1 . 我国规定1L自来水中大肠杆菌数不得超过3个。某兴趣小组利用滤膜法对校内自来水中大肠杆菌数量进行检测。下列有关叙述错误的是（　　）

A．在培养基中添加青霉素，统计的大肠杆菌数量会增多

B．滤膜的孔径应小于大肠杆菌，过滤水样应足量

C．加入伊红美蓝能够鉴别大肠杆菌，菌落颜色为黑色

D．接种后的培养基置于37℃恒温培养箱中培养24小时

2 . 丙草胺是一种应用广泛的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某生物兴趣小组从活泉公园土壤中分离出能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其进行计数（如下图所示），以期为修复被丙草胺污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（　　）

   

A．用以丙草胺为唯一氮源的培养基进行培养

B．将培养基pH调至酸性，有利于丙草胺降解菌的生长繁殖

C．通过计算得知每克土壤中的菌株数约为1.7×109个

D．还可用显微镜直接计数法，其计数结果往往比实际值偏大

3 . 尿路感染(简称UTI)是成人中最常见的疾病，可由多种细菌和真菌引起，因此需要分离和筛选这些微生物，回答下列问题
(1)如果对引起UTI的微生物进行分离计数，接种时，应采用的方法是___________，请简要写出实验思路___________。
(2)科研人员在5个培养基平板上分别接种稀释倍数为10⁵的尿液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191，则每毫升尿液样液中的微生物数量约为___________个。用此方法测定的微生物数量比实际活菌数量少，原因是___________。
(3)由于在一定的培养条件下，每一大类微生物都有其独特的细胞形态，研究人员通常根据菌落的___________等特征来初步区分这些微生物，由于真菌的形态不同于细菌，因此分离纯化真菌的倍数要___________。
(4)如果制备的培养基用于真菌的筛选，则培养基中应加入青霉素以抑制___________的生长，加入了青霉素的培养基属于___________培养基。

4 . 扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一，其次级代谢产物棒曲霉素（Pat）是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，研究人员进行了如图所示的实验，其中“病健交界处”为腐烂部位与未腐烂部位的交界处，取样分离的5个部位分别为①号、②号、③号、④号、⑤号。请回答下列问题：
   
(1)扩展青霉菌种使用的培养基成分如下表，根据物理性质划分该培养基属于_________培养基，其中NaNO₃的作用有_________。接种至苹果之前用该培养基培养的目的是_____。

蔗糖	NaNO3	MgSO4	KCl	FeSO4	KH2PO4
30g	2g	0．5g	0．5g	0．01g	1g

(2)接种前，应对苹果进行_______（填“消毒”或“灭菌”）。用平板划线法分离扩展青霉时，划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，其他区域的划线上却均无菌落。操作失误的原因可能是_______。
(3)研究人员测定了病斑直径为1、2、3cm的苹果中①~⑤号部位的Pat含量，结果如下图：
   
由图中病斑直径大小____（“能”或“不能”）得出病斑直径越大，测定的相同部位pat含量越高，理由是____。去除腐烂部位后的苹果是否可以食用？请作出判断并结合图中信息分析原因______。

