1 . 三孢布拉氏霉为单细胞的霉菌，能产生β-胡萝卜素，可用于工业生产。回答下列问题:
（1）工业生产中发酵罐内的培养基属于______ （填“液体”或“固体”）培养基，有利于营养物质与三孢布拉氏霉充分接触，菌丝体生长迅速。培养三孢布拉氏霉时需将培养基pH调至____（填“酸性”“中性”或“碱性”）。在接入菌种前，应对培养基进行______灭菌，以避免杂菌污染。
（2）三孢布拉氏霉含有β-胡萝卜素合成的关键酶——八氢番茄红素合成酶（PSY），可根据________（答出一点即可）等特性的差异将PSY与其他蛋白质分离。再采用_________（答出两种方法）固定化PSY，应用于工业生产。
（3）提取到的胡萝卜素粗品，在实验室中通常需通过______法进行鉴定。若观察到____则说明β-胡萝卜素提取成功。

2 . 回答下列有关生物技术实践的问题：
（1）豆腐为毛霉的生长提供的基本营养物质有碳源、______。毛霉产生的酶能将酪蛋白分解而产生透明圈，将三种纯化的毛霉菌种接种在酪蛋白培养基中得到三种单菌落甲、乙、丙，其菌落直径平均值分别为 3.2cm、2.8cm、2.9cm，菌落与透明圈一起的直径平均值分别为 3.7cm、3.5cm、3.3cm。应选择菌落______（填“甲”、“乙”或“丙”）作为产蛋白酶活力高的毛霉候选菌。装瓶腌制腐乳时，在接近瓶口的表面要将盐铺厚一点，原因是______________________________________。
（2）某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方为：蛋白胨10克、葡萄糖5克、蔗糖5克、KH₂PO₄2克、显色剂（伊红美蓝）0.2g、琼脂12克，将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到l000mL。根据用途划分，该培养基属于______培养基，若要分离能分解尿 素的细菌，需对培养基作出的两项调整是______________。
（3）对同一浓度的脲酶生产菌稀释液，分别用血细胞计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量________（填“多于“、“等于”或“小于”）后者，其原因____________________________________________________________。
（4）某科研工作者用特殊的化学物质将脲酶包裹，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用。请说明这是否运用了酶的固定化技术及其理由：___________。

3 . 从土壤中分离出的纤维素分解菌能将植物秸秆中的纤维素降解为葡萄糖，酵母菌能利用葡萄糖发酵生产酒精燃料，用于生产生活，将酵母菌固定化后，使其可以重复，提高其利用率。
（1）要从土壤中分离出纤维素分解菌，关键的实验思路是__________。理由是__________。
（2）对分离得到的菌种作进一步的鉴定时，可在固体培养基中先加入刚果红，再加入分离得到的菌种，若菌落周围出现____，可以初步鉴定该种菌为纤维素分解菌，其原理是_______。
（3）固定化酵母时先要将酵母细胞活化，活化是指__________。固定化酵母细胞最好的方法是__________，而不是化学结合法和物理吸附法，理由是__________。

4 . 为了增强洗衣粉对血渍、奶渍、油污、土豆泥等衣物上常见污垢的去除能力，洗衣粉中常常会添加各种酶类。请回答下列问题：
（1）根据衣物上常见的污垢的种类，目前常用的加酶洗衣粉中添加的酶制剂有四类，其中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和______________，前者能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成______________________________，使污迹容易从衣物上脱落。加酶洗衣粉是否应用了固定化酶技术：__________（填“是”或“否”）。
（2）某科研小组将M酶加入洗衣粉后欲探究该酶的去污能力，设计并进行了相关实验，结果如图所示。
 
①该实验的自变量有______________________________。该同学在使用加M酶洗衣粉时，发现用温水洗涤效果更好，如果直接用冷水洗涤，效果并不好，分析其中的原因是________________________________________。
②加M酶以后，对比污布类型2、3的实验处理，可以得出的实验结论是_______________。欲在原实验的基础上进一步探究加大酶用量能否显著提高洗衣粉的去污力。请简要写出实验思路：_________________________________________________________________。

5 . 为了研究温度对固定化果胶酶活性的影响，某科研小组在制作苹果汁时进行了一系列实验，实验结果如图所示。下列推断正确的是

A．固定化果胶酶的最适温度一定是55℃

B．在60℃时固定化果胶酶已经完全失活

C．固定化果胶酶可以在40℃时长期保存

D．实验结果表明温度不会直接影响出汁率

6 . 果胶酶能分解果胶等物质，澄清果蔬饮料，在食品加工业中有着广泛的应用。某兴趣小组的同学对三种不同品牌的果胶酶制剂（制剂中果胶酶浓度相同）进行了探究，其实验设计及实验结果如下表所示。

分组	蒸馏水 （mL）	缓冲液 （mL）	果汁 （mL）	果胶酶制剂（mL）			果汁浑 浊程度
				甲	乙	丙
1	2	2	5	2	0	0	＋
2	2	2	5	0	2	0	＋＋＋
3	2	2	5	0	0	2	＋＋
4	X	2	5	0	0	0	Y
注：“+”越多表示果汁越浑浊。

