1 . 研究人员将PCR扩增得到的毒物诱导型启动子S（箭头表示转录方向）插入图中载体P区，构建表达载体，转入大肠杆菌，获得能够检测水中毒物的大肠杆菌。

下列叙述不正确的是（       ）

A．引物I、Ⅱ中应分别含有BamHI、XhoI的识别序列

B．质粒载体上除具有图中所示的元件外还应有复制原点

C．用含氨苄青霉素的培养基对转入操作后的菌株进行筛选

D．可通过转基因大肠杆菌的荧光情况判断水中毒物情况

2 . 新疆野生油菜（P₁）具有低芥酸、抗病虫等特性，为了改良甘蓝型油菜（P₂），研究人员将两种植物的体细胞进行融合获得了属间杂种F₁，然后加入1对引物进行PCR鉴定，结果如图所示。下列叙述不正确的是（　　）

A．用纤维素酶和果胶酶处理亲本的体细胞

B．用离心法可促进两个亲本的原生质体融合

C．引物能与DNA上多个不同位点结合

D．电泳结果表明F1-1具有P1、P2的全部遗传信息

3 . 下列与高中生物学实验相关的叙述中，不合理的是（       ）

A．接种环和涂布器在使用前后均需要进行灼烧灭菌

B．DNA粗提取时使用酒精溶解DNA使之与蛋白质分离

C．通过调整培养基中植物激素的比例诱导愈伤组织分化

D．通过改变反应体系的温度来控制PCR反应的进程

4 . 学习以下材料，回答问题。改造基因编辑系统：为提高基因编辑的精准性，减少脱靶，科研人员尝试对基因编辑系统进行改造。CRISPR-Cas9是被普遍应用的基因编辑系统，由人工设计的sgRNA靶向目标基因，Cas9蛋白在sgRNA引导下切割目标基因的双链DNA，使其断裂，促使细胞启动自然的DNA修复过程，但断口处可能产生碱基错配，从而使目标基因产生突变或缺失等。Cas9蛋白与sgRNA所形成的复合物的功能与基因操作工具中___A___的功能类似，但长期存在于细胞核中的Cas9蛋白也可能产生对非目标DNA的切割，从而造成脱靶。热纤梭菌中Co和Do蛋白能以高亲和力相互作用，形成复合物。科研人员将Cas9蛋白的N端和C端两个片段分别与Co和Do蛋白融合，构建Cas9（N）-Co复合物和Cas9（C）-Do复合物，这两个复合物在细胞中相遇时，Cas9恢复全酶活性（即此时才能正常发挥作用）。科研人员构建图1所示的表达载体，导入受体细胞。

为检测上述基因编辑系统治疗肿瘤的效果，科研人员在小鼠皮下移植肿瘤制作荷瘤小鼠。将构建好的上述载体注射到荷瘤小鼠的肿瘤部位，实验组一段时间内定期用远红光照射荷瘤小鼠。检测本系统对目标基因PLK（一种肿瘤标志基因，可促进细胞分裂）的编辑效果。实验过程如下：提取不同组别小鼠肿瘤细胞的DNA，PCR扩增PLK基因片段，为增加错配碱基数量，所得PCR产物热变性后降温复性。用T酶（可识别含错配碱基的DNA并在错配处切割）酶切复性后的PCR产物，电泳检测结果如图2所示。

(1)文中“A”是指_______。
(2)已知图1中启动子1为远红光诱导型启动子，启动子2为持续表达启动子。据此分析，在没有远红光照射时，受体细胞中_____（填“有”或“无”）Cas9（N）。Cas9（C）存在于_____。
(3)与持续表达Cas9全酶相比，上述方法的优势是仅在______诱导时才有全酶进入细胞核，减少Cas9全酶长时间在细胞核中对非目标DNA的切割。
(4)据图2核酸电泳分离的DNA分子大小可知：与黑暗组相比，远红光组增加了两条更小的条带，说明PCR产物被______。即PLK基因产生了突变，预测实验组小鼠的肿瘤明显______对照组。由此可见此系统对目标基因进行了编辑。

