1 . 遗传毒性物质常存在于被化学物质污染的水体，可损伤生物的DNA，严重威胁人类健康。研究人员通过基因工程改造大肠杆菌，以期筛选对遗传毒性物质反应灵敏的工程菌株，用于水质检测。
（1）大肠杆菌DNA中存在可被遗传毒性物质激活的毒性响应启动子序列。将毒性响应启动子插入图1所示表达载体的P区，获得基因工程改造的大肠杆菌。当改造后的大肠杆菌遇到遗传毒性物质时，RNA聚合酶识别并与______结合，驱动噬菌体裂解基因（SRR）转录，表达产物可使大肠杆菌裂解。
（2）研究人员选取启动子sul准备与图1表达载体连接。图2显示了启动子sul内部存在的酶切位点，箭头表示转录方向。

①据图1、2信息，克隆启动子sul时，在其A端和B端应分别添加限制性内切酶______的酶切位点，从而确保启动子sul可与已被酶切的表达载体正确连接。
②将重组表达载体导入大肠杆菌，置于含有______的选择培养基中进行筛选、鉴定及扩大培养，获得工程菌sul。
（3）研究人员陆续克隆了其他4种启动子（rec、imu、qnr、cda），分别连入表达载体，用同样的方法获得导入重组载体的工程菌，以筛选最灵敏的检测菌株。
①将5种工程菌和对照菌在LB培养基中培养一段时间后，检测菌体密度，结果如图3。图中结果显示________________________，说明工程菌在自然生长状态下不会产生自裂解现象。
②上述菌株在LB培养基中生长2h时加入遗传毒性物质，检测结果如图4。据图可知，5种工程菌均启动了对遗传毒性物质的响应，应选择工程菌____________作为最优检测菌株。

（4）下列关于该工程菌的叙述，正确的包括______________
A．该工程菌可能用于检测土壤、蔬菜中的农药残留量
B．该毒性响应启动子序列广泛存在于自然界所有物种中
C．其表达产物可裂解大肠杆菌，检测后的剩余菌液可直接倒掉
D．为长期保存该工程菌，应加入一定浓度的甘油冻存于-20℃

2 . 下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。回答下列问题：

（1）对良种母牛用促性腺激素处理的目的是_____________________，从良种母牛采集的卵母细胞都需要进行体外培养，其目的是________________。
（2）图中A过程称为_______________，对受体母牛的要求是_______________________________。
（3）已知良种牛不仅肉质鲜美，产奶量也比其他品种的牛高。研究人员设想在试管牛中导入人干扰素基因，这样不仅能获得具有优良性状的试管牛，还能从母牛的乳汁中分离得到人干扰素。培育转基因试管牛时，应选择________________作为受体细胞。构建基因表达载体时，在人干扰素基因前端需添加________________，以确保人干扰素能成功合成。若使用同种限制酶对目的基因和载体进行切割，可能会导致_______________等不良后果。

3 . 耐辐射球菌对射线具有超强耐受力，其P基因突变株受射线照射后生存率显著降低。研究者利用P基因成功转化不耐辐射的酵母菌，经射线照射后检测发现，与非转基因酵母菌相比，转基因酵母菌三种抗氧化酶含量显著增加。相关叙述不合理的是（       ）

A．采用划线法将酵母菌接种到液体培养基中培养

B．酵母菌的接种、培养等操作需保证无杂菌污染

C．耐辐射球菌对射线的耐受力与P基因密切相关

D．P基因通过增强细胞抗氧化能力使细胞具有耐受力

4 . 为生产高效价疫苗和简化计划免疫程序，科学家研制出基因工程乙肝-百白破（rHB-DTP）四联疫苗，经各项检测均通过rHB-DTP四联疫苗制检规程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳杆菌、白喉杆菌和破伤风杆菌的四种类毒素。请分析回答下列问题：
（1）为获取百日咳杆菌类毒素的基因，可从百日咳杆菌的细胞中提取对应________，在逆转录酶的作用下合成双链cDNA片段，获得的cDNA片段与百日咳杆菌中该基因碱基序列_____________（填“相同”或“不同”）。
（2）由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比较小，且序列已知，获得目的基因可采用______，然后通过_____大量扩增，此技术的前提是已知一段目的基因的核苷酸序列以便合成引物。
（3）把目的基因导受体细胞时，科学家采用了改造后的腺病毒作为载体，写出你认为科学家选它的理由________________________。（写出2点）
（4）研究发现，如果将白喉杆菌类毒素20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸，免疫效果更好，请写出此种技术的基本流程_________________。
（5）实验证明，一定时间内间隔注射该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的______数量增多，当同种抗原再次侵入人体时，机体在更短时间内产生体液免疫的原因是_______________________。

5 . 下图为研究人员培育转黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因（CMV-CP基因）番茄的主要过程示意图（Kan^r为卡那霉素抗性基因）。请回答：