（1）表中X所代表的数值应为___________，Y的果汁浑浊程度应表示为_____________（用若干个“+”表示）。
（2）除了观察果汁浑浊程度外，还可以通过检测___________的变化量来判断不同品牌果胶酶制剂的效果。若使用该方法，相关物质变化量最大的是_____________组。
（3）微生物是生产果胶酶的优良生物资源。分离和筛选能产生果胶酶的微生物，使用的培养基应以_________为唯一碳源；如需进一步纯化果胶酶，可根据果胶酶分子的______________、____________（至少写出两点）等特性进行分离提纯。由于果胶酶的活性容易受到外界环境因素的干扰，所以应利用_______________技术减少影响从而保护酶的活性。

7 . 回答下列相关问题；
（1）酶是生物体中生化反应的催化剂，在工业生产和食品加工中的应用日益广泛。为提高酶的利用率以及提高产品的纯度，一般需要对酶进行固定化处理，即将酶用物理或化学方法固定在_________的介质上，具体方法有吸附法、共价偶联法、_____________法和____________法。
（2）如图为装有固定化酶a的实验装置。其中b是反应柱，c是催化底物。

①若装置中的固定化酶为-淀粉酶，则通常利用_____________法对其进行固定化，介质一般为石英砂。利用该装置进行淀粉水解实验时，在漏斗中加入反应液后的操作是___________，以保证反应充分。对流出的液体用_______________检测，若呈现___________色反应，说明淀粉被水解成糊精。
②若a是固定化酵母，要想得到较多的乙醇，加入反应液后的操作是______________，装置中的长导管所起的作用是_______________。

8 . 请回答下列关于固定化酶和细菌培养实验的问题：
（1）某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验，分组见表。

组别	固定化酶柱长度（cm）	淀粉溶液的流速（mL·min-1）
甲	10	0.3
乙	10	0.5
丙	15	0.3
丁	15	0.5

将吸附了-淀粉酶的石英砂装入柱中后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去_________________。按上表分组，将配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中，然后取一定量的流出液进行KI-I₂检测，若流出液呈红色，表明有________________生成；若各组呈现的颜色有显著差异，则流出液中淀粉水解产物浓度最高的是_____________组。
（2）下列关于上述固定化酶实验的叙述，错误的是_____________。
A.固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了酶柱中酶的含量
B.淀粉溶液流速过快会导致流出液中含有淀粉
C.各组实验所用的淀粉溶液浓度应相同
D.淀粉溶液的pH对实验结果有影响
（3）现有一份污水样品，某兴趣小组欲检测其中的细菌数，进行以下实验。将一定量的污水样品进行浓度梯度稀释。取适量不同稀释度的稀释液，用______________法分别接种于固体平面培养基上，经培养后进行计数。该实验应注意，接种前，从盛有_____________的容器中将玻璃刮刀取出，放在酒精灯火焰上灼烧，冷却后待用；分组时，需用_____________作为对照。
（4）在上述细菌培养实验中进行计数时，应计数的是接种了______________。
A.各个稀释度样品的培养基上的细菌数
B.合理稀释度样品的培养基上的细菌数
C.各个稀释度样品的培养基上的菌落数
D.合理稀释度样品的培养基上的菌落数

9 . 回答下列问题：
（1）酶活性是指酶催化一定化学反应的能力，酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化某一反应的___________来表示。与一般酶制剂相比，固定化酶的突出优点是既能与反应物___________，又能与产物___________，还能被反复利用。
（2）探索温度对淀粉酶活性的影响实验，需要进行如下步骤：
①取3支试管，各注入2ml淀粉溶液并分别编号A、B、C
②再取3支试管，各注入1m1淀粉酶溶液并分别编号a、b、c
③向3支试管各滴1滴碘液
④将A、a试管放在60℃的热水中，B、b放在沸水中，C、c放在冰水中，各维持温度5min
⑤分别将A与a、B与b、C与c混合后，再依次放在60℃的热水、沸水和冰水中维持温度5min
⑥观察实验现象
最合理的操作顺序是(        )
A．①②③④⑤⑥       B．①②④⑤③⑥
C．①④②③⑤⑥       D．①②⑤④③⑥
（3）酒精发酵过程相关的酶存在于酵母菌细胞的___________中。
（4）纤维素分解菌因能产纤维素酶而广泛存在，纤维素酶是一种复合酶，在三种酶的___________作用下，纤维素被分解成葡萄糖。在以纤维素为唯一碳源的培养基上培养一段时间后，培养基表面形成多个单菌落，但不同菌株分解能力有差异，为选出高效分解的菌株，请利用所学知识，写出具体思路：______________________。

10 . 下列关于酶技术应用的叙述，正确的是（     ）

A．用包埋法将果胶酶固定化后，其活性明显增强

B．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用

C．较长时间保持酶活性，各种酶制剂都应保存在低温的条件下

D．加酶洗衣粉中加入表面活性剂，其目的是促进酶的活性