1 . 聚乙烯塑料在自然界中很难降解，俗称“白色污染”，北京航空航天大学杨军教授偶然发现装米的塑料袋上有许多孔洞，还有黄粉虫幼虫和成虫爬出。带着这些疑问，杨军教授分离出黄粉虫幼虫消化道的微生物后，先进行了富集培养，随后进行了选择培养，最终成功分离出塑料降解菌——微小杆菌YT2。下列相关叙述错误的是（       ）

A．实验室一般用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌

B．富集培养和选择培养都可以增加塑料降解菌的数量，且都要以塑料为唯一碳源

C．若用稀释涂布平板法统计YT2的数目，平板上观察到的菌落数一般要比实际的活菌数少

D．若用血细胞计数板统计YT2的数目，往往比用稀释涂布平板法统计得到的数目多

3 . 肺炎支原体是支原体肺炎的主要致病菌，在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养是诊断支原体肺炎的主要方法。下列有关叙述错误的是（       ）

A．肺炎支原体是一种无细胞壁的原核生物

B．培养肺炎支原体的培养基中，一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质

C．在对肺炎支原体进行纯培养的过程中需要对接种环、培养皿和培养基等进行灭菌

D．微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物

4 . 传统葡萄酒的制作利用了果皮上的野生酵母菌，某学习兴趣小组利用相关培养基培养葡萄果皮清洗液以探究果皮上的微生物种类，对此实验相关说法不正确的是（       ）

A．倒平板时需在酒精灯火焰旁，打开皿盖放在一边，用灭菌后的涂布器进行涂布

B．用接种无菌水的培养基与接种微生物的培养基进行对照培养检测培养基是否受污染

C．采用稀释涂布平板法培养和计数微生物数量会导致计数结果偏小

D．使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境

5 . 今年4月27日，大熊猫“丫丫”回国在社会上引起了巨大反响。自然状态下的大熊猫繁殖能力较低，曾一度濒临灭绝，我国科学家利用胚胎工程的技术手段大大提高了熊猫的繁殖率，目前我国的熊猫数量已经有2400余只。请回答下列问题：
(1)大熊猫主要以竹子为食，研究人员为了从大熊猫粪便中筛选出纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以____为唯一碳源的固体培养基上进行培养。配制的培养基可用____方法进行灭菌处理。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是____。
(2)大熊猫体内受精受孕率低，可利用体外受精。受精前需要对采集的精子进行____处理，收集的卵母细胞要培养至____期。
(3)为了进一步提高熊猫的产子率，科学家用了胚胎分割技术，该技术属于____（填“有性”或“无性”）生殖，进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的____。胚胎移植前有时需进行性别鉴定，目前SRY-PCR技术是哺乳动物性别鉴定最有效的方法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取____细胞，提取DNA，然后用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）的一段碱基序列作为____，用被测胚胎DNA作模板进行PCR扩增，若通过鉴定，出现阳性反应的胚胎为雄性。

6 . 为了检测饮用水中大肠杆菌的数量，按下表配制培养基进行实验。

蛋白胨	乳糖	蔗糖	K2HPO4	伊红	美蓝	蒸馏水	琼脂
lOg	5g	5g	2g	0．4g	0．065g	100mL	15g

回答下列问题：
(1)该培养基中微生物所需的碳源来源于___，氮源来源于______，该培养基是_________培养基（填“固体”或“液体”）。
(2)在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现_______色，可以根据该颜色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。在这个过程中，要每隔24h统计一次菌落数目，目的是_______。
(3)在涂布接种前，小组成员随机取若干灭菌后的空白培养基培养了一段时间，观察培养基上是否出现菌落。若空白培养基上出现了菌落，其可能的原因是：①________；②________。（填两个）
(4)用无菌吸管吸取1mL水样进行系列稀释操作。各取0．1mL 10³倍的稀释液，分别涂布到四个培养基上培养，记录的菌落数分别为21、55、57、56，则每升原水样中大肠杆菌数为_______个。

7 . 为了获得β-胡萝卜素产品，某小组开展了产β-胡萝卜素（β-胡萝卜素较耐酸）酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题：
   
(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是_____；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该将器皿________。
(2)为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是_____。
(3)上图是灭菌锅及其局部剖面示意图，为达到灭菌效果，灭菌锅的温度和压力条件一般是_______。图中甲、乙、丙指示的依次是_____。 （填序号）
①安全阀、放气阀、压力表
②放气阀、安全阀、压力表
③安全阀、放气阀、温度表
④放气阀、安全阀、温度表
(4)为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在 3 块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是_______。
(5)在研磨酵母细胞时，除了添加石英砂帮助研磨；研磨时_______（填“需要”或“不需要”）添加 CaCO₃，理由是______。

8 . 请回答有关生物技术实践的问题：
(1)在微生物培养过程中，灭菌和消毒的主要区别是灭菌能够杀死物体内外____________；
将灭菌后的培养基冷却到_______℃，估计此温度的办法是_________，将培养基加入到培养皿中，该操作过程叫_________。培养基冷却凝固后，将培养皿倒置的原因是__________。
(2)能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO₂作为碳源的原因是_____________。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入___________指示剂，可以初步鉴定某种细菌能否分解尿素。
(3)微生物中的_________也可以产生芳香类化合物，可以采用将原料在有机溶剂中浸泡，使芳香油溶解于其中后，只需________有机溶剂，就可以获得较为纯净的芳香类物质。

9 . 热纤梭菌是一种能够分解纤维素并产生乙醇的厌氧细菌，在农林废弃物的转化利用中具有应用价值。为了筛选能高效降解纤维素的热纤梭菌，研究者进行了如图27所示的研究，回答下列问题：

(1)欲从牛粪中分离出能分解纤维素的热纤梭菌，应从牛粪堆的___________（填“表层”或“深层”）取样，原因是__________。
(2)在筛选过程中要配制以__________为唯一碳源的选择培养基。该培养基中除碳源外，还应该含有__________等营养物质。
(3)将菌液接种到乙培养基上的方法是___________，该方法统计的菌落数不能准确反映活菌的实际数目，原因是___________。
(4)该研究成功的关键是要进行无菌操作，其作用是__________（答出两点）。