3 . 经由食物摄取过量生物胺会引起头痛、胃肠道不适和过敏等不良反应，严重时甚至危及生命，因此必须对食品中生物胺的含量进行减控。微生物来源的多铜氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程规模化生产重组MCO在食品工业中具有广泛用途。我国科研人员采用PCR技术获得发酵乳杆菌的MCO基因，然后转入大肠杆菌中实现了高效表达。
(1)通过上述基因工程技术获取目标产物，涉及如下步骤，则合理的操作步骤排序是_________。（填写下列编号）
① 筛选和鉴定含目的基因的受体细胞   ② 选用合适的方法获取目的基因   ③ 借助发酵工程规模化生产目标蛋白     ④ 目的基因导入受体细胞     
⑤ 目的基因和运载体重组构建表达载体
(2)在PCR过程中，引物的功能是             。

A．启动DNA复制	B．规定扩增区间
C．解旋DNA双链	D．充当复制模板

(3)为获得目的基因MCO（下图灰色表示的序列），正确设计的PCR引物应为       。

(4)获取目的基因后，需要和载体重组导入受体细胞。载体的化学本质是_____________。（填DNA或RNA/DNA或RNA）
(5)在常规PCR的每一轮扩增反应中，温度随时间的变化顺序是             。

A．

B．

C．

D．

(6)若目的基因MCO经限制酶切开后呈图10（左上）所示的末端，那么载体质粒pCLY15图10（左下）需用_____________和_____________切开，才能与MCO片段高效连接。

(7)下列实验操作中，能有效鉴别载体质粒pCLY15空载还是“满载”的是         。

A．从抗药性克隆中提取质粒DNA，用合适的限制酶切割

B．在选择培养基中添加X-gal试剂，以克隆的颜色进行鉴别

C．从抗药性克隆中提取质粒DNA，以此为模板进行PCR检测

D．将Ap抗性克隆转移至含Tc（四环素）的平板上，根据大肠杆菌生长与否加以鉴别

4 . 如图所示PSⅡ是一种蛋白复合体，具有吸收光能，通过反应中心进行光化学反应，使水分解释放氧气的作用，并可通过热耗散消耗捕获的多余光能，以保护光合组织免受伤害。

(1)PSⅡ分布在____________上，其反应中心一定具有的色素为____________。
猕猴桃是一种较不耐高温的藤本果树，为从赣猕、红阳、金艳和金魁四个品种中选育出耐热品种，研究人员将上述4种盛果期猕猴桃植株，在夏季田间持续高温38C以上处理1周后，于晴朗天气连续三天进行一日光合作用相关参数测定，测得的平均结果如下图，下表为相应时段的平均气温。

时间/h	平均气温/℃
8	36
10	38.8
12	41.5
14	42.6
16	41.4
18	36.4

(2)对以上实验结果的描述，正确的有____________。

A．4个猕猴桃品种的净光合速率均在8~12时快速上升，12时后下降

B．4个猕猴桃品种叶片气孔导度均在8~12时呈上升趋势，12时后呈下降趋势

C．随温度上升，4个猕猴桃品种叶片的实际光能转换效率均有所下降

D．随温度上升，4个猕猴桃品种猕猴桃叶片的光能热耗散均出现上升

(3)影响猕猴桃净光合速率曲线变化的可能因素包括____________。

A．温度	B．PSⅡ的结构和光能热耗散能力
C．气孔导度	D．还原三碳化合物有关酶的活性

(4)研究人员认为，4个猕猴桃品种中赣猕对高温的适应性最强。请结合图15和题意说明理由：____________。

5 . 果糖是葡萄糖的同分异构体，具有甜度高、对血糖指数（GI）影响小的特点，常以果葡糖浆的形式添加于奶茶、饮料、饼干、面包等甜味食品中。研究表明，长期大量摄入高果糖饮食会增加肥胖及糖尿病风险。

(1)在饮食中增加高果糖糖浆，正常肠道绒毛（如图A）的形态会发生如图B样的变化，该现象说明高果糖饮食会        

A．促进细胞分裂

B．促进细胞分化

C．促进细胞死亡

D．促进营养吸收

为进一步明确果糖对肠道绒毛营养吸收能力的影响，研究人员将基础能量消耗相同的小鼠分为甲、乙、丙三组进行实验，甲组喂食普通食物、乙组喂食不含果糖的高脂食物、丙组喂食等热量的高果糖高脂食物。得到如下图实验结果。

(2)以上实验结果说明        

A．高脂饮食会导致体重显著增加

B．高果糖饮食促进体重增加的幅度比高脂食物更显著

C．单纯高脂食物对血清甘油三酯影响不显著

D．喂食果糖能有效促进甘油三酯的吸收

(3)研究发现，在缺氧绒毛细胞内，果糖代谢中间产物F₁-P与葡萄糖代谢中间产物F₁，6-BP都会影响PKM2活性，两者关系如图1 C所示。下列调节关系与其类似的是        。

