1 . 人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

（1）科学家用PCR的方法对htPA基因进行体外扩增，基本过程如下图，请据图回答：

①PCR包括三个步骤 Ⅰ___________，Ⅱ____________，Ⅲ____________。
②加热至94℃ 的目的是使DNA样品的_______键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过__________酶的作用来完成的。新合成的DNA分子中的A+T/C+G值与亲代DNA分子的A+T/C+G值______________ （填“相同”或“不同”）。
③如果htPA基因的部分序列是：
5’---ATGGCT………AGGAAC---3’
3’---TACCGA………TCCTTG---5’
根据上述序列应选择引物______________（填字母）进行PCR。
A.引物：5’-TACCGA-3’                    B.引物：5’-GTTCCT-3’
C.引物：5’-AUGGCU-3’                  D.引物：5’-ATGGCT-3’
（2）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。通常用________等技术检测htPA基因是否插入到早期胚胎的的染色体DNA上。利用________和胚胎移植技术可获得同卵多胎的转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的________。
（3）若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到________，说明目的基因成功表达。

2 . 用PCR扩增下面的DNA片段：
5'GACCTGTGGAAGC……          CATACGGGATTG3'
3'CTGGACACCTTCG……          GTATGCCCTAAC5'
供选择的引物有：
①5'GACCTGTGGAAGC3'、②5'CATACGGGATTG3'、
③5'GTATGCCCTAAC3'和④5'CAATCCCGTATG3'
共四种，应选择（       ）

A．①②	B．②③
C．③④	D．①④

3 . 在“内蒙古白绒羊种羊场”诞生了目前国际上规模最大的一批转基因克隆绒山羊。关于克隆除个体水平外，还有分子、细胞、器官等水平的克隆，下列不属于克隆技术的是（       ）

A．利用PCR技术扩增目的基因

B．农业生产上利用马铃薯的芽繁殖马铃薯

C．某特定的外源基因在哺乳动物细胞内表达

D．从出生不久的小鼠心脏取下细胞在体外进行细胞培养

4 . 下列关于PCR技术的叙述，正确的是（       ）

A．PCR反应体系中需要添加解旋酶以获得单链模板

B．已知模板DNA的碱基序列是设计PCR引物的前提条件

C．在恒温条件下进行PCR扩增以避免温度变化导致酶失活

D．在设计两种引物时，需要让引物和引物之间的碱基序列互补

5 . 下列关于生物工程的叙述，不正确的是（       ）

A．PCR技术中破坏氢键时不使用解旋酶

B．卵裂期的胚胎总体积并不增加或略有缩小

C．动物细胞培养时定期更换培养液可以清除代谢产物

D．动物细胞核移植时常用减数第一次分裂中期的卵母细胞做受体细胞

6 . 下图为数字PCR技术的原理示意图，下列相关叙述错误的是（       ）

A．PCR每一循环包括变性、复性（退火）和延伸三步

B．每个反应单位中都含有耐高温的RNA聚合酶

C．每个反应单位有无荧光取决于是否含有靶分子

D．数字PCR技术有利于提高病原体检测的灵敏度

7 . 下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，有关说法错误的是（       ）

A．A→B过程中一般用4种脱氧核糖核苷酸为原料，并加入一种引物

B．A→B过程利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶

C．B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是受精卵细胞

D．B→D为转基因植物大豆的培育过程，其中④过程可用农杆菌转化法

8 . DNA复制在细胞内外均可发生，细胞内如细胞分裂的间期时进行的DNA复制，细胞外如PCR过程。下列对二者的叙述错误的是（　　）

A．都以半保留复制的方式进行

B．都以脱氧核糖核苷酸为原料

C．PCR所用的DNA聚合酶比细胞内DNA复制所用的更耐高温

D．胞内DNA复制通过ATP提供能量，而PCR则通过高温供能

9 . 利用PCR技术扩增目的基因的过程中两种引物分别为A和B，其原理与细胞内DNA复制类似。下列叙述错误的是（　　）

A．从理论上推测，第二轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/4

B．在第二轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段

C．引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因

D．耐热的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3’端

10 . PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，与人体细胞内DNA分子复制相比，下列有关叙述错误的是（       ）

A．都遵循碱基互补配对原则

B．DNA聚合酶作用的最适温度不同

C．都是边解旋边复制的过程

D．复制方式都是半保留复制