1 . 生物钢的强度比钢的强度大4～5倍，但有蚕丝般的柔软和光泽，可用于制造高级防弹衣。科学家从蜘蛛中获取蜘蛛丝蛋白基因并将其植入山羊体内，让羊奶含有蜘蛛丝蛋白，再利用特殊的纺丝程序，将羊奶中的蜘蛛丝蛋白纺成丝。回答以下问题：
(1)将蜘蛛丝蛋白基因的mRNA逆转录，再进行PCR可获得蜘蛛丝蛋白基因，整个过程中所需要的酶是______，所需要的原料是______。
(2)通过PCR获得蜘蛛丝蛋白基因时需要引物，引物的作用是______。
(3)为获得多只能产含有蜘蛛丝蛋白的羊奶的转基因山羊，相关流程如图所示。

   
①A步骤中将蜘蛛丝蛋白基因的表达载体导入甲羊的受精卵中常用______法。
②一般情况下，C步骤中选择乙羊的供体细胞来进行核移植时，有胚胎细胞和体细胞的细胞核可供选择，前者进行核移植的难度明显______后者的，原因是______。
③G步骤中，可采用胚胎分割技术来提高早期胚胎的利用率，该过程中应选择发育良好、形态正常的______胚。

2 . 肌肉生长抑制素（MSTN）是一种骨骼肌生长发育的负调控因子，可抑制肌细胞的增殖，MSTN基因沉默则可增加的方面。科研人员通过构建MSTN基因的反义基因（其转录出的mRNA会与MSY。A因转录出的mRNA特异性结合）表达载体，将其是山羊胎儿纤维细胞，实现了人成纤维细胞中MSTN基因的沉默，再结合体细胞核移植技术，成功制备了转基因。回答下列问题：
(1)利用PCR技术扩增MSTN基因的反义基因前提是要有_____，以便合成引物。在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是_____。
(2)将MSTN基因的反义基因与质粒构建成目的基因表达载体时，所需要的两种酶是_____。
(3)将构建好的MSTN基因的反义基因表达载体导入山羊胎儿成纤维细胞，从中筛选反义基因成功表达的细胞。在成纤维细胞体外培养过程中会出现细胞贴壁和_____现象，导致成纤维细胞的增殖不能一直进行。将具有反义基因的成纤维细胞注入经去核处理后的卵母细胞中，通过电刺激使二者融合，形成重组胚胎，去核的目的是_____。
(4)用特定方法激活并促进重组胚胎细胞分裂和发育。在养殖过程中发现，公羊的肌肉量比母羊的更高，为获得更多公羊，需在胚胎发育早期进行相关操作，具体操作是_____。

3 . dMAb技术是一种通过DNA编码产生单克隆抗体的技术，比传统单克隆抗体制备方法更有发展潜力。此前发表的研究显示，以埃博拉病毒为目标且高度优化的基于DNA的单克隆抗体，单次给药在小鼠血液中产生了高水平的抗体表现。下图表示dMAb技术在埃博拉病毒感染疾病的临床研究中的操作流程。回答下列问题：

(1)根据抵御埃博拉病毒的抗体的结构获得目的基因，常用PCR技术快速扩增目的基因。在扩增过程中，需要的原料是__________，将温度控制在90℃以上的目的是__________。
(2)构建重组质粒时，一般用相同的限制酶切割目的基因和Ti质粒的脱氧核苷酸片段，目的是__________。重组质粒中含有启动子，其作用是___________。
(3)单克隆抗体与埃博拉病毒结合利用的原理是___________。利用动物细胞融合技术生产单克隆抗体时，经选择性培养基筛选出的杂交瘤细胞还需要进行抗体检测，其目的是___________。与传统利用杂交瘤细胞生产单克隆抗体的技术相比，dMAb技术的优势是__________（写出2点）。

5 . 研究人员将大麦细胞的LTP1基因导入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌可产生LTP1蛋白，并酿出泡沫丰富的啤酒。回答下列问题：

(1)已知DNA复制子链的延伸方向是5'→3'，图1中A、B、C、D在不同情况下可以作为引物，在PCR技术中，扩增LTP1基因，应该选用_____________作为引物。为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的_____________位点。设计引物时需要避免引物之间形成_____________，而造成引物自连。
(2)图2中的B为质粒，是一种独立于大肠杆菌拟核DNA之外的具有_____________能力的很小的_____________。图2中的C除了含标记基因之外，在LTP1基因的上游必须具有_____________。
(3)分别用含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选，则有图2中C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是_____________。
(4)可采用分子杂交技术检测LTP1基因是否转录，需要从转基因啤酒酵母中提取_____________，用_____________作探针与之杂交。

6 . 实验室常用PCR技术对DNA进行体外扩增，下列相关叙述正确的是（       ）

A．需要解旋酶和耐高温的DNA聚合酶

B．反应过程包括变性→复性→延伸

C．95℃时DNA的磷酸二酯键断开

D．引物与模板结合后，DNA聚合酶从引物的5'开始延伸DNA链

7 . PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，其基本原理和过程与细胞内DNA的复制类似。下列关于两者共同点的叙述，不正确的是             
①边解旋边复制②遵循碱基互补配对原则③需要引物④过程可分为变性、复性、延伸等步骤

A．①②

B．②③

C．③④

D．①④

8 . 多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中正确的是（ ）

A．变性过程中破坏的是DNA分子内磷酸二酯键

B．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸

C．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成

D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度相同