A．甲状腺素与促甲状腺素释放激素调节促甲状腺激素分泌

B．胰高血糖素与肾上腺素调节血糖

C．甲状腺素与肾上腺素调节体温

D．交感神经与肾上腺素调节血压

(4)图1C中PKM2被激活后，可以将糖代谢中间产物PEP上的磷酸基团转移至ADP分子，从而形成丙酮酸和ATP。则就其功能而言，激活的PKM2最可能是        。

A．激素

B．载体

C．递质

D．酶

(5)研究表明，高果糖饮食可以增加结直肠癌小鼠模型中的肿瘤大小，且与F1-P的高水平积累有关。请结合图1及题干信息，阐述膳食果糖促进肿瘤组织增长的分子机理：________。
(6)我国研究人员发现，来自天然植物的含笑内酯（MCL）可有效激活PKM2，根据以上分析，在动物实验中MCL的使用可以________（促进/抑制）肿瘤细胞的生长。

7 . 神经纤维瘤蛋白是一种肿瘤抑制因子，表达缺陷会引起神经纤维瘤（NF），导致人体多系统损害，典型症状是患者皮肤出现牛奶咖啡斑，左图为1型神经纤维瘤的一个家系（无需考虑Ⅱ-3、Ⅱ-4、Ⅱ-5的配偶与该病的遗传）。右图为对该家系中Ⅱ-4的染色体检测的结果，Ⅲ-7与Ⅲ-8的检测结果与Ⅱ-4一致。

1．据右图分析，该家系中NFI的发病原因是______。

A．染色体易位

B．染色体重复

C．染色体三体

D．基因丢失

2．左图中患者Ⅱ-4的父母和兄弟姐妹均表现正常，推测Ⅱ-4患病的原因是______。

A．I-1发生了体细胞变异	B．I-1发生了生殖细胞变异
C．Ⅱ-4发生了体细胞变异	D．I-4发生了生殖细胞变异

3．左图中若Ⅲ-7的配偶无异常，他们生下一个健康孩子的概率为______。
1型神经纤维瘤（NFI）的发病原因复杂多样。在另一个家系中，母女二人均患有视神经纤维瘤并且眼睛无虹膜（PAX6）。检测发现该系中夫妇二人及女儿的染色体形态和数目均正常，母亲的11号、17号染色体上带有PAX6和NF1突变基因，父亲无突变基因。
4．对母亲所携带的PAX6突变基因进行分析，发现其编码的蛋白质第38位由编码精氨酸变成了色氨酸。这种突变的原因是______________________。
5．该家系中的NFI、PAX6突变分别为______、______（显性/隐性）。
6．综合MF1遗传的特点，为确保患者后代正常，产前检查项目应包含______。

A．染色体分析

B．基因检测

C．性别鉴定

D．B超检查

基因编辑与生物技术
CRISPR-cas技术又称为基因编辑技术，其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。 CRISPR-cas9系广泛存在于细菌体内，是基于细菌的一种获得性免疫系统改造而成、可以定向切割外源DNA。如图表示基因编辑技术的简单示意图。

7．细菌中与CRISPR-cas9系统在物质组成上最相似的结构是______。
8．该系统使细菌获得抵抗______的能力。

A．噬菌体

B．抗体

C．抗生素

D．溶菌酶

9．PAM序列是一个NG序列（N可以是任何碱基，能被CRISPR-cas9系统识别，并在该序列附近有酶切位点，请分析其互补链上的碱基序列可以是______。

A．TGG

B．CCC

C．GCC

D．AG

10．以下关于CRISPR-cas9系统和限制酶功能说法正确的是______

A．都具有特异性

B．部能作用于磷酸和脱氧核糖之间的化学键

C．都能切割RNA单链

D．都需要和DNA连接酶配合使用，实现转基因

科学家同时利用两组CRISPR-cas9系统，使目的基因两端的DNA双链断裂，再将目的基因两侧的DNA片段连接起来，实现了细胞中目标基因的敲除，如图。2019年中国科学院神经科学研究所利用该技术处理猕猴胚胎后，获得了世界首例核心节律基因BMAL1敲除的猕猴。

11．请从分子水平上列举两个BAML1基因敲除猕猴与正常猕猴的差别_____________。
12．分别从基因波除猕猴的手臂肌肉组织和生殖腺组织中提取DNA进行基因检测，结果显示其手警肌肉组织DNA中未检出BMALI因而在生殖腺组织DNA中检出BMAL1基因。欲培养全身细胞中的BMAL1基因均被敲除的猕猴，请简述可采用的技术手段是__________。