28. 普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏。科学家将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞,培育出了抗软化、保鲜时间长的转基因番茄。图1为操作流程图,KmR为卡那霉素抗性基因PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ为四种限制酶切割位点,据图回答问题。
(1)本实验中的目的基因为
_____________,使用
___________技术获取大量的该基因。在构建重组质粒过程中,为了确保目的基因和质粒定向连接,需要使用的限制酶有
____________。
(2)将获得的重组质粒利用
__________导入到普通番茄细胞中,为筛选含有目的基因的番茄细胞,需要在培养基中加入
___________。
(3)如果利用上述方法培育出的番茄不具抗软化性状,用
____________作探针进行分子杂交技术检测,发现细胞内有目的基因存在,但检测不到mRNA1分子,可能原因是目的基因上游缺少
______。
(4)根据图中转基因番茄细胞中的信息表达过程,分析转基因番茄抗软化的原理
____。