1 . 干旱，盐碱和冻害是限制植物生长发育的主要逆境因子，胚胎晚期丰富蛋白（LEA）是一类重要的植物细胞脱水保护蛋白，在抵御干旱等非生物胁迫过程中发挥着保护功能。科研工作者将拟南芥的LEA基因转入小麦体内培育转基因耐盐品系小麦，以提高小麦的抗盐碱性。回答下列问题：
(1)为获取LEA基因，可以从拟南芥细胞中提取总RNA，经过逆转录过程得到___________，再利用___________技术进行大量扩增。
(2)在体外人工扩增LEA基因的过程中，要控制反应体系的温度变化。加热至90~95℃的目的是___________；随后冷却至55~60℃，再加热至70～75℃的目的是__________。
(3)构建基因表达载体是基因工程的核心，操作过程中用到的有关酶是____________。常用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞，转基因植物的基因组中含有目的基因片段，原因是____________。
(4)为检测转基因小麦是否表达出了LEA，常用___________法进行检测。

3 . dMAb技术是一种通过DNA编码产生单克隆抗体的技术，比传统单克隆抗体制备方法更有发展潜力。此前发表的研究显示，以埃博拉病毒为目标且高度优化的基于DNA的单克隆抗体，单次给药在小鼠血液中产生了高水平的抗体表现。下图表示dMAb技术在埃博拉病毒感染疾病的临床研究中的操作流程。回答下列问题：

(1)根据抵御埃博拉病毒的抗体的结构获得目的基因，常用PCR技术快速扩增目的基因。在扩增过程中，需要的原料是__________，将温度控制在90℃以上的目的是__________。
(2)构建重组质粒时，一般用相同的限制酶切割目的基因和Ti质粒的脱氧核苷酸片段，目的是__________。重组质粒中含有启动子，其作用是___________。
(3)单克隆抗体与埃博拉病毒结合利用的原理是___________。利用动物细胞融合技术生产单克隆抗体时，经选择性培养基筛选出的杂交瘤细胞还需要进行抗体检测，其目的是___________。与传统利用杂交瘤细胞生产单克隆抗体的技术相比，dMAb技术的优势是__________（写出2点）。

4 . 沃森和克里克发现了DNA规则的双螺旋结构后，标志人类对生物遗传和变异的研究真正进入到分子水平。下列关于DNA的叙述错误的是（       ）

A．真核细胞中DNA分子均具有两个游离的磷酸基团

B．DNA分子中碱基对发生变化不一定会引起基因序列的改变

C．DNA分子中氢键可通过解旋酶、RNA聚合酶或高温作用打开

D．DNA分子一条单链上相邻两个碱基通过脱氧核糖、磷酸和脱氧核糖相连

5 . 天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于其缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在基因B，现用基因工程技术培育蓝玫瑰。回答下列问题：
(1)可提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经______获得目的基因，再利用PCR进行扩增。PCR每次循环分为3步，其中温度冷却至55~60℃的目的是______。为获取基因B，也可以提取矮牵牛的全部DNA，切割后与载体连接，导入受体菌的群体中储存，这个群体称为矮牵牛的_______。
(2)若将基因B插入农杆菌Ti质粒上的T-DNA中，得到含目的基因的重组Ti质粒，则可用农杆菌转化法将该基因导入玫瑰的叶肉细胞中。用农杆菌感染时，应优先选用玫瑰受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共培养，选用这种叶片的理由是_______。将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA的原因是_____。
(3)将转基因玫瑰的叶肉细胞，经过组织培养培育出转基因蓝色玫瑰植株，具体的操作方法是_____。
(4)若获得的转基因玫瑰（目的基因已经整合到玫瑰的基因组中）并没有开蓝色花，根据中心法则分析，其可能的原因是_______。

7 . 肌肉生长抑制素（MSTN）是一种骨骼肌生长发育的负调控因子，可抑制肌细胞的增殖，MSTN基因沉默则可增加的方面。科研人员通过构建MSTN基因的反义基因（其转录出的mRNA会与MSY。A因转录出的mRNA特异性结合）表达载体，将其是山羊胎儿纤维细胞，实现了人成纤维细胞中MSTN基因的沉默，再结合体细胞核移植技术，成功制备了转基因。回答下列问题：
(1)利用PCR技术扩增MSTN基因的反义基因前提是要有_____，以便合成引物。在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是_____。
(2)将MSTN基因的反义基因与质粒构建成目的基因表达载体时，所需要的两种酶是_____。
(3)将构建好的MSTN基因的反义基因表达载体导入山羊胎儿成纤维细胞，从中筛选反义基因成功表达的细胞。在成纤维细胞体外培养过程中会出现细胞贴壁和_____现象，导致成纤维细胞的增殖不能一直进行。将具有反义基因的成纤维细胞注入经去核处理后的卵母细胞中，通过电刺激使二者融合，形成重组胚胎，去核的目的是_____。
(4)用特定方法激活并促进重组胚胎细胞分裂和发育。在养殖过程中发现，公羊的肌肉量比母羊的更高，为获得更多公羊，需在胚胎发育早期进行相关操作，具体操作是_____。

8 . 研究人员将大麦细胞的LTP1基因导入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌可产生LTP1蛋白，并酿出泡沫丰富的啤酒。回答下列问题：

(1)已知DNA复制子链的延伸方向是5'→3'，图1中A、B、C、D在不同情况下可以作为引物，在PCR技术中，扩增LTP1基因，应该选用_____________作为引物。为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的_____________位点。设计引物时需要避免引物之间形成_____________，而造成引物自连。
(2)图2中的B为质粒，是一种独立于大肠杆菌拟核DNA之外的具有_____________能力的很小的_____________。图2中的C除了含标记基因之外，在LTP1基因的上游必须具有_____________。
(3)分别用含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选，则有图2中C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是_____________。
(4)可采用分子杂交技术检测LTP1基因是否转录，需要从转基因啤酒酵母中提取_____________，用_____________作探针与之杂交。

9 . 实验室常用PCR技术对DNA进行体外扩增，下列相关叙述正确的是（       ）

A．需要解旋酶和耐高温的DNA聚合酶

B．反应过程包括变性→复性→延伸

C．95℃时DNA的磷酸二酯键断开

D．引物与模板结合后，DNA聚合酶从引物的5'开始延伸DNA链

10 . 研究发现，昆虫体内存在一种能分解有机磷农药的酯酶，为提高这种酯酶的活性，科研人员又进行了一系列研究。请回答下列相关问题：
（1）用人工诱变的方法使昆虫发生基因突变，可能会提高昆虫体内这种酯酶的活性，但由于_________，人工诱变的方向难以掌握。
（2）与用诱变剂直接处理昆虫相比，在对控制酯酶合成的基因进行PCR扩增时加入诱变剂、获得高活性脂酶突变基因的效率更高。这是因为加入的____________使PCR过程中仅扩增控制酯酶合成的基因，诱变剂可只针对控制酯酶合成的基因进行诱变，且突变的控制酯酶合成的基因在______________的催化下不断复制，可快速积累突变。
（3）若要提高这种酯酶的活性，还可考虑利用_________工程对这种酯酶进行改造，即根据所需功能设计其结构，推测出应有的氨基酸序列，进而确定相对应的________，再据此获得控制高活性酯酶合成的基因，将此基因导入细菌体内，并整合至细菌的DNA分子中。该工程菌繁殖后，其子代均可分泌高活性酯酶，这说明______________。