【推荐1】下表为培养某种微生物的培养基配方，请回答有关问题：

（1）该培养基只允许分解尿素的细菌生长，这种培养基称为________培养基。该培养基会 抑制其他种类微生物生长，其原因是该培养基______。
（2）若要通过统计培养基中菌落数来估计样品中的细菌数，上述培养基中还需要添加的成 分是_____，接种时应采用______法，该方法接种培养基后的菌落，不可能是下图中的_______。

（3）从土壤中分离出分解尿素的细菌后，要对其作进一步的鉴定，可在上述培养基中加入_______指示剂，培养该菌后，如果指示剂变_____，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

【推荐2】某工厂的工业废水中含有大量酚类化合物W，若直接排放会造成环境污染。为了响应国家对环境保护的号召，该厂欲将化合物W分解成无害的物质后再进行排放。现某实验小组欲从土壤中分离能分解W的微生物。相关实验及结果如下：
Ⅰ号培养基：牛肉膏蛋白胨培养基→平均菌落数156个
Ⅱ号培养基：牛肉膏蛋白胨培养基+W（10g/L）→平均菌落数95个
Ⅲ号培养基：硝酸钾（3g/L），氯化钙（8g/L），W（10g/L），水，其他无机盐（适量）→平均菌落数34个。
（1）为了对微生物进行计数，Ⅲ号培养基还需要添加____________。在制备培养基倒平板之前还需对培养基进行____________。
（2）若要选出能分解W的微生物，可从____________号培养基中挑选，其原因是____________。
（3）该实验所使用的的接种方法是____________；分析Ⅱ号培养基所得菌落数少于Ⅰ号培养基的原因是____________。

【推荐3】经人工诱变后，部分细菌由于某种酶被破坏，其细胞中某些化学反应不能正常进行，就形成了营养缺陷型菌株，这在工业生产上有较广阔的应用前景。以下是实验人员利用人工诱变获得的某种氨基酸缺陷型菌株C和D，请回答下列问题：

接种的菌种	一般培养基	实验处理和结果
C	不生长	添加氨基酸甲，能生长
D	不生长	添加氨基酸乙，能生长
C+D	能生长	不添加氨基酸甲、乙，都能生长

(1)防止杂菌污染是培养微生物最关键的因素，微生物培养常见的灭菌方法有____。
(2)突变株C不能在一般培养基上生长的根本原因最可能是_______，将突变株C和D混合在一起，接种于一般培养基上，都能生长的最可能的原因是_______。
(3)现利用稀释涂布平板法测定菌株D的数量,在同一稀释倍数下4个平板上均接种0.1 mL样品溶液，菌落数分别为156、178、486、191，通过计算得知原样品溶液中每毫升含有目的菌1.75×10⁸个，则稀释倍数是______________。
(4)实验人员在研究培养过程中意外得到一未知菌株，研究发现未知菌株能分解尿素，是因为该菌株能合成________。利用以尿素为唯一氮源的______（填“选择”、“鉴别”）培养基，可以分离出该菌株。

【推荐3】赖氨酸是人体细胞不能合成的必需氨基酸。科学家把某种必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因（R）导入玉米中，使玉米中赖氨酸的含量提高30%。回答下列问题。

   

(1)利用PCR技术扩增R基因时，需要在一定的缓冲液中才能进行，其中需要加入__________酶和激活该酶所需的 __________。为了特异性扩增R基因序列，需根据 ____________________设计特异性引物。
(2)在构建基因表达载体时，若为了避免R基因和质粒的自连或反向连接，提高重组效率，应该选择的限制酶是 _______________。
(3)随着转化方法的突破，农杆菌侵染玉米这种单子叶植物也取得了成功。科研人员从新鲜的玉米叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养，当农杆菌侵染玉米细胞后，能将 _________上的T﹣DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到 ________________。
(4)检测R基因是否表达的方法是 ___________。
(5)在基因工程中若要培养转基因小鼠，将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是 __________，常用的受体细胞是 ________。

【推荐1】 21世纪经济报道记者发现，贺建奎的实验室账号“TheHeLab”于11月26日更新了多个视频，由贺建奎本人出镜讲述两个婴儿露露和娜娜的情况，并就为何选择HIV、伦理问题等作出解释。有关“中国基因编辑婴儿”新闻占据了各大网络媒介，一场“科学发展”与“伦理道德沦丧”争辩响彻全国。请根据你所学的知识，分析以下问题：
(1)人们担心这种行为会打开“潘多拉魔盒”，驱使另一些科研者开展人类基因编辑研究，出现“基因完美的定制人”。在这些研究中，外源基因能与受体细胞DNA成功重组的原因是_____，这些基因拼接成功后能正常表达的理论基础是_____。
(2)转基因技术并不是令人闻之色变的疯狂技术，它已在作物品种改良上取得一定的成绩。比如，为了获得“多彩的牵牛花”，可将_____（目的基因名称）与质粒形成重组质粒，导入到普通牵牛花细胞中，再通过_____技术培养得到符合要求的植株。
(3)关于基因工程，以下说法正确的是_____。

