【推荐1】菊花是两性花，LFY是控制花分生组织形成的基因，LFY 基因过量表达会使植物开花提前。为使菊花花期提前，科研人员利用过表达的拟南芥LFY基因制备转基因菊花，重组Ti质粒的部分信息及实验流程如图1所示。启动子均为真核生物启动子。回答下列问题:
      
重组Ti质粒导入农杆菌后，利用农杆菌转化法转化并筛选LFY转基因菊花。
(1)本实验中潮霉素的作用是筛选__。步骤①的培养一般_______ (填“需要"或“不需要”)光照。图中Ⅰ中应填____________
(2)调整步骤②和步骤③培养基中____________的浓度和比例可诱导菊花芽或根的形成。
(3)以__________为模板，选用LFY基因特异性引物，用PCR检测LFY基因是否导入菊花细胞中。用__________方法检测转基因菊花中LFY蛋白的表达水平，进一步筛选转基因菊花.
(4)为避免该LFY转基因菊花中潮霉素抗性基因带来潜在的环境问题，可以优化实验方案，利用携带双T-DNA的Ti质粒(图2)制备转基因菊花。已知当Ti质粒存在双T-DNA时，两个T-DNA可以独立整合进植物细胞染色体DNA中。设计一个转基因植物制备和杂交育种相结合的实验方法，筛选只表达FLY的转基因菊花______。( 简要写出实验思路即可)

【推荐2】某同学设计实验探究某品牌香肠动物源性成分，利用猪、牛、羊、鸡、鸭的特异性引物序列，通过PCR扩增进行鉴定。
(1)处理香肠待测样品，提取样品DNA做模板，dNTP（dCTP、dATP、dGTP、dTTP）做反应原料，PCR反应体系中还需要加入___________完成扩增。
(2)利用上述5种特异性引物分别扩增待测DNA，哪种引物能够扩增就说明是哪种肉。基因组DNA电泳检测结果如下图，分析可知，此香肠含有___________源成分。

若5种引物都无法完成扩增，___________（填“能”或“不能”）说明该样品中一定不含这5种肉类，可能的原因是___________等无关变量影响了实验结果。为排除这些无关变量对实验结果的影响，应进行的操作是_________________。
(3)应用此方法还能探究的其他研究课题是_________________________________。
(4)比较PCR技术与体内DNA复制的异同，相同点是___________，不同点是___________。

【推荐3】酵母菌是发酵工业的重要微生物，主要用于生产酒精。酒精不仅是化工和制药的重要原料，又可以作为清洁燃料，在环境保护上具有特别重要的意义。我国酒精生产主要使用淀粉为原料，但酒精酵母不具有淀粉水解酶的活性不能直接发酵淀粉，淀粉需先经过糖化等工序在淀粉酶的作用下被水解成葡萄糖后才能被利用。通过基因工程将黑曲霉的酸性α-淀粉酶基因转入酒精酵母中制成酒精酵母工程菌，以加快酒精发酵速度并提高淀粉原料的利用率和出酒率。
(1)酸性α-淀粉酶基因作为目的基因需要利用PCR技术快速扩增，PCR反应时需要提供目的基因模板、____。在常规PCR的每一轮扩增反应中，温度随时间的变化顺序是____。
A.94℃，60℃，72℃     B.60℃，94℃，72℃     C.94℃，72℃，60℃
(2)目的基因的载体—质粒pUC19，除具有复制原点、启动子、终止子，多个限制酶切割点外，还需具有____（如G418抗性）便于重组质粒的筛选。
(3)培养酒精酵母使用的是YPD培养基（每升含酵母粉10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g），为检测重组质粒是否成功进入酵母细胞，在YPD培养基中加入200μg/ml的G418制成____（选填“选择”或“鉴别”）培养基。
(4)将待检测转基因酵母菌用无菌牙签点接在YNB平板上30℃培养3d后，用碘蒸汽熏染，观察____。
(5)取300μl成功的转基因酵母菌培养液上清液与300μl1%可溶性淀粉溶液混匀，60℃反应1h，100℃水浴煮沸10min灭活，用____同样操作作为对照。反应液中生成的葡萄糖用葡萄糖氧化酶试剂测定酶活性。
(6)将筛选出的酶活力高的三个转基因酵母菌株A、B、C在YPD平板上连续转移培养10次后，分别将原初菌株与转移5次和10次的菌株接种于YPD液体培养基，37℃振荡培养72h，测定上清液中的酸性α-淀粉酶活性，结果如下表。

品种/转移次数	酸性α-淀粉酶活性（U/ml）
菌种A	1.157
菌种A/5次	0.908
菌种A/10次	1.099
菌种B	0.919
菌种B/5次	1.103
菌种B/10次	0.806
菌种C	1.478
菌种C/5次	0.695
菌种C/10次	0.453

上述数据表明，菌株____不适合作为大规模发酵的工程菌使用，原因是____。