1 . 下图是利用基因工程技术培育新品种水稻的部分流程，序号代表操作过程。下列相关叙述正确的是（       ）

   

A．利用PCR技术扩增目的基因需依次经过变性、延伸、复性阶段

B．为防止目的基因自身环化，过程①最好使用两种限制酶

C．过程③的目的是构建基因表达载体，需用DNA连接酶处理

D．重组Ti质粒上的T-DNA能将目的基因整合到宿主细胞染色体上

2 . 光敏色素基因在调节作物生长发育中具有重要作用。为探讨玉米中光敏色素基因A（含大约256个碱基对）在棉花种质资源创制中的利用价值，研究人员将A基因转入到棉花中，利用对棉花受体细胞进行检测，并通过电泳技术分析结果。该过程所用质粒与含光敏色素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图甲、乙所示，电泳检测结果如图丙。下列相关叙述错误的是（       ）

A．操作过程中需要用到的工具有限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体

B．构建表达载体时应选用BamHI和HindⅢ这两种限制酶

C．PCR反应过程中每次循环都要经历目的各不相同的两次升温和一次降温

D．由图丙电泳结果可知，1、2、3、4号转基因棉花均培育成功

3 . 实时荧光RT—PCR可用于RNA病毒的核酸检测，其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合，探针两侧分别带有荧光基因和柳制荧光发出的淬灭基团，新链延伸过程中，DNA聚合酶会破坏探针，导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT—PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法正确的是（       ）

A．做RT—PCR之前，需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针

B．RNA不能作为PCR扩增的模板，故需要将样本中的RNA逆转录为DNA后再进行扩增

C．若检测结果有强烈荧光信号发出，说明被检测者没有感染病毒

D．病毒的检测还可以检测病毒表面的物质或病毒引发产生的抗体，其原理都是抗原一抗体杂交

4 . 20世纪70年代，Fred sanger发明了双脱氧终止法对DNA进行测序。其原理如图，在4个试管中分别加入4种脱氧核苷三磷酸（dNTP）和1种双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）；ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸。在4个试管中DNA链将会分别在A、C、G及T位置中止，并形成不同长度的DNA片段。这些片段随后可被电泳分开并显示出来。下列说法中错误的是（　　）

A．这种测序方法需要引物和耐高温的DNA连接酶

B．电泳图谱中的箭头所指的DNA片段以鸟嘌呤结尾

C．测得未知DNA的序列为5'- GATTCGAGCTGA-3'

D．ddNTP与dNTP竞争的延长位点是核苷酸链的5'末端

5 . 下列生物学实验或实践活动中，不能够达成目的的是（　　）

A．利用无水乙醇提取并分离菠菜叶片中的光合色素

B．选择紫色洋葱鳞片叶的外表皮进行植物细胞的质壁分离及复原实验

C．灭菌后的外植体接种到无菌培养基上，培养获得愈伤组织

D．PCR仪扩增目的基因时应加入解旋酶提高解旋的效果

6 . 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，如图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1-4表示DNA上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述正确的是（       ）

A．若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏4个磷酸二酯键

B．若受体细胞为大肠杆菌，则需先用Ca2+处理，更利于实现转化

C．若用PCR技术获取目的基因，则图中的1、4分别是2种引物结合的位置

D．在PCR仪中根据选定的引物至少需经过6次循环才可获得32个符合要求的目的基因

7 . 用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱，其中1号为DNA标准样液（Marker），10号为电泳缓冲液。进行PCR时加入的模板DNA如图所示。据此做出分析正确的是（       ）

A．PCR产物的分子大小在250～500bp之间

B．3号样品为不含目的基因的载体DNA

C．9号样品对应植株不是所需的转基因植株

D．10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰

8 . 二十碳五烯酸（EPA）是人体需要的一种营养物质。某实验室利用转基因技术从海洋细菌中提取了EPA合成途径的关键基因。下图表示通过PCR获取和扩增基因的部分过程。下列叙述正确的是（       ）
   

A．PCR体系中需要加入引物、原料和等

B．据图可知，可以选择引物①④或者②③

C．PCR第n次循环需要个引物

D．用于PCR的两个引物的碱基序列一般相同

9 . PCR作为体外酶促反应体系，其效率和特异性取决于两个方面：一是引物与模板的特异性结合，二是Taq酶对引物的延伸。引物设计的总原则是提高扩增的效率和特异性。下列有关叙述错误的是（　　）

A．引物长度过短，特异性降低

B．经过5次循环后消耗引物64个

C．两种引物的碱基序列不能发生碱基互补配对

D．在第2轮循环产物中开始出现等长的目标DNA片段

10 . 下列关于利用PCR技术扩增目的基因的叙述，错误的是（       ）

A．PCR技术利用DNA半保留复制的原理，使核糖核苷酸序列呈指数方式增加

B．扩增目的基因前，需要设计可与目的基因的碱基序列互补的两种双链引物

C．基因的扩增依赖于模板、耐高温的DNA聚合酶和原料等物质

D．加热至90 ℃以上的目的是使基因的磷酸二酯键断裂