29. (一)某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解,会对环境造成污染,只有某些细菌能降解S.研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株,且细菌降解S后会在菌落外周形成透明圈。实验过程中需要甲、乙两种培养基,甲的组分为无机盐、水和S,乙的组分为无机盐、水、S和Y。
(1)实验时培养基通常采用
_________的方法进行灭菌.乙培养基中的Y物质是
_________。甲、乙培养基均属于
_________培养基。
(2)实验中初步估测M中细菌细胞数为2×10
7个/mL,若要在每个平板上涂布0.1ml稀释后的菌液,且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个,则至少应将摇瓶M中的菌液稀释
_________倍.培养过程中定期取样并用
_________的方法进行菌落计数,评估菌株增殖状况.用平板培养细菌时一般需要将平板
_________(填“倒置”或“正置”).
(3)最后从平板中挑选
_________的菌落,其降解S的能力较强。
(二)胰岛素的生产由提取动物胰岛素,发展到了利用基因工程生产重组人胰岛素。
(4)为避免目的基因任意连接和载体自身环化,应选用上图
_________酶处理目的基因和载体。
(5)构建的基因表达载体除目的基因、标记基因外,还必须有
_________、
_________、
_________等。
(6)利用奶牛设计乳腺生物反应器生产人胰岛素,为使人胰岛素基因在奶牛乳腺中特异表达,构建基因表达载体时应将目的基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,并选用
_________为受体细胞。