（1）若要使CMV-CP基因在番茄细胞中表达，需要构建基因表达载体，包含_____________、启动子、目的基因、终止子、复制原点。
（2）将CMV-CP基因导入番茄细胞后，培育的番茄植株具有抗CMV感染能力，这种现象属于植物的特异性免疫，该免疫过程中抗原是_____________。
（3）过程①接种的农杆菌细胞中，Kan^r及CMV-CP基因应插入到Ti质粒的________内部，该片段具有______________________的特点。
（4）③过程形成愈伤组织的培养基中应加入适宜浓度的_____________，其目的是_____________________________。
（5）过程③、④所需的培养基为_____________ （填“固体”或“液体”）培养基。过程⑤再生植株抗性鉴定时，引物序列设计的主要依据是_____________。

6 . 现代生物技术的发展越来越快，越来越贴近人们的生活。如转基因农作物、胚胎干细胞的利用、单克隆抗体、试管婴儿技术、生态工程等。根据所学知识，完成下列问题：
(1)在基因工程中，为了减少随花粉传播而造成的基因污染，可以将______________基因转移到受体细胞中，该基因的遗传方式______________（填“遵循”或“不遵循”）孟德尔遗传定律。
(2)科研人员利用经过埃博拉病毒免疫后的小鼠B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞进行融合形成杂交瘤细胞，对上述杂交瘤细胞还需进行________________和_______________。经筛选后就可以获得纯净的单一品种抗体，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”抗击埃博拉病毒。
(3)农杆菌能在自然状态下感染双子叶植物和裸子植物，当植物受到损伤时，其受伤部位的细胞会分泌大量的_____________________，从而使农杆菌移向这些细胞。农杆菌进入细胞后，可将Ti质粒上的_____________转移至受体细胞中，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。
(4)胚胎干细胞是由早期的胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，所以胚胎干细胞应该来源于囊胚的________________，胚胎干细胞在功能上的特点是_________________。

7 . 土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒，在侵染植物细胞的过程中，其中的T-DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程手段获取抗旱植株，以下分析不合理的是（　　）

A．若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏

B．将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用钙离子处理细菌

C．用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌感染植物细胞后，可通过植物组织培养技术得到具有抗旱基因的植物

D．若能在植物细胞中检测到抗旱基因，则说明该基因工程项目获得成功

8 . 下列有关生命的物质基础和结构基础的阐述，不正确的是： （     ）

A．C、H、O、N、P是ATP、染色质、质粒、NADPH共有的化学元素

B．糖蛋白、抗体、RNA聚合酶、限制性内切酶都是具有识别作用的物质

C．线粒体、核糖体、质粒、酶等结构或物质中肯定不含有核糖参与组成的是酶

D．假设某基因在控制合成两条多肽链的过程中，产生的水分子数为a，则组成该基因的碱基个数至少为（6a+12）

9 . 虫草中的超氧化物歧化酶(SOD)具有抗衰老作用。研究人员培育了能合成SOD的转基因酵母菌。回答下列问题:

注:Hind Ⅲ和ApaLⅠ是两种限制酶,箭头表示酶的切割位置。
(1)将图中的重组DNA分子用Hind Ⅲ和ApaLⅠ完全酶切后,可得到____种DNA片段。图示的表达载体存在氨苄青霉素抗性基因,不能导入用于食品生产的酵母菌中,据图分析,可用________切除该抗性基因的部分片段使其失效,再用DNA连接酶使表达载体重新连接起来。 
(2)作为受体细胞的酵母菌缺失URA3基因,必须在含有尿嘧啶的培养基中才能存活,因此,图示表达载体上的URA3基因可作为____供鉴定和选择;为了筛选出成功导入表达载体的酵母菌,所使用的培养基____(填“需要”或“不需要”)添加尿嘧啶。 
(3)目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为____。为了确定受体细胞中SOD基因是否转录,可用标记的____作探针进行分子杂交检测,分子杂交的原理是_____。 
(4)利用蛋白质工程获得活性更高的SOD时,需根据所设计蛋白质的结构推测其____序列,最终确定相对应的脱氧核苷酸序列并经____获得所需的基因。

10 . 请根据基因工程、胚胎工程、生态工程的知识，回答下列问题：
（1）基因工程技术中获得目的基因后，利用PCR技术将该基因扩增，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成___________。PCR技术中需要的关键酶是_____________。       
（2）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，农杆菌的作用是________。我国培育的转基因抗虫棉发展迅猛，在分子水平上，检测抗虫棉基因是否表达的方法是___________________。
（3）体外受精是胚胎工程的重要环节，来自母方的卵母细胞要在输卵管内进一步成熟，达到____________时期，才具备与精子受精的能力。胚胎移植是胚胎工程最后一道工序，其重要意义是___________________________。
（4）某生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成无废弃物农业，这主要遵循了生态工程__________的原理。我国西北一些地区年降雨量较少，适宜种植灌木和草，却被硬性种植了属于乔木的杨树，结果许多杨树长得半死不活，防护林成为残败的“灰色长城”。其失败的原因主要是违背了_______________的原理。