1 . 新冠肺炎目前已成为影响全球的严重肺部传染性疾病，为遏制新冠肺炎传播，必须快速检测出新冠病毒感染者并排除非携带者，同时尽快研制出新冠疫苗，以便采取针对性的预防措施。
(1)目前检测的方法主要是病毒核酸检测，该方法利用核酸强大的体外扩增能力。主要原理：取得咽拭子样本提取出 RNA，并将 RNA 转变为 DNA。接着用 PCR 扩增，最后再用荧光标记的含目的基因的单链 DNA 或_____检测病毒 DNA 的存在。其中 RNA 转变为 DNA 的过程需在样本中加入_____酶，PCR 需在样本中再加入引物、原料（dNTP）、_____，一般要经历 30 多次循环，每次循环可以分为_____三步。
(2)目前研制的新冠疫苗主要是基因工程疫苗。我国陈薇院士团队成功开发了一种以人复制缺陷腺病毒为载体的重组新型冠状病毒疫苗，用来制备该疫苗的目的基因由_____的一段无毒序列构成，在构建基因表达载体时，需将目的基因插在腺病毒载体的_____之间，构建基因表达载体的目的是：使目的基因在受体细胞中_____并且可以遗传给后代，同时使目的基因能够________。

2 . PCR技术可用于临床的病原菌检测。为检测病人是否感染了某种病原菌，医生进行了相关操作：①分析PCR扩增结果；②从病人组织样本中提取DNA；③利用PCR扩增DNA片段；④采集病人组织样本。回答下列问题：
(1)若要得到正确的检测结果，正确操作顺序应该是______（用数字序号表示）。
(2)操作③中使用的酶是______ 。PCR反应中的每次循环可分为______、复性、______三步，其中复性的结果是______ 。
(3)为了做出正确的诊断，PCR反应所用的引物应该能与______特异性结合。
(4)PCR（多聚酶链式反应）技术是指_______________。该技术目前被广泛地应用于疾病诊断等方面。

3 . 下列有关PCR技术的说法，不正确的是

A．PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术

B．PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA

C．PCR技术的原理是DNA双链复制

D．利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列

4 . 在核酸分子杂交技术中，常常使用已知序列的单链核酸片段作为探针。为了获得B链作探针，可应用PCR技术进行扩增，应选择的引物种类是

A．引物1与引物2

B．引物3与引物4

C．引物2与引物3

D．引物1与引物4

5 . 基因a在人体细胞中可表达出蛋白质a。有生物学家从人的DNA中分离出基因a， 并通过转基因技术将其转入了细菌。经过培养发现，该转基因细菌产生了一种新蛋白质X。进一步分析表明：蛋白质X是基因a仅在细菌中的表达产物。下列说法正确的是

A．基因a在体外扩增需要引物，在人体细胞中的复制不需要

B．细菌细胞和人体细胞中作为翻译模板的RNA碱基序列不同

C．基因a在体外扩增和在人体细胞中复制都是在解旋酶的作用下打开双链

D．将基因a在体外扩增时，必须要先测出基因a的所有脱氧核苷酸序列

6 . 下列对PCR过程中“温度的控制”的叙述中不正确的是（       ）

A．PCR反应需要高温，是为了确保模板是单链

B．延伸的温度必须大于复性温度，而小于变性温度

C．要用耐高温的DNA聚合酶

D．需要耐高温的解旋酶

7 . 请回答基因工程方面的有关问题:
（1）利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。


①理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为____________。
②在第_________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
（2）设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如图）,请分别说明理由。
①第1组:_____________________________________________；
②第2组:_____________________________________________。
（3） PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为_____。

（4）用限制酶EcoRV、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒,得到的DNA片段长度如下图（1 kb即1000个碱基对）,请画出质粒上EcoRV、MboⅠ的切割位点_____________________。

8 . 多聚酶链式反应(PCR技术)是体外酶促反应合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，其简要过程如图所示。下列关于PCR技术叙述不正确的是(　　)

A．PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术

B．反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板

C．PCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增

D．应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变

9 . 关于PCR的说法不正确的是（     ）

A．PCR是体外复制DNA的技术	B．PCR过程中只需要两个引物分子
C．Taq酶是一种热稳定DNA聚合酶	D．PCR利用的是DNA双链复制原理

10 . 生物技术实践与人们生产和生活密切相关，也为许多学生将来走进职业奠定知识基础和能力基础。请回答下列有关生物技术实践中的问题：
（1）在制作腐乳、果醋、泡菜的过程中需要氧气的是__________。为提高果酒的品质及节约生产成本，厂家已尝试使用固定化细胞技术来生产果酒，固定化酵母细胞常用方法是________。
（2）某种全自动洗衣机的水温有冷水、35℃温水、70℃热水三种设置，洗涤方式有直接洗涤和浸泡20分钟后洗涤两种设置。如果用加酶洗衣粉洗涤有牛奶渍的棉质衣服，选择哪种水温和洗涤方式洗涤效果最好?____________。
（3）PCR技术能把某一DNA分子片段进行扩增，依据的原理是______，每次循环需要经过__________、复性、延伸三步。
（4）DNA指纹图谱可用于亲子鉴定。如图为某孩子、已故母亲和四位男性的DNA指纹图谱。请据图分析：F₁~F₄中，该小孩生物学上的父亲最可能是_______。