5 . 某污水处理厂欲处理一批含As^3＋和硝酸盐浓度较高的污水，研究人员通过对肠道微生物的分离与筛选，得到了耐砷的反硝化细菌，它在厌氧条件下能够将硝酸盐还原为N₂O和N₂。分离耐砷的反硝化细菌具体步骤如下：
采集健康人体的新鲜粪便样本。
(1)配制培养基以筛选_______：该培养基中含有适宜浓度的________，从而有利于该菌的生长，抑制其他微生物的生长。此种培养基属于________培养基。
接种：取采集的人体新鲜粪便样品0.3 g，接种至该培养基上。
(2)耐砷反硝化细菌的分离与纯化：取200～300μL上述培养液，均匀地涂布在已经添加了5 mmol/L As^3＋和10 mmol/L NO₃^-的细菌固体培养基上。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________；涂布完成后，将平板置于温度为________的恒温培养箱中培养24 h。挑取长势比较良好、形态大小不同的菌落利用平板划线法进行分离纯化，用该种方法进行接种时，接种工具是________，该接种工具的灭菌方法是________。操作时，在第二次及其以后的划线时，总是从上一次划线的________开始划线，目的是_______。
对分离纯化后的菌株进行鉴定。
(3)测定菌株在不同砷浓度下的生长、繁殖能力：挑取单菌落加入到液体培养基中进行培养，吸取1 mL菌液离心收集菌体后，分别接种到含有0 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L As^3＋和10 mmol/L NO₃^-的液体培养基中，测定其OD值(OD值越大，表明菌体数量越多)，并绘制曲线如下图。结合曲线可以得出结论：_______。

6 . 为探究不同配方的洗手液对金黄色葡萄球菌的抑菌效果，某实验小组将金黄色葡萄球菌接种到蛋白胨培养基上，接着用滤纸片蘸取不同配方的洗手液放置在该平板上。培养一段时间后，结果如下图1；科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选农田土壤能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如图2所示实验流程；为纯化菌种，在鉴别培养基上接种尿素分解细菌，培养结果如图3所示。关于微生物培养和应用的相关表述，下列说法错误的是(      )

（1）蛋白胨可为金黄色葡萄球菌提供碳源、氮源、维生素
（2）蛋白胨培养基为金黄色葡萄球菌的选择性培养基
（3）本实验中接种金黄色葡萄球菌的方法为稀释涂布平板法
（4）甲配的洗手液对金黄色葡萄球菌抑菌效果好
（5）图2驯化培养基A中加入的物质X是敌敌畏，其诱导微生物产生高耐受或能降解敌敌畏的变异，以达到驯化目的
（6）图2驯化后的微生物常利用接种环挑取菌液在培养基B上连续划线分离获得单菌落，划线接种过程中需对接种环进行5次灼烧
（7）可以通过检测以敌敌畏为唯一碳源的图2培养基C中敌敌畏的剩余量，筛选出分解敌敌畏能力较强的微生物再进行纯培养
（8）用稀释涂布平板法来统计菌落数，能测得图2培养基C中活菌数的原因是平板上的一个菌落就是由一个活菌繁殖形成
（9）平板涂布时需在酒精灯火焰旁，打开皿盖放在一边，用灭菌后的涂布器进行涂布
（10）空白平板使用前需进行无菌鉴定，接种后未长出菌落的平板可以直接丢弃
（11）采用稀释涂布平板计数时，统计结果往往多于原始菌液中微生物数量
（12）利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
（13）土壤中的细菌，绝大多数分布在距离地表约3～8cm的土壤中，取样时一般铲去表层土
（14）测定土壤中细菌的数量，一般选用10²、10³、10⁴倍数的稀释液进行平板培养
（15）取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌
（16）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作
（17）微生物在液体培养基中生长时，可形成肉眼可见的菌落
（18）各种微生物培养基都含有的营养物质包括水、糖类、脂肪、蛋白质和无机盐
（19）培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素
（20）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤依次是计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
（21）湿热灭菌后的培养基需冷却至室温再倒平板，避免高温杀死菌种
（22）筛选可分解尿素的菌种时，培养基中还需加入适量的碳源
（23）实验室分离纯化菌种一般使用液体培养基或半固体培养基
（24）图3采用的接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法
（25）培养基中的尿素被分解后，可使酚红指示剂变为红色
（26）图3实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的
（27）可用干热灭菌法对盛有培养基的培养皿和试管等进行灭菌

7 . 牛、羊等反刍动物具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解纤维素。某科研团队按照如图所示的流程分离瘤胃中的纤维素分解菌，实验中需要甲、乙两种培养基，过程中涉及图1和图2；图3是筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤及相关图解。实验步骤：①把大量对链霉素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表面，进行培养。②待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基二上，随即在影印到含链霉素的培养基3上，进行培养。③在培养基3上，出现了个别抗链霉素的菌落，将其挑选出，以此类推。

