【推荐1】资料1：据史料记载，早在公元5世纪魏代古籍中，就有腐乳生产工艺的记载，到了明代我国就大量加工腐乳，而今腐乳已成长为具现代化工艺的发酵食品。清代医学家赵学敏编著的《本草纲目拾遗》中记述：“豆腐又名菽乳，以豆腐腌过酒糟或酱制者，味咸甘心。”
资料2：手机现在已经成为人们离不开的通讯和娱乐工具，据传言手机屏幕上的细菌比马桶按钮上的还要多。某生物兴趣小组为了验证这一传言是否正确，进行如图所示实验并展示调查的结果。

请回答下列问题
据资料1：
（1）腐乳制作中有多种微生物参与发酵，其中主要是___________，其生长的适宜温度为___________℃。
（2）“味咸”是因为加了盐，加盐的目的除了调味以外，还有___________和___________的作用；酒的含量一般控制在12%左右，目的是可以抑制微生物的生长，同时使腐乳___________。
（3）“甘心”是指在多种微生物的协同作用下，普通豆腐转变成风味独特的腐乳，其原因是毛霉等微生物产生的___________将豆腐中的蛋白质分解成___________，将脂肪水解为脂肪酸和甘油。
据资料2：
（4）该实验需制备培养基，培养基的营养成分一般包括水、碳源、___________等。据图，两实验组均采用___________法接种，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的___________，该方法测定的活菌数比实际值偏___________，原因是___________。
（5）在接种前需要检测培养基是否被污染，对于固体培养基常采用的检测方法是，将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，___________，则培养基未被污染；反之，则培养基被污染。

【推荐2】扩展青霉常见于腐烂苹果中，其分泌的扩展青霉素（Pat）是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，进行了如图所示实验：其中“病健交界处”为病斑与正常部位的交界处，依据与病斑的距离不同将苹果划分为①-⑤号部位，其中②③④已明显腐烂，⑤为剩余部分。回答下列问题：

(1)扩展青霉菌种使用的培养基成分如下表，根据物理性质划分该培养基属于____培养基，其中能为扩展青霉的生长繁殖提供氮源的是____。在培养霉菌时，一般需要将培养基pH调至____。接种至苹果之前用该培养基培养的目的是____。

蔗糖	NaNO3	MgSO4	KCl	FeSO4	KH2PO4
30g	2g	0.5g	0.5g	0.01g	1g

(2)接种前，应对苹果进行____（填“消毒”或“灭菌”）。用平板划线法分离扩展青霉时，划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，其他区域的划线上却均无菌落，操作失误的原因可能是第一区域划线结束，接种环灼烧后未冷却就开始在第二区域划线，或是____。若想快速直观的测定青霉菌的数量，最常用的方法是____。
(3)研究人员测定了病斑直径为1cm、2cm、3cm的苹果中①～⑤号部位的Pat含量，结果如下图：

①研究腐烂苹果中Pat的分布实验的自变量是____，因变量是____。
②在曲线图中，2cm病斑和3cm病斑的①部位的Pat含量与②③部位的Pat含量____（“成”或“不成”）正比关系，说明____（能/不能）根据病斑大小来确认腐烂部位的果肉中Pat含量的高低。
③就图分析，不建议食用苹果去除腐烂后的剩余部分，是因剩余部分____，食用后可能存在健康风险。

【推荐3】反硝化细菌是一类能将硝态氮（﹣N）脱氮，还原为气态氮（N₂）的细菌群，反硝化作用也是产碱过程。反硝化细菌对于解决水体富营养化和亚硝酸盐对水生动物的毒害，具有十分重要的意义。某课题小组通过采集活性污泥样品，并从中分离反硝化细菌，进行相关研究。反硝化细菌的分离和鉴定流程如下，回答下列问题：

(1)活性污泥是微生物的天然培养基，该培养基能为微生物的生长提供四大营养物质，分别是________________________。
(2)将采集的活性污泥样品 10g 加入到装有 90mL 无菌水的烧杯中，摇匀，取 1mL 上清液加入盛有 9mL 无菌水的试管中，依次等比稀释。分别取 0.1mL 菌液，使用______（工具）将菌液接种于培养基表面。10⁵ 倍稀释液对应的三个平板的菌落数分别为 83、84、85，则每克污泥中微生物有______个。
(3)富集培养是将活性污泥样品接种到富集培养基中培养，富集培养基的成分有：KNO₃2g，FeSO₄0.2g，KH₂PO₄1.0g，MgSO₄0.5g，NaCl2g，CaCO₃5g，其中为反硝化细菌提供氮源的是______，富集培养的目的是________________________。
(4)将富集后的样品均匀涂布在 BTB 培养基（BTB 培养基初始 pH＝6.8，BTB 是酸碱指示剂，酸性条件下为黄色，中性条件下为绿色，碱性条件下为蓝色）上，放在 30℃环境中培养 2～3 天后，挑选周围显______色的单菌落在固体培养基上划线分离，获得纯菌株。
(5)向几组等量的灭菌后的培养基中分别以 1%、3%、5%、7%和 10%的接种量接入反硝化菌株，在 30℃，120r/min 摇床震荡培养，24h 后测量﹣N 等指标，结果如图所示：

