2 . 阅读下列材料，回答以下小题：
某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先从土壤中筛选出纤维素分解菌，并接种在已粉碎的作物秸秆堆中培养一段时间，再用清水淋洗秸秆堆，在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵。部分实验流程如图所示。

1．关于从土壤中筛选纤维素分解菌的实验，下列叙述错误的是（       ）

A．可选择在木材厂周围采集土样

B．需配制以纤维素为唯一碳源的选择培养基

C．对培养基进行高压蒸汽灭菌前应排尽锅内冷空气

D．采用稀释涂布平板法统计的活菌数低于实际菌落数目

2．关于酵母菌的乙醇发酵的实验，下列叙述正确的是（       ）

A．该淋洗液可作为培养酵母菌的天然培养基

B．乙醇发酵过程中需始终拧紧瓶盖以防止杂菌污染

C．乙醇发酵过程中丙酮酸被NADH直接还原为乙醇

D．发酵液中的乙醇可用溴麝香草酚蓝溶液检测

3 . 自然界有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构。欲从某湖泊水样中分离、培养并鉴定出具有溶菌特性的细菌P，研究者将含有一定浓度细菌A（被用做溶菌对象）的少量培养基倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图），再将湖泊水样稀释后，依次涂布于不同的浑浊薄层上。下列判断错误的是（       ）

A．固体培养基只为细菌A的生长繁殖提供营养物质

B．薄层变浑浊是由细菌A的生长繁殖导致的

C．可根据细菌A的菌落周围是否出现溶菌圈来分离、培养并鉴定出细菌P

D．细菌P溶解细菌A的机理可能是细菌P分泌的某种化学物质使细菌A溶解破裂

4 . 中草药材在加工过程中会产生大量的废渣，废渣中含有多种营养物质。为了减轻废渣对环境的污染以及重复利用其中的纤维素，某大学研究团队拟从土壤中筛选高产纤维素酶的真菌。在土壤取样后需先进行富集培养（培养基配方如下表），增大目的菌的浓度。下列叙述错误的是（       ）

KH₂PO₄	MgSO₄	蛋白胨	X	H₂O
1．00 g	0．50 g	2．00 g	10．00 g	加至 1L

A．对从土壤中筛选高产纤维素酶的真菌的计数通常采用稀释涂布平板法

B．为达到富集培养能增加目的菌的浓度的目的，表中X处的成分是葡萄糖

C．在富集培养基的基础上配制对菌株初筛的培养基，至少还应添加琼脂和刚果红

D．在筛选得到纤维素分解菌后应向培养基中加入抗生素，使获得的菌落都是真菌

5 . 地沟油最大的来源为城市饭店下水道的隔油池，用脂肪酶处理地沟油具有广泛的应用前景。为获得高产脂肪酶的菌株，并将其应用于含地沟油的污水处理，某研究小组进行了一些实验。请回答下列问题：
(1)欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应配制以______为唯一碳源的固体培养基，这种培养基从功能上看属于______培养基。
(2)纯化菌种时，为了得到单一菌落，常采用的接种方法有两种，即______和______。
(3)统计平板上的菌落数，一般选择菌落数为_____的平板进行计数，在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出______。在现实中，这种计数方法得到的结果往往比实际数目少，其原因是______。

6 . 为加强校园食堂管理工作，切实保障师生的饮食安全和身体健康，学校食堂实行“6T”管理制度，以提高食堂饮食卫生状况。食品卫生检验检疫人员对某学校食堂自来水进行随机抽样检测细菌总数和大肠杆菌是否超标。已知大肠杆菌的代谢产物能与伊红—美蓝指示剂结合，使菌落呈深紫色并有金属光泽。我国《生活饮用水卫生标准》GB5749-85中关于生活饮用水的细菌标准的具体规定如下：
细菌总数：1mL水中不超过100个；大肠杆菌数：1L水中不超过3个。
下表是检测人员用于培养细菌的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题：

成分	蛋白胨	乳糖	蔗糖	K2HPO4	伊红—美蓝	琼脂
含量（g）	10.0	5.0	5.0	2.0	0.2	12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

