1 . 某小组为构建含有双标记基因的通用型动物转基因载体（质粒b），将1种标记基因（Neo基因）插入到质粒a中。但Neo基因两端无相应的限制酶识别序列，因此需要先设计一对引物，让Neo基因的两端分别增加相应的序列，然后通过PCR扩增得到DNA序列1，再经过酶切和连接后得到质粒b。构建动物转基因载体的过程如下图所示。（其中扩增DNA序列1的引物为：P1 5＇-TATGTCGAC……3＇；P2 5＇-TATATCGAT……3＇。限制酶及其识别序列为Hind Ⅲ： A^↓AGCTT、Sal Ⅰ：G^↓TCGAC、ClaⅠ： AT^↓CGAT NheⅠ ： G^↓CTGGC）回答下列问题：   

(1)根据引物分析，应使用______________（填限制酶名称）对DNA序列1和质粒a进行切割，经_______酶连接后得到质粒 b。
(2)含有Neo基因的细胞对G418 （一种抗生素）具有抗性，可用含G418的培养基筛选转基因细胞。为检测质粒b是否成功插入了Neo基因，首先将质粒b转染羊成纤维细胞，然后对细胞进行抗性检测。
①培养成纤维细胞的过程中，需要用_______________处理贴壁细胞，使之分散成单个细胞，离心收集后再进行传代培养。
②将转染质粒b的成纤维细胞分为两组（T₁、T₂），CTR组为未转染质粒b的成纤维细胞，进行细胞培养，结果如下表，T₂组的细胞生长情况为________________时说明质粒b成功插入了Neo基因，理由是___________________________________________________________。

组别	T1	T2	CTR
培养基	不含G418	含G418	含G418
细胞生长情况	未死亡	？	全部死亡