①本研究的目的是________________________。
②当投菌量达到______时，反硝化效果最好，依据是___________。

【推荐1】餐厨垃圾废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用，但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比，来制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：
将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：

编号	R0	R1	R2	R3
圆褐固氮菌:巨大芽孢杆菌	1:0	0:1	1:1	2:1

(1)将上表菌液分别接种于l00mL___________中进行振荡培养。
(2)振荡处理的目的是___________。
(3)本实验还需设置对照组为___________。
(4)培养3天后测定活菌数，取一定量菌液进行___________稀释，然后分别取0.1mL的菌液采用___________法接种于基本培养基中培养。
(5)进行计数时，可依据___________对两种菌进行区分，并选取菌落数在30~300内的平板进行计数，利用此方法计数的结果会比实际菌数偏___________。实验结果如图1所示，由实验结果可知___________。
   
为进一步探究菌种比例对该餐厨垃圾废液中蛋白质、脂肪等有机物的降解效果，测得15天内废液中蛋白质、脂肪的含量变化如图2所示：
   
(6)由实验结果可知分别选取___________的接种比对该餐厨垃圾废液中蛋白质、脂肪降解效果最好。
(7)废液中个别组蛋白质含量在后期升高，分析可能的原因是___________。
(8)餐厨垃圾废液中的某些细菌可将尿素分解成CO₂和NH₃，供植物吸收和利用。下列关于分解尿素细菌的分离和计数的叙述，正确的是（       ）

A．分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2作为碳源的

B．倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

C．培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定

D．若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平均值为34个/平板

【推荐2】回答下列（一）、（二）小题：
（一）中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。

回答下列问题：
(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为_____________，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用______________的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。取10mL培养液加入90mL无菌水，混匀，静置后取上清液并稀释，将0.1mL稀释液接种于培养基上。10⁴倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95，则每毫升样液中微生物数量为______________个。此外，选育优良菌株的方法还有______________等。
(2)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是_______________。
(3)研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中______________可能是高密度培养的限制因素。
(4)菌株H还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等）来生产PHA，说明其能分泌______________。
（二）如图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：

(5)图中B过程是_____________，cDNA文库____________（填“大于”“等于”或者“小于”）基因组文库。
(6)为在短时间内大量获得目的基因，可用____________扩增的方法，此方法中的每次循环可分为_____________延伸、退火三个步骤。
(7)目的基因获取之后，需要进行______________，此步骤是基因工程的核心。
(8)将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是____________，检测此基因在植物中是否表达成功，可以用____________技术进行检测。
(9)如果要想使该酶活性更强或具有更强的耐受性需要对现有蛋白质进行改造，这要通过被称为第二代基因工程的蛋白质工程。首先要设计预期的蛋白质结构，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的____________。

【推荐3】有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以______________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，这种培养基属于______________培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，下面两图是两种接种方法接种后培养的效果图解。获得图A效果的接种方法是_________，获得图B效果的接种方法是___________。

（3）在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如上图3。以下判断错误的是(        )
A．a处抑菌效果小于b处                      B．b处的滤纸片没有沥干
C．c处抗生素无效                                 D． d为对照
（4）结合以下图表分析，有关说法正确的是(         )

抗菌药物	抗菌机理
青霉素	抑制细菌细胞壁的合成
环丙沙星	抑制细菌DNA解旋酶的活性
红霉素	能与核糖体结合
利福平	抑制RNA聚合酶的活性

A．青霉素和利福平能抑制DNA的复制   B．环丙沙星和红霉素分别抑制细菌的①②和③   C．结核杆菌的④和⑤都发生在细胞质中     D．①～⑤可发生在人体健康细胞中

【推荐1】豆浆是人们热爱的早餐饮品，但它易变质，保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果，为生产豆浆时优化保质方法提供依据。主要研究过程如下：
①取少量变质的豆浆在无菌条件下接种到培养基X上，一天后长出了S₁、S₂和S₃三种菌落，计数后分别制成菌液。
②将三种菌液分别接种到加入了乳酸链球菌素的新鲜豆浆中，一段时间后统计豆浆中腐败细菌数量，结果如图所示。