(1)根据培养基用途划分，该培养基属于___________________（填“选择”或“鉴别”）培养基。在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要用___________________法对培养基进行灭菌。
(2)检疫人员检测大肠杆菌时培养得到的结果如图甲所示，其对应的接种方法应是___________________；假设取0.1mL水样进行检测统计细菌总数，实验所用3个平板的平均菌落数结果如图乙所示，根据结果判断该校自来水细菌总数是否超标并说出判断理由？______________________________________。
   
(3)饮用水的消毒方法常见的主要有：次氯酸钠、紫外线、臭氧消毒等方法。经氯剂消毒的自来水中大肠杆菌数量极少，采用常规滤膜培养法检测会出现阴性结果，而PCR法灵敏度高，可以检测出水样中极少量的大肠杆菌。有研究表明，PCR法比较适用于氯剂消毒或臭氧消毒的饮用水大肠杆菌的检测。在PCR扩增过程中，需要将温度加热至___________________℃以上，其目的是使大肠杆菌DNA受热变性后解为单链；当温度加热至72℃左右时，互补链可在___________________酶的作用下，以单链DNA为模板，利用4种脱氧核苷酸为原料从引物的___________________端开始进行延伸DNA链。

7 . 下表是培养某种微生物的培养基配方，以下说法正确的是（       ）

成分	NH4NO3	KH2PO4	CaCl2	FeSO4	维生素	蒸馏水
含量	0.5g	3.0g	0.5g	0.5g	少许	定容至1000ml

A．该培养基中含有碳源、氮源、水和无机盐四类物质

B．该培养基可用来培养硝化细菌，不能用来培养酵母菌

C．该培养基在培养硝化细菌时，需要密封

D．要用该培养基培养酵母菌，需要加入葡萄糖作为氮源

8 . 微生物培养皿艺术是将微生物培养与艺术创作相结合，以不同的微生物作“颜料”，固体培养基作“画板”，通过微生物培养创作艺术图形，可展示多姿多彩的微生物世界。下列说法错误的是（　　）

A．制备平板培养基时需要调整pH

B．培养基灭菌后需冷却到50℃左右才能倒平板

C．灼烧接种环后应趁热快速挑取菌落

D．使用后的培养基倒掉前应先进行灭菌处理

9 . 异丁醇具有燃值高、能量密度高等优点，其开发和利用对优化我国能源结构和保护环境有非常重要的意义。科研人员构建了一种表达载体pUC18（如图1）导入酵母菌，用于过量表达ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因，以期实现大规模生产异丁醇。图2是酵母细胞中葡萄糖代谢产生异丁醇、乙醇和乙酸的示意图，其中基因ADHs和ALDs分别控制E酶和F酶的合成。回答下列问题：
      
(1)将基因ILV2、ILV5、ILV3和AR010依次插入到质粒上的目的基因插入位点，选用高表达启动子pTEF1和____________作为调控序列。pTEF1是_____________识别并结合的位点。
(2)科研人员先将pUC18转化到大肠杆菌细胞中，以便筛选、保存和扩增重组质粒。重组质粒上的____________（填“真核”或“原核”）生物复制原点使pUC18能在大肠杆菌中扩增。已知氨苄青霉素抑制细菌细胞壁的合成，pUC18中氨苄青霉素抗性基因的作用是____________。
(3)提取完整的重组pUC18并导入组氨酸缺陷型酿酒酵母细胞中，将菌株接种在培养基中以获得单菌落，该过程称为微生物的_____________培养。除必要的营养物质外，该选择培养基中需要添加的物质是____________。
A．组氨酸                    B．氨苄青霉素                    C．琼脂
(4)根据图示酵母细胞葡萄糖的代谢途径，为了进一步提高异丁醇的产量，应对基因____________进行改造使其表达产物减少。

10 . 我国是世界上啤酒生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成，啤酒生产的简要流程如图所示，制麦时用赤霉素溶液浸泡大麦种子，糖化主要是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子。分析回答下列问题：
   
(1)可利用接种环在_________（填“固体培养基”或“液体培养基”）表面连续划线得到酵母菌的纯培养物，连续划线的目的是_________。经数次划线后培养，可分离得到单菌落，获得单菌落后，可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是_________。
(2)制麦时用赤霉素溶液浸泡未发芽的大麦种子，目的是_________，以利于糖化过程的进行。
(3)糖化后获得的糖浆要进行蒸煮，目的是_________。
(4)影响啤酒风味的因素除了菌种外，还可能是_________（答出两点）等。