1 . 生物技术与工程学相结合，可研究、设计和加工生产各种生物工程产品。下列有关叙述正确的有（       ）
①用花药培养得到单倍体植株需要用到植物组织培养技术
②由iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用
③胚胎移植作为胚胎工程的最后技术环节，推动了胚胎工程其他技术的研究和应用
④PCR反应过程可以在PCR扩增仪中自动完成，而后常用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物
⑤利用基因工程技术的生物反应器，可以让哺乳动物批量生产相应的药物
⑥蛋白质工程仅以蛋白质结构为基础，逆中心法则进行，就可以改造或制造新的蛋白质

A．2项

B．3项

C．4项

D．5项

2 . 下图示利用重叠延伸PCR技术改造目的基因的原理。相关叙述错误的是（       ）

   

A．图示操作中至少需要用2种限制酶对目的基因进行处理

B．操作中引物2和引物3序列应含有拟突变位点，且可以互补

C．应选用引物1和引物4进行PCR3，以获得大量目的基因序列

D．此过程实现的基因序列改变属于基因突变，未发生基因重组

4 . 基因工程是培育新品种花卉的一种重要技术手段。研究发现普通矮牵牛花因缺乏蓝色色素合成所需的转座酶而不能开蓝色花，研究人员从蔷薇花瓣细胞中分离提取的转座酶F35H基因转入普通矮牵牛中，获得蓝色矮牵牛新品种。回答下列问题：
(1)从蓝色矮牵牛花瓣细胞中粗提取DNA时，加入酒精的目的是______。对粗提取的DNA进行鉴定时，加入______试剂后置于沸水中加热。
(2)提取蓝色矮牵牛花DNA，获取F35H基因，并PCR扩增，已知F35H基因的两端碱基序列如下：

采用PCR技术扩增该基因，需要使用的引物1序列为5'-TCTGTTGAAT-3'，则引物2的序列为______（标出：5'和3'端）。在PCR扩增仪中已加入了一定的缓冲溶液、F35H基因、Mg²⁺、Taq酶、两种引物，还需要加入的物质有______。
(3)PCR扩增过程一般由变性、复性和延伸三步经多次循环完成。其中延伸阶段选用72℃而非95℃综合考虑了两个因素：______和______。
(4)扩增得到的PCR产物一般先通过______对产物进行初步鉴定，如下图。F35H基因的大小约为990bp。结果显示，______号样品具有阳性条带，且条带长度符合预期，即为成功导入F35H基因的植株。

5 . THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述不正确的是（　　）

EcoR Ⅰ	BamH Ⅰ	Kpn Ⅰ	Mfe Ⅰ	Hind Ⅲ

A．若采用PCR技术对一个THP9基因进行扩增，则第n轮复制共需要引物2n-2个

B．构建基因表达载体时用MfeI、HindⅢ切割质粒，用EcoRI、HindⅢ切割目的基因

C．利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物2和引物3

D．DNA聚合酶将4种脱氧核苷酸加到引物的3'端

6 . HER2蛋白是人类表皮生长因子受体，在细胞生长发育及分化过程中起重要作用，HER2蛋白过量表达会导致细胞功能紊乱，常与肿瘤的发生发展密切相关。
(1)用纯化的HER2蛋白多次免疫小鼠，取免疫小鼠的___细胞与骨髓瘤细胞杂交，用___筛选获得杂交瘤细胞，该细胞的特点是___。对杂交瘤细胞进行多次___，获得能分泌所需抗体的细胞。提取该细胞的总RNA，将mRNA逆转录成cDMA，以cDNA为模板进行___获得大量抗体可变区（结合抗原区）基因序列，将人抗体基因的恒定区基因序列与其相连，用___酶构建人源化抗体表达载体，导入人胚肾细胞，实现人源化抗HER2抗体的体外生产。最后通过接头将抗HER2抗体与细胞毒素结合，制备出ADC。
(2)为探究荷载不同种类药物的ADC的杀伤力，研究人员将等量的药物E、F、E+F分别连接到同种抗体上，制备了三种ADC，并对表达HER2的乳腺癌细胞株（HER2+）和不表达HER2的乳腺癌细胞株（HER2-）进行了体外毒性实验，结果如图。

①为与实验组形成对照，对照组应添加等量的___。
②该实验的结论是___。

7 . 研究者运用基因工程手段将SLA-2基因进行改造并在猪肾上皮细胞（sT2细胞）中表达。实验的主要流程如图1，图1中SLA-2基因长度为1100bp，质粒B的总长度为4445bp，其限制酶切点后的数字表示距复制原点的距离。图1中的限制酶的识别序列及切割位点如图2所示。请回答：

(1)对SLA-2基因进行PCR时下列4种引物中应选择的是___。

A．5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGCCCCTCAAGCCATCCTC

B．5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGA

C．5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCT

D．5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGGTCCTTGGTAAGGG

(2)控制表达载体大量扩增的组成元件是___。
(3)若用Sau3AI和XbaI完全酶切质粒C后，获得的DNA片段长度为___（不考虑PCR时所用的引物长度对结果的影响）。
(4)科研中常用嘌呤霉素对真核细胞进行筛选，一般选择最低致死浓度的前一个浓度作为筛选浓度的原因是：既可以让没有抗性的细胞死亡又不会让具有抗性的细胞死亡。用没有抗性的细胞实验，实验结果如下图3，根据实验结果最佳的嘌呤霉素筛选浓度为___。

(5)过程⑦研究人员用___（填物质）检测肾上皮细胞生产的抗原肽。

8 . 下列关于“细胞内DNA复制”和“PCR技术”的叙述中，正确的是（　　）

A．两者都必须利用解旋酶来解开双螺旋

B．两者都以脱氧核苷酸为原料，以ATP供能

C．两者的子链都是从5'→3'方向延伸合成

D．两者都需要依赖Taq DNA聚合酶的催化

9 . 利用PCR能够快速扩增目的基因，也可以检测基因的表达情况。下列有关PCR的叙述，正确的是（       ）

A．利用PCR技术可以检测是否产生相应的蛋白质

B．PCR过程中需要用到耐高温的解旋酶

C．每一次PCR循环过程中，都需要引物与模板链相互结合

D．当温度下降到72℃时有利于引物和两条单链DNA结合

10 . RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的PCR相结合的技术，可利用此技术获取目的基因，具体过程如图所示。以下说法错误的是（       ）

A．设计扩增目的基因的引物时需已知一段目的基因序列

B．GC含量高的引物在与模板链结合时，需要更高的温度

C．过程I需要加入缓冲液、原料、耐高温的DNA聚合酶和引物A等

D．过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上需要2n-1个引物B