1 . 为提高大豆对磷元素的吸收能力，研究人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转移到大豆植株中，下图为重组Ti质粒上T—DNA的序列结构示意图。下列相关叙述错误的是（       ）

A．启动子1和启动子2具有的核苷酸序列一般是相同的

B．RNA聚合酶与启动子1识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录

C．可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的基因大豆愈伤组织

D．用EcoRI、BamHI双酶切重组Ti质粒后，经电泳分离至少得到两条带

2 . 重叠延伸PCR技术是采用具有互补末端的引物，使PCR产物形成重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸．将不同来源的扩增片段重叠拼接起来的技术，可通过定点诱变在体外改造DNA分子。如图表示利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。下列说法正确的是（       ）

A．在引物1、引物2组成的反应系统中，经过②形成图示双链DNA至少要经过3次循环

B．引物2中有一个碱基不能与目的基因片段配对，但引物与模板链依然能配对

C．经过过程④获得的杂交DNA有2种，都可以经过过程⑤获得目的基因

D．以过程⑤获得的双链DNA为模板，用引物1和引物4进行PCR可扩增定点诱变目的基因

3 . 科研人员利用PCR技术扩增X基因片段，需加入两种引物，引物结合位置如图1所示。PCR循环后产生5种DNA分子，如图2所示。下列叙述正确的是（       ）   

A．此过程中只需要热稳定的DNA聚合酶的催化

B．引物1和引物2可以重复利用，故无需加入较多的引物

C．获得图2中5种不同的产物至少要经过4轮循环

D．第4轮复制得到的DNA分子中，⑤所占比例为1/2

4 . 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，如图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1-4表示DNA上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述正确的是（       ）

A．若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏4个磷酸二酯键

B．若受体细胞为大肠杆菌，则需先用Ca2+处理，更利于实现转化

C．若用PCR技术获取目的基因，则图中的1、4分别是2种引物结合的位置

D．在PCR仪中根据选定的引物至少需经过6次循环才可获得32个符合要求的目的基因

5 . 光敏色素基因在调节作物生长发育中具有重要作用。为探讨玉米中光敏色素基因A（含大约256个碱基对）在棉花种质资源创制中的利用价值，研究人员将A基因转入到棉花中，利用对棉花受体细胞进行检测，并通过电泳技术分析结果。该过程所用质粒与含光敏色素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图甲、乙所示，电泳检测结果如图丙。下列相关叙述错误的是（       ）

A．操作过程中需要用到的工具有限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体

B．构建表达载体时应选用BamHI和HindⅢ这两种限制酶

C．PCR反应过程中每次循环都要经历目的各不相同的两次升温和一次降温

D．由图丙电泳结果可知，1、2、3、4号转基因棉花均培育成功

6 . 在基因工程中，构建基因表达载体时工具酶的作用部位以及PCR扩增DNA时90摄氏度高温的作用部位是（       ）
   

A．a

B．b

C．c

D．d

7 . PCR作为体外酶促反应体系，其效率和特异性取决于两个方面：一是引物与模板的特异性结合，二是Taq酶对引物的延伸。引物设计的总原则是提高扩增的效率和特异性。下列有关叙述错误的是（　　）

A．引物长度过短，特异性降低

B．经过5次循环后消耗引物64个

C．两种引物的碱基序列不能发生碱基互补配对

D．在第2轮循环产物中开始出现等长的目标DNA片段

8 . 二十碳五烯酸（EPA）是人体需要的一种营养物质。某实验室利用转基因技术从海洋细菌中提取了EPA合成途径的关键基因。下图表示通过PCR获取和扩增基因的部分过程。下列叙述正确的是（       ）
   

A．PCR体系中需要加入引物、原料和等

B．据图可知，可以选择引物①④或者②③

C．PCR第n次循环需要个引物

D．用于PCR的两个引物的碱基序列一般相同

9 . 下列关于利用PCR技术扩增目的基因的叙述，错误的是（       ）

A．PCR技术利用DNA半保留复制的原理，使核糖核苷酸序列呈指数方式增加

B．扩增目的基因前，需要设计可与目的基因的碱基序列互补的两种双链引物

C．基因的扩增依赖于模板、耐高温的DNA聚合酶和原料等物质

D．加热至90 ℃以上的目的是使基因的磷酸二酯键断裂

10 . 实时荧光RT—PCR可用于RNA病毒的核酸检测，其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基因和柳制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT—PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法正确的是（       ）

A．做RT—PCR之前，需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针

B．RNA不能作为PCR扩增的模板，故需要将样本中的RNA逆转录为DNA后再进行扩增

C．若检测结果有强烈荧光信号发出，说明被检测者没有感染病毒

D．病毒的检测还可以检测病毒表面的物质或病毒引发产生的抗体，其原理都是抗原一抗体杂交