（1）步骤①中适宜采用的接种方法是__________。
（2）培养基X应使用__________。
A．加伊红、美蓝染料的选择培养基                           B．牛肉膏蛋白胨通用培养基
C．加四环素的选择培养基                                  D．加青霉素的选择培养基
（3）据图可知最能耐受乳酸链球菌素的细菌是__________。为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量的最适浓度为__________mg/kg左右。
（4）腐败细菌细胞膜内侧附着有少部分核糖体，合成运输到胞外的蛋白酶。由此可知，在蛋白合成和加工过程中，真核细胞中__________结构的作用最类似于腐败细菌细胞膜。
（5）乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽。与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是__________。

【推荐2】苹果酒风味清爽，且具有保健养生的功效。用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒的简要流程如下：

(1)过程①榨取的果汁往往比较浑浊，解决的方法是_______。
(2)家庭制作果酒时，没有接种酵母菌的环节，发酵所用的酵母菌来自_______。若用密封的玻璃瓶进行发酵，每隔约12小时需将瓶盖拧松一次，这样做的目的是_______。
(3)过程②分离酵母菌应使用_______培养基（从功能分）。过程③固定化酵母细胞常采用_______法，如果希望反复使用这些固定化酵母细胞，一定要避免________。
(4)过程④完成后，可以用________检测发酵产物中是否有酒精产生。若要进一步检测所得果酒中酵母菌的密度，接种可采用_________法。

【推荐3】甲烷氧化菌生产的单细胞蛋白具有较高的经济效益。如图所示，某研究小组从污泥中分离出甲烷氧化菌。回答下列问题。

(1)在培养过程中，获得纯净甲烷氧化细菌的关键是____________________；因此，在配制培养基后，需对A和B培养基进行____________________灭菌。
(2)利用A培养基多次振荡培养的目的是______________________________（答出2点）。
(3)若要验证B培养基具有选择作用，则需要设计一组对照组，对对照组的处理是_________________________。实验结果是：接种48h后，实验组B培养基上的微生物在________________________________________（答出3点）等方面表现出稳定的菌落特征。
(4)测定甲烷氧化菌的数量时，通常选用10⁴、10⁵、10⁶倍的稀释液进行平板培养，目的是___________________（答出2点）。

【推荐1】中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗柠糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图，请回答问题。   

(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作______，并不断提高其浓度，经多次传代培养以获得目标菌株。培养过程中宜采用______法对样品中的活菌进行接种和计数，以评估菌株增殖状况。若某次取样中，对菌液稀释了10⁵倍后，在每个平板上涂布菌液的体积为0.1ml，平板上的平均菌落数为220个，则菌液中H菌的细胞数为_____个/L。菌落数目需要每隔一段时间统计一次，选取_____时的记录作为结果。
(2)发酵装置中搅拌器的作用是_____（答出两点）。
(3)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。分析该系统不需要灭菌的原因是_____（答出两点）。

【推荐2】现代工业生产中往往采用规范的流程进行发酵生产以提高生产效率,如图是发酵工程生产产品的流程图。据图回答下列问题。

(1)在啤酒生产中，使用①改造的啤酒酵母，可以加速发酵过程，缩短生产周期，①是________；高产青霉素菌种是通过②培育的，②是________；③是细胞工程。
(2)④表示____，⑤表示____。
(3)整个过程的中心阶段是发酵，在此阶段需要随时取样、检测等，以了解发酵进程，还要及时添加________，同时严格控制_________。
(4)若发酵所得产品是微生物细胞本身，则⑥是往往采用______的方法将菌体分离和干燥。

【推荐3】我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产的简要流程如图1所示，图2为啤酒发酵所用的发酵罐结构示意图。回答下列问题：

(1)制麦过程中常利用发芽的大麦种子产生的淀粉酶完成糖化过程，形成糖浆，淀粉糖化后啤酒酵母才能充分发酵的原因是_____。
(2)大麦发芽会消耗部分有机物，影响产量，利用_________（填植物激素）处理大麦可省略制麦环节，原因是________。
(3)整个过程的中心阶段是_________，在该时期要随时取样检测培养基中的____________等，同时，要严格控制____________等发酵条件。
(4)图2所示的发酵罐常常利用__________对发酵过程中的各种指标进行检测和控制，发酵过程中，由于微生物代谢产生的热量和搅拌叶轮搅拌产生的热量达到一定的数值时，可以通过_______________感受并控制冷却水从进水口进入。