1 . B基因存在于水稻基因组中，其仅在体细胞（2n）和精子中正常表达，但在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，设计了如下实验。

据图回答：
(1)B基因在水稻卵细胞中不转录，推测其可能的原因是卵细胞中_____。

A．含B基因的染色体缺失

B．DNA聚合酶失活

C．B基因发生基因突变

D．B基因的启动子无法启动转录

(2)将该序列与Luc基因（表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光）连接成融合基因（表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能），然后构建_____。
(3)在过程①、②转化筛选时，转化过程中T-DNA整合到_____，筛选鉴定在培养基中应加入_____。目的是筛选出_____。
(4)获得转基因植株过程中，以下鉴定筛选方式正确的是_____。

A．将随机断裂的B基因片段制备成探针进行DNA分子杂交

B．以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交

C．以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交

D．检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光

(5)鉴定转基因植物内B基因正常表达的方法_____。
(6)从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含一个染色体组，判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的，而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育，由此表明_____。

2 . PHB2蛋白是一种动物肝脏合成具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0.9kb（1kb=1000碱基对），利用大肠杆菌表达该蛋白。回答下列问题：
(1)为获取phb2基因，提取该动物_____内的RNA，再经_____过程得到cDNA，将其作为PCR反应的模板，并设计_____来扩增目的基因。PCR扩增过程为_____三个步骤。
(2)图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点见下表。为使phb2基因（该基因序列不含图1中限制酶的识别序列）与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入_____和_____两种不同限制酶的识别序列。选择这两种限制酶的理由是_____。

   

相关限制酶的识别序列及切割位点

名称	识别序列及切割位点	名称	识别序列及切割位点
HindⅢ	A↓AGCTT TTCGA↑A	EcoRI	G↓AATTC CTTAA↑G
PvitⅡ	CAG↓CTG GTC↑GAC	PstI	CTGC↓AG GA↑CGTC
KpnI	G↓GTACC CCATG↑G	BamHI	G↓GATCC CCTAG↑G

注：箭头表示切割位点
(3)转化前需用_____处理大肠杆菌细胞，使其处于吸收环境中DNA的生理状态，以提高转化效率。
(4)将转化后的大肠杆菌接种在含氨苄青霉素的培养基上进行培养，随机挑取菌落（分别编号为1、2、3、4）培养并提取质粒，用（2）中选用的两种限制酶进行酶切，酶切产物经_____方法分离，结果如图2，_____号菌落的质粒很可能是含目的基因的重组质粒。

   

注：M为指示分子大小的标准参照物；小于0．2kb的DNA分子条带未出现在图中

3 . 植树造林后，青山环抱，竹海连绵，植被覆盖率非常高，具有极佳的山地小气候，吸引了大批游客前来观光旅游，这主要体现了生物多样性的_____价值。经过几年的发展，在这里各种动植物丰富，为了可持续发展，政府建立了国家公园属于生物多样性的_____保护。

4 . 植树造林是“碳捕集”的重要措施之一，造林的树种应以本地树种为主，原因是_____（答出2点即可），这遵循了生态工程的_____原理。“碳减排”与我们的日常生活息息相关，试从衣食住行的角度分析“碳减排”可以采取的措施有_____。

5 . 干扰素是动物体内的一种蛋白质，可以用于治疗病毒的感染和癌症，但在体外保存相当困难。如图是利用蛋白质工程设计干扰素的生产流程图。据图分析，下列叙述正确的是（　　）

A．图中构建新的干扰素模型的主要依据是预期的蛋白质功能

B．图中新的干扰素基因必须加上启动子和终止子才能表达

C．图中改造干扰素结构的实质是改造干扰素基因的结构

D．图中各项技术并没有涉及基因工程技术

6 . 以下有关重组DNA技术的基本工具的说法中，错误的是（　　）

A．一种限制性内切核酸酶只能识别某种特定的脱氧核酸序列

B．质粒、噬菌体、动植物病毒等也可作载体

C．限制性内切核酸酶切割磷酸二酯键后可形成黏性末端或平末端

D．T4DNA连接酶既可以连接黏性末端也能连接平末端，但连接黏性末端效率较低

7 . 6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因X^F和X^S编码。基因型为X^FX^S的女性体细胞中的两个X染色体，会有一个随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化。将基因型为X^FX^S的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如图。有关叙述错误的是（       ）

A．该过程用到的细胞工程技术主要是动物细胞培养

B．用胰蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞

C．原代培养细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了多个细胞

D．单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同

8 . 堆肥指利用自然界广泛存在的微生物，有控制地促进固体废物中可降解有机物转化为稳定的腐殖质的生物化学过程。下图为堆肥处理时材料内部温度的变化曲线。若要从堆肥材料中筛选出能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，下列相关叙述错误的是（       ）

A．微生物呼吸作用释放的热量积累，导致堆肥内部温度逐渐升高

B．与a点相比b点时微生物的数量较多，与c点相比b点时微生物种类较多

C．c点时，可对堆肥取样并用角蛋白为唯一氮源的培养基对微生物群进行培养和筛选

D．若采用平板划线法分离微生物，需对取样获得的原液进行适当稀释后再划线

9 . 下图表示某细胞内发生的一系列生理变化，X表示某种酶。据图分析，下列有关叙述错误的是（　　）

A．X为RNA聚合酶，该酶主要在细胞核中发挥作用

B．该图中最多含5种碱基、8种核苷酸

C．过程Ⅰ仅在细胞核内进行，过程Ⅱ仅在细胞质内进行，图中X和核糖体的移动方向相同

D．b部位发生的碱基配对方式可有T—A、A—U、C—G、G—C

10 . 如图为某DNA分子的部分平面结构图，该DNA分子片段中含有100个碱基对、40个胞嘧啶，则下列说法错误的是（       ）

   

A．③是连接DNA单链上两个核糖核苷酸的化学键

B．该DNA分子复制n次，含母链的DNA分子只有2个

C．①与②交替连接，构成了DNA分子的基本骨架

D．该DNA分子复制第n次，消耗的腺嘌呤脱氧核苷酸数为60×（2n-1）个