具有很强的携带O₂的能力，将其引入青霉菌，是提高青霉素产能的思路之一、血红蛋白不仅存在于人和动物的红细胞中，也存在于某些植物细胞中（如豆血红蛋白），还存在于某些细菌细胞中（如透明颤菌）。研究人员为了将透明颤菌的血红蛋白引入青霉菌，设计了图b所示的方案：
   
溶菌酶能够溶解细菌的细胞壁，蜗牛酶是从以植物和真菌为食的蜗牛消化道中提取的酶。处理①、②所用的酶分别是上述两种酶中的___，请简述处理④从融合细胞中筛选目的菌株的基本思路：___。

3 . 下图甲、乙是微生物接种常用的两种方式，回答相关问题：

(1)图甲是利用____法进行微生物接种的，图乙是利用____法进行微生物接种的，这两种方法所用的接种工具分别是____和____；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是____和酒精消毒。
(2)挑取分离平板中长出的单菌落进行划线。操作时，在第二次及以后的划线，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是____。下列关于相关操作叙述合理的有____。
a．为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
b．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
c．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株供应。
(3)如果培养酵母菌并计数，为了使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和____供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞的计数板计数5个中格中的细胞数，理论上无色细胞的个数应不少于____才能达到每毫升5×10⁹个活细胞的预期密度。

4 . 为研究培养基成分对马铃薯叶肉原生质体培养的影响，科学家配制了如下表所示的2种培养基，开展了有关实验，其他培养条件相同且适宜，实验结果如下图所示，下列有关叙述错误的是（　　）

组别	培养基	培养天数
1	MS培养基（含蔗糖、有机酸、无机盐、琼脂）	7天
2	纤维二糖+MS培养基（同上）	7天

注：“细胞出芽”表示愈伤组织中部分细胞再分化

A．本实验的自变量是纤维二糖的有无

B．该实验的培养基中还需要添加适当比例的生长素和细胞分裂素

C．制备原生质体前需要对马铃薯的叶片和酶解液进行高压蒸汽灭菌处理

D．添加纤维二糖的作用可能是促进了脱分化的过程

5 . 我们在生产、生活中产生的大量垃圾，正在严重侵蚀我们的生存环境，垃圾分类处理是避免“垃圾围城”的有效途径。利用微生物将垃圾中的有机物分解是常用的方法。请回答下列问题:
(1)每种微生物的利用，都离不开微生物的分离、提纯和培育。实验室筛选微生物需人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻断其它微生物的生长，能达此目的的培养基称为_________。在实验中，为了获得纯净的某种微生物，关键是_________，主要包括消毒和灭菌，其中对培养基常采用的方法是__________。
(2)我国科学院研究团队首次发现了能够高效降解聚氨酯（PU）塑料的新菌种，并把该菌种命名为塔宾曲霉菌，若要筛选该菌种，则需要使用以_________为唯一碳源的选择培养基。若要测定样品溶液中该菌种的数目，可将100mL含该菌种的样品溶液稀释10⁴倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为190个，且空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中含有塔宾曲霉菌_________个。
(3)若对菌株的纤维素降解活性进行鉴别，需将分离纯化得到的各菌种，接种于加入刚果红的培养基中，通过比较菌落的__________，来判断降解活性的高低。
(4)研究发现圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌（均为需氧型）处理厨余垃圾废液效果好。为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比，研究者做了如下实验；①将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：

编号	A	B	C	D
圆褐固氮菌：芽孢杆菌	1：0	0：1	1：1	2：1

将上表菌液分别接种于50mL某厨余垃圾废液中进行振荡培养。
本实验的对照组应在50mL厨余垃圾废液中接种__________。
②培养3天后测定活菌数：取一定量菌液进行_________，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布平板法接种于完全培养基中培养。依据菌落形态对两种菌进行区分计数。
③实验结果如下图：

由图可知处理该厨余垃圾，两菌种的最佳接种量比例为_________，判断依据是_________.