5 . PCR引物的5'端无严格限制，可用于添加限制酶切位点等序列，对该PCR过程理解正确的是（       ）

A．图示环节所需的温度比上一个环节的高

B．设计引物时需已知DNA模板的全部碱基序列

C．Taq DNA聚合酶只能从引物的3'端延伸DNA链

D．延伸出的子链与DNA模板的碱基序列完全相同

6 . 获得抗除草剂转基因玉米的技术流程如下图。相关操作叙述正确的是（       ）

A．在培养基中添加T-DNA片段侵染农杆菌

B．用含四环素的培养基筛选转化成功的农杆菌

C．用氯化钙处理愈伤组织使其易于吸收DNA

D．用PCR技术检测除草剂抗性基因是否翻译

7 . 现代智人起源于非洲的观点，得到更多证据的支持。人们认为，约100万年前，非洲的古人类（人属各成员）第一次走出非洲，在各地发展出自己的种群，例如1856年在德国尼安德特河谷发现的尼安德特人。约10万年前，人类（现代智人种）第二次走出非洲，与第一次走出非洲的人类发生有限的基因交流。之后由于目前尚在争议的原因，第一次走出非洲的人类包括尼安德特人陆续灭绝，而我们的祖先生存下来并逐渐扩散占据了全世界。2009年瑞典科学家斯万特·帕博团队完成尼安德特人细胞核DNA的全基因组测序工作，发现生活在非洲之外的现代人体内都有1%-4%的尼安德特人基因，现代人的线粒体和Y染色体基因中则没有发现尼安德特人基因。帕博因在已灭绝古人类基因组和人类进化研究方面所做出的贡献，获得2022年诺贝尔生理学医学奖。下列有关叙述错误的是（       ）

A．帕博的研究说明尼安德特人和智人发生了杂交

B．非洲人不具有上述1%-4%的尼安德特人基因

C．现代人线粒体和Y染色体无尼安德特人基因的原因可能是在人类进化过程中，与尼安德特人发生杂交的祖先是现代人男性与尼安德特人女性

D．帕博的研究依赖于PCR、DNA测序以及防止除古人类化石DNA以外的外源DNA污染等技术

8 . 科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制性内切核酸酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制性内切核酸酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切核酸酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—，据图回答：

(1)过程①可获取大量的目的基因，该过程所需要的酶是____，需要的四种原料之一为____。
(2)在构建基因表达载体过程中，最好应用限制性内切核酸酶____切割质粒，用限制性内切核酸酶____切割目的基因。画出用所选限制酶切割目的基因形成的黏性末端：____。人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是____如果用限制性内切核酸酶Ⅱ切割重组质粒将最多形成____个大小不同的DNA片段，这些DNA片段可用____分离。
(3)在过程③一般将受体大肠杆菌用CaCl₂处理，其原理是____。
(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上得到如下图a的结果（黑点表示菌落），能够生长的细菌中已导入了____反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含____的培养基上培养，得到如图b的结果（空圈表示与a对照无菌落的位置）。与图b空圈相对应的图a中的菌落表现型是____，这些细菌中导入了重组质粒。

(5)绘制目的基因在细菌中表达的过程示意图：____。
(6)将人生长激素基因导入大肠杆菌与导入酵母菌相比，两者中生产的生长激素在结构上最可能的不同是空间结构，主要原因是大肠杆菌无____。

9 . 图为获得抗除草剂转基因玉米A的技术路线，相关叙述错误的是（　　）

A．采用PCR扩增目的基因时，设计的引物间要避免形成氢键

B．为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种不同的限制酶

C．检测是否转化成功，需要依次利用报告基因和抗生素抗性基因

D．利用T-DNA可以将目的基因插入到玉米的染色体DNA上