1 . 微生物吸附是重金属废水的处理方法之一。金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在于动植物中的金属结合蛋白，具有吸附重金属的作用。科研人员将枣树的MT基因导入大肠杆菌构建工程菌。请分析并回答下列问题。
   
(1)从枣树相关细胞中提取____，通过逆转录获得枣树的MTcDNA，然后根据枣树MTcDNA的核苷酸序列设计了相应的引物（图1甲），以通过PCR扩增MT基因。已知A位点和B位点分别是起始密码子和终止密码子对应的基因位置。选用的引物组合应为____，这些引物的长度一般包含15～23个碱基，过短会导致特异性差，过长则会导致____。若1个MTcDNA扩增n次，则总共消耗引物____个。
(2)本实验中，PCR所用的____酶扩增出的MT基因，其末端为平末端。由于载体E只有能产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P将MT基因接入载体E。载体P和载体E的酶切位点及相应的酶切序列如图1乙所示。
①选用____酶将载体P切开，再用____酶将MT基因与载体P相连，构成重组载体P'。
②选用____酶的组合对载体P'和载体E进行酶切，将切下的MT基因和载体E用酶连接，将得到的混合物导入到用____离子处理的大肠杆菌，然后筛出MT工程菌。
(3)MT基因在工程菌的表达量如图2所示，结果仍无法说明已经成功构建能较强吸附废水中重金属的MT工程菌，以下叙述中能支持该观点的是____。
   
①尚未对MT工程菌合成的MT蛋白的活性进行测定
②尚未对MT工程菌吸附重金属的能力进行鉴定
③尚未在个体生物学水平进行抗原-抗体杂交
大肠杆菌MT工程菌
④尚未对MT基因进行碱基序列的测定和比较

2 . RDX是一种弹药使用后残留的危险污染物。研究人员将两个源于细菌的RDX 降解酶基因 XplA 和 XplB 插入柳枝稷草染色体中，如图所示，使柳枝稷草获得降解实弹射击场土壤中RDX的能力。若要通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA 和 XplB 基因，应选择的引物组合是（　　）

   

A．引物 1+引物3

B．引物 1+引物4

C．引物2 +引物3

D．引物2+引物4

3 . DNA标记是DNA（或基因）中一些稳定的特征性碱基序列。选择相应的DNA标记进行PCR扩增，通过产物的电泳图谱可进行遗传病的基因定位。下图1为1号家庭甲、乙两种遗传病的相关基因（包含正常基因和致病基因）定位电泳图，图2为2号家庭甲、乙两种遗传病的家族遗传系谱图，已知甲乙两病中只有一种为显性遗传病。甲种遗传病的相关基因为A、a，乙种遗传病的相关基因为B、b，不考虑X、Y染色体同源区段上的基因。请回答下列问题：
   
(1)甲种遗传病的遗传方式是____，乙种遗传病的遗传方式是____。
(2)1号家庭和2号家庭中，儿子的基因型分别是____、____。
(3)若要判断1号家庭中父亲是否患有甲种遗传病，可选择____，对其甲种遗传病有关的DNA标记PCR扩增产物进行电泳，并将其电泳图与1号家庭父亲的电泳图进行比较。
(4)PCR技术除用于上述基因定位外，在基因工程中还可以用于____

4 . 某雌雄异株作物的性别决定方式为XY型，抗虫性状由两对独立遗传的等位基因A/a和B/b控制。现用纯合抗虫雌株和纯合不抗虫雄株交配产生F₁，F₁相互交配，F₂表型及比例为抗虫植株：不抗虫植株=15:1。回答下列问题：
(1)欲完成上述杂交实验需要对母本进行的操作是_____________。
(2)进一步统计的结果，若出现_____________，则可判断有一对基因位于X染色体。
(3)科学家从杂草中偶然获得一抗病基因E，运用基因工程技术将该基因导入与上述亲本作物基因型相同植株的染色体DNA上后，获得抗病植株甲、抗病植株乙。科学家利用荧光定量PCR技术，对F₁植株、雄株甲、雌株乙的等量体细胞进行检测，结果如图所示：
   
实验中检测中基因A的目的是_____________。为确定基因E导入的位置，科研人员将雄株甲与雌株乙杂交，统计子代植株表型及比例为抗病雄株：抗病雌株：不抗病雌株=2:1:1。请用“•”在下图中画出雄株甲与雌株乙中的组成体细胞中抗病基因E在染色体上的分布示意图_____________（注：画出抗病基因E的位置即可）。
   

5 . 重组PCR技术是一项新的PCR技术，通过重组PCR技术能将两个不同的DNA连接成为一个新DNA分子。某科研小组从猪源大肠杆菌中扩增得到LTB和ST1两个基因片段，利用重组PCR技术构建了LTB—ST1融合基因，制备过程如下图所示。回答下列问题：

(1)利用PCR技术扩增目的基因的过程中，向反应体系中加入的物质除了引物和模板链﹐还需要加入________。
(2)从P2，P3两种引物的角度分析，LTB和ST1基因能够融合的关键是______。PCR1和PCR2不能在同一个反应体系中进行，原因是_______。②过程不需要加入引物，原因是________。
(3)科研小组为了检测是否成功构建出融合基因，将反应后体系中的各种DNA分子进行电泳，结果如图所示。则融合基因最可能是________，判断依据是________。

7 . 脱氧核苷三磷酸（dNTP）和双脱氧核苷三磷酸（ddNTP，ddN-P_α～P_β～P_γ）的结构均与核苷三磷酸（NTP）类似，仅是所含五碳糖的羟基（-OH）数目不同。在DNA复制时，ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，从而终止DNA片段延伸。现有一些序列为5＇-GACTATGATCGTA-3＇的DNA分子单链片段，将其作为模板与引物、底物、Taq DNA聚合酶、Mg^2﹢及缓冲溶液加入反应管中，底物中仅有一种被³²P标记。通过PCR获得被³²P标记且3＇端为碱基A的不同长度子链DNA．下列叙述错误的是（       ）

A．dNTP做PCR的原料时也可为DNA复制提供能量

B．反应底物是dCTP、dGTP、dTTP和α位32P标记的ddATP

C．ddNTP与dNTP竞争的延长位点是脱氧核苷酸链的3＇末端

D．实验结束后最多可得到4种被32P标记的子链DNA

8 . 利用PCR技术扩增目的基因的过程中两种引物分别为A和B，其原理与细胞内DNA复制类似。下列叙述错误的是（　　）

A．从理论上推测，第二轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/4

B．在第二轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段

C．引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因

D．耐热的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3’端

9 . 为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。

为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（       ）

A．①+③

B．①+②

C．③+②

D．③+④