(1)图1从①开始分离筛选纤维素分解菌，甲培养基中除含有水、无机盐、氮源外还应有____成分，该培养基按功能来分应为____培养基。
(2)图1过程②过程所使用的接种方法是____。科研人员先用0.85%NaCI溶液进行系列稀释而不用无菌水，原因是____。在培养基表面均加入一层无菌的石蜡，其作用是____。
(3)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见图），图中降解圈大小与纤维素酶的____有关，图中降解纤维素能力最强的菌株是____（填图中序号）

(4)图2在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁴的胃部样液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为189、25、417、175和179。则每毫升样品中含有细菌数量为____个。
(5)菌落是指____，从生态学角度分析，菌落实质上属于_______。
(6)配制培养大肠杆菌的培养基，一般都含有______物质。
(7)从功能上看，图3中含有链霉素的培养基3、7、11属于______。由上图3可知，原始菌种接种到培养基1、5、9的方法是_____。
(8)图3中对2和3进行比较，在2上找到与3上相应的菌落，挑取其中一个菌落接种到_____（含链霉素/不含链霉素）的培养基上， 如果有较多的菌落出现，则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之_____ （ 前/后）。
(9)实验中所用到的培养皿、接种环、培养基等均需进行灭菌处理，其中可用灼烧灭菌法进行灭菌的是_________，必须用湿热灭菌法进行灭菌的是____________，它不使用干热灭菌的原因是_____________ 、_____________。
(10)接种前，为了检测培养基平板灭菌是否合格，可以采用的方法是____________。

9 . 塑料制品方便人们生活的同时，也造成了短时期难以降解的“白色污染”。塑料制品的主要成分为聚氯乙烯（PVC）、聚乙烯（PE）和聚丙烯（PP）等，研究人员欲比较大肠杆菌 YT1和芽孢杆菌 YP1 两类细菌降解 PE [化学式为(C2H4)n]的能力。
(1)配置培养基，接种菌株后表层覆盖 PE 塑料。分组实验结果如表所示：

培养基及接种菌株	培养基 1	培养基 2
	单独培养并接种 YT1	单独培养并接种YP1
降解圈（直径 D/mm）	3．5	1．8

①培养这两种菌株时用到的是_______________（填“液体”或“固体”）培养基，PE 的作用是给微生物提供_______________，除此之外培养基中还需要添加的主要营养物质有_______________。
②从表中数据可知，降解 PE 能力较强的菌株是_______________；培养基 1 中形成两个降解圈大小一样的菌落 a、b（如下图），菌株 a 和菌株 b 降解 PE 的能力是否一样？_______________，理由是 _______________
   
(2)将筛选到的菌株用于治理“白色污染”时，有可能造成其它的环境污染问题，原因可能是_______________。（答出一点即可）

10 . 阅读下列材料，回答以下小题。
某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先从土壤中筛选出纤维素分解菌，并接种在已粉碎的作物秸秆堆中培养一段时间，再用清水淋洗秸秆堆，在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵。部分实验流程如图所示。
   
1．关于从土壤中筛选纤维素分解菌的实验，下列叙述错误的是（　　）

A．可选择在木材厂周围采集土样

B．需配制以纤维素为唯一碳源的选择培养基

C．对培养基进行高压蒸汽灭菌前应排尽锅内冷空气

D．采用涂布法将目标菌种接种到斜面培养基中保存

2．关于酵母菌的乙醇发酵的实验，下列叙述正确的是（　　）

A．该淋洗液可作为培养酵母菌的天然培养基

B．乙醇发酵过程中需始终拧紧瓶盖以防止杂菌污染

C．乙醇发酵过程中丙酮酸被【H】直接还原为乙醇

D．发酵液中的乙醇可用溴麝香草酚蓝溶液检测