1 . 甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白（血凝素蛋白）密切相关，现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程，图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（　　）

A．电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定

B．图甲过程中至少需要应用到逆转录酶、限制酶、DNA连接酶，DNA聚合酶

C．通过PCR技术从1个cDNA分子中特异性扩增出R蛋白基因时，在第四轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的R蛋白基因

D．构建好的重组质粒长度共2000bp，据图乙可推测BamHⅠ在重组质粒上有3个酶切位点

2 . 传统的基因测序往往需要从大量细胞中提取DNA。科研人员应用单细胞基因组扩增技术，成功地在体外对分离得到的极体进行了基因组扩增（PCR），并完成了测序，从而推测出与被测极体同时产生的卵细胞不含致病基因，最终借助试管婴儿技术帮助女性遗传病患者获得健康婴儿，试管婴儿技术涉及体外受精、胚胎移植等技术。下列有关叙述，正确的是（　　）

A．被测极体的单细胞基因组只包含一个染色体组上的基因

B．体外扩增DNA需要引物，体内DNA复制不需要引物

C．精子获能指精子在获能液中获得ATP后才具备受精能力

D．PCR反应缓冲溶液中要添加Mg2+、耐高温的DNA解旋酶

3 . 光敏色素基因在调节作物生长发育中具有重要作用。为探讨玉米中光敏色素基因A（含大约256个碱基对）在棉花种质资源创制中的利用价值，研究人员将A基因转入到棉花中，利用对棉花受体细胞进行检测，并通过电泳技术分析结果。该过程所用质粒与含光敏色素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图甲、乙所示，电泳检测结果如图丙。下列相关叙述错误的是（       ）

A．操作过程中需要用到的工具有限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体

B．构建表达载体时应选用BamHI和HindⅢ这两种限制酶

C．PCR反应过程中每次循环都要经历目的各不相同的两次升温和一次降温

D．由图丙电泳结果可知，1、2、3、4号转基因棉花均培育成功

4 . RDX是一种弹药使用后残留的危险污染物。研究人员将两个源于细菌的RDX 降解酶基因 XplA 和 XplB 插入柳枝稷草染色体中，如图所示，使柳枝稷草获得降解实弹射击场土壤中RDX的能力。若要通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA 和 XplB 基因，应选择的引物组合是（　　）

   

A．引物 1+引物3

B．引物 1+引物4

C．引物2 +引物3

D．引物2+引物4

5 . 原位PCR技术是利用原位PCR仪，在组织或细胞中靶DNA所在的位置上进行的PCR循环扩增，通过掺入标记基因直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。进行扩增时，反应体系中的反应成分需渗透到组织或细胞的靶DNA处才能进行扩增。PCR反应体系中需要添加一定浓度的Mg²⁺，而组织细胞间的物质会吸附Mg²⁺，使进入细胞的Mg²⁺减少。下列说法正确的是（       ）

A．PCR技术中复性是当温度下降到65℃时，两种引物与两条DNA单链结合的过程

B．反应体系中扩增的原料会依次连接到子链的5端

C．反应体系中引物的G，C碱基含量越高越好，因为越高引物结合的特异性越强

D．原位PCR反应体系中使用的Mg2+浓度要比常规PCR高

6 . 干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，它是一种抗病毒的特效药。“中国干扰素之父”侯云德院士利用基因工程的方法获得了人干扰素α-1b，用于临床疾病的治疗。回答下列相关问题。
(1)获得基因工程用的干扰素基因，需先从T淋巴细胞的细胞质中获得___________，经逆转录获得cDNA，再利用___________技术扩增干扰素基因，扩增干扰素基因的前提是要有一段已知目的基因的___________，以便合成引物。
(2)利用山羊乳腺生物反应器来生产干扰素时，要将改造后的人干扰素基因与山羊乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，目的是___________。然后将基因表达载体导入山羊的（填“受精卵”或“乳腺细胞”）中。____________________________
(3)有人尝试让植物细胞产生干扰素，经探索发现水稻胚乳细胞作为反应器的效果比较好。在用农杆菌Ti质粒构建基因表达载体时，应将干扰素基因插入T-DNA片段________________（填“内”或“外”），Ti质粒上的T-DNA的作用是________________。检测水稻胚乳细胞中干扰素基因是否成功表达可采用的方法是。___________________________

7 . 在基因工程中，构建基因表达载体时工具酶的作用部位以及PCR扩增DNA时90摄氏度高温的作用部位是（       ）
   

A．a

B．b

C．c

D．d

8 . PCR作为体外酶促反应体系，其效率和特异性取决于两个方面：一是引物与模板的特异性结合，二是Taq酶对引物的延伸。引物设计的总原则是提高扩增的效率和特异性。下列有关叙述错误的是（　　）

A．引物长度过短，特异性降低

B．经过5次循环后消耗引物64个

C．两种引物的碱基序列不能发生碱基互补配对

D．在第2轮循环产物中开始出现等长的目标DNA片段

9 . 科研人员将寒带地区海鱼体内的抗冻基因导入千禧果（一种番茄品种）细胞，成功培育出抗冻千禧果。下图为培育过程中使用的Ti质粒示意图，其中Vir区的基因活化能促进的加工和转移。回答下列问题：
   
(1)将抗冻基因的mRNA逆转录后，再进行PCR可获得抗冻基因，该过程中所需要的酶是________。每次PCR循环分为3步，其中所需温度最低的一步称为________，PCR扩增抗冻基因时需要添加特异性引物，目的是________。
(2)抗冻基因不能直接导入受体细胞，需要构建抗冻基因表达载体。构建抗冻基因表达载体的目的是________（答出1点）。
(3)选择图中Ti质粒构建基因表达载体时，不能选择限制酶Ⅱ切割Ti质粒，原因是________，最好选择限制酶________构建基因表达载体。
(4)为筛选成功导入抗冻基因的千禧果细胞，最好在培养基中添加________。将成功转化的千禧果细胞诱导培育成植株，最后在________条件下筛选出具有抗冻性状的千禧果植株。

10 . 干扰素(IFN)是一类蛋白质，它作用于靶细胞产生抗病毒作用，还具有抑制癌细胞生长和调节免疫功能等作用。用基因工程来研究和生产干扰素成为科学家努力的目标，下图为基因工程技术获取干扰素的三条途径。请回答下列问题：
   
(1)为了快速获得更多的干扰素基因，常采用PCR技术进行扩增，该过程用到的酶是_____。
(2)将IFN基因导入大肠杆菌一般先用_____处理大肠杆菌，使其处于感受态。图中①用到的技术为___。将IFN基因导入动物受精卵常用的方法是___。
(3)利用转基因牛生产干扰素时，需要将IFN基因与____的启动子等调控组件重组在一起；若要得到更多的乳腺生物反应器可以对图中②获得的_____阶段的早期胚胎进行分割。
(4)在胚胎移植前，需对早期胚胎进行筛选和鉴定，科研人员取囊胚的细胞，利用SRY基因（位于Y染色体上的性别决定基因）制成的探针进行____检测，将检测结果呈_____(填“阳”或“阴”)性的胚胎进行移植。
(5)利用农杆菌转化法将IFN基因导入植物细胞，常用Ti质粒作为载体的原因是____。