A．所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

B．质粒是基因工程中唯一的载体

C．载体必须具备的条件之一是：具有一至多个限制酶切点，以便与外源基因连接

D．基因控制的性状都能在后代表现出来

【推荐2】为扩大可耕地面积，增加粮食产量，沿海滩涂盐碱地的开发利用备受关注。科学家应用耐盐碱基因培育出了耐盐碱水稻新品系，为解决我国粮食问题做出了重要贡献。若测得某耐盐基因（RST1）编码链首端到末端（其中一条链）的序列为5'-ATCTACGCGCTCATCCG ...(省略3n个核苷酸序列）…CGCAGCAATGAGTAGCG-3'。下图1为构建重组质粒的过程示意图， BamHⅠ、BclⅠ、SmaⅠ、Sau3AⅠ为限制酶(四种酶的识别序列详见表)。请回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	BclⅠ	SmaⅠ	Sau3AⅠ
识别序列及切割位点（5′→3′）	G↓GATCC	T↓GATCA	CCC↓GGG	↓GATC

   
(1)为获取更多RST1基因，可通过PCR扩增，在反应体系中加入引物的作用是_____。某同学设计了如下六种PCR引物，其中可选用的引物是_____(选填序号)。
① 5'-GACTACTCGCGCATCTA-3'   ② 5'-ATCTACGCGCTCATCCG-3'③ 5'-GCGATGAGTAACGACGC-3'   ④ 5'-CGCTACTCATTGCTGCG-3'⑤ 5'-TAGATGCGCGAGTAGGC-3' ⑥ 5'-CGCAGCAATGAGTAGCG-3'
(2)若PCR反应未得到任何扩增产物，主要原因有_____（选填序号）。
①退火温度过高             ②Taq酶失活               ③设计的引物过短       ④变性温度过低             ⑤模板受到污染            ⑥Mg^2＋浓度过低
(3)为将图中质粒A和RST1基因正确连接构建重组质粒B，设计RST1基因的引物时，在两种引物的5'端分别添加_____酶的识别序列，选用_____酶切割质粒A，酶切后的载体和目的基因片段通过_____酶作用后获得重组质粒。为了筛选出转入了重组质粒的受体细胞，应首先在筛选平板培养基添加_____，再将平板上长出的菌落通过影印接种法（盖章）接种到添加_____的平板培养基上继续培养观察。
(4)从平板上长出的菌落若提取重组质粒B利用Sau3AI进行酶切，最多可以得到_____种大小不同的DNA片段。
(5)图2是对重组质粒测序的部分序列，若目的基因与质粒正确连接（启动子顺时针转录），则图中连接处的序列正确的是（       ）_____（填序列编号）。

【推荐3】下图为从某种鱼类中提取抗冻基因，培育转基因抗冻甘蔗的过程示意图。据图回答下列问题：

(1)通过过程①可以构建该种鱼的一个_____文库。过程②要用相同的限制酶切割目的基因和质粒以产生相同的_____，通常选择不同的限制酶处理目的基因两端，原因是_____。
(2)过程②构建的重组质粒中的_____片段可转移至甘蔗组织细胞的_____上，并随着甘蔗细胞的增殖过程而传递到子代细胞中。
(3)过程③④属于细胞工程中的_____技术，其原理是_____。
(4)与传统杂交育种相比，通过转基因技术培育新品种的优点是_____。

【推荐1】水稻不育系的选育是杂交水稻育种工作中的关键环节。为了获得某水稻品种的不育系， 研究人员对该水稻品种的TMS5基因进行编辑，基因编辑过程如图。

回答下列问题。
（1） Cas9蛋白与TMS5基因结合后，使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的________断开。断裂后的DNA分子会自动进行修复，修复过程中在b图所示位点插入碱基A之后两个片段在________酶作用下得到编辑成功的TMS5基因。
（2）编辑成功的TMS5基因可采用PCR技术扩增，前提是要根据一段________合成引 物。该基因的上游连接启动子，可作为________识别和结合的部位，再组装到相应的载体上，该载体的结构还应包括________。
（3）构建的基因表达载体通过农杆菌侵染水稻愈伤组织，并整合到水稻细胞的________上， 愈伤组织经过________形成水稻幼苗。
（4）基因编辑中插入碱基A，会导致翻译提前终止，使TMS5基因表达的蛋白质不能产生， 最终导致水稻花粉不育。用抗原—抗体杂交技术检测TMS5基因编辑是否成功，若 ________（填“出现”或“未出现”）杂交带，则表明基因编辑成功。

【推荐2】人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值，只能从血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。

（1）为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取________合成总cDNA，这种方法合成的基因与人体细胞内的基因相比,一般没有________、启动子、终止子等结构。
（2）将该HSA基因导入动物受精卵常用的方法是__________。启动子是RNA聚合酶识别结合的部位，启动子的基本组成单位为__________。
（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质，其目的_______________。该方法一般____________(填“适宜”或“不适宜”)用于将目的基因导入单子叶植物。农杆菌中Ti质粒含有___________，称为可转移的DNA。
（4）检测目的基因是否转录，采用_______技术。此方法用_____________探针，进而进行检测。
（5）如果抗虫基因导入成功，且与一条染色体的DNA整合起来，该转基因抗虫棉可视为杂合子，将该转基因抗虫棉自交，预计后代中抗虫植株占______________。