6 . 高压蒸汽条件下持续20分钟会杀死芽孢，因此无菌操作中可利用非致病性的嗜热脂肪杆菌的芽孢作为指示菌来测定灭菌的效果。灭菌时在高压蒸汽灭菌锅的适当位置放置含有生物指示剂的培养液和含芽孢的菌片。灭菌结束后在塑料瓶外挤破含有培养液的玻璃瓶，使嗜热脂肪杆菌菌片浸没在紫色培养液内并进行培养，如下图所示。若芽孢可以生长会使培养液变为黄色。下列叙述错误的是（       ）

A．嗜热脂肪杆菌的芽孢耐热性较强，常用作指示菌来测定灭菌的效果

B．灭菌后含有嗜热脂肪杆菌菌片的紫色培养液属于鉴别培养基

C．湿热灭菌可利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌

D．若培养液颜色为黄色而阳性对照组颜色没有变化，说明达到灭菌目的

7 . 苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的苹果原醋，再兑以苹果汁等原料而成的饮品。既有淡淡的醋味，又有果汁的香甜，喝起来非常爽口。苹果醋能保健养生、改善疲劳、美容养颜，是目前大众非常喜爱的饮品。如图是苹果醋的制作简图，请据图回答：
   
(1)过程①中使用到的微生物是____，在适宜条件下进行____生殖。若要检测是否产生了苹果酒，可用____试剂进行检测，如果有苹果酒产生能观察到溶液变为____ 色。
(2)过程②和过程③中起作用的微生物都是____，但该微生物在过程②和③中分解的碳源不同，过程②和③中的碳源分别是____和糖类。
(3)生产果醋时，发酵所需微生物可从食醋中分离纯化获得，具体方法是：
第一步：配制培养基。该培养基必须含有微生物生长所需要的基本营养成分。
第二步：对培养基用____法进行灭菌。
第三步：接种。常用的微生物接种方法有：____法和稀释涂布平板法。
第四步：培养。温度控制在____℃，培养时____（填“需要”或“不需要”） 提供氧气。
第五步：挑选符合要求的菌落。
第六步：菌种的保存。对于频繁使用的菌种可以接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的条件下培养 一段时间，然后置于4℃冰箱中保存。

8 . 随着世界人口增长和肉类消费量的持续提高，细胞培养肉有望成为未来肉制品的来源之一，细胞培养肉的制造过程如下图所示。下列叙述错误的是（　　）
   

A．细胞培养肉制造时涉及的生物技术有细胞核移植技术

B．应定期向生物反应器中添加琼脂，同时清除代谢废物

C．干细胞被成功培养为肌细胞与基因的选择性表达有关

D．进行食品化加工时，应对生产器具进行部分消毒处理

9 . 酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图 Ⅰ 所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100 mL完全培养基，下列说法错误的是（　　）

A．葡萄酒发酵过程中，缺氧酸性环境、酵母菌产生的次生代谢产物酒精等可抑制杂菌的繁殖

B．用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为6.8×109（个·L-1），此数值可能低于实际的活菌数

C．可用干热灭菌法对培养皿、培养基进行灭菌，菌种接种过程中的试管口、瓶口等需灼烧灭菌

D．由图 Ⅱ 可知，丙瓶出现的原因可能是灭菌不彻底，丁组酵母菌产酒精能力比乙强

10 . 链霉菌是一种异养需氧型的细菌， 为利用链霉菌生产药物 A，研究者构建重组 DNA 并导入链霉菌。重组 DNA 含启动子 P、药物 A 基因和 Neo 基因（卡那霉素抗性基因）。培养和筛选过程如下图所示。

下列叙述不正确的是（       ）

A．实验所用培养基需要先调 pH 再行高压蒸汽灭菌后才能使用

B．稀释后涂布时应用涂布器沾取少量菌液并均匀地涂布在培养基的表面

C．卡那霉素抗性强弱与药物A基因的表达量呈正相关

D．应选用培养基b 的菌株进一步鉴定以生产药物 A