8 . 研究发现，长期处于过度紧张、焦虑等应激状态下易引起血糖升高进而导致2型糖尿病的发生，部分机理如下图，其中CORT（皮质醇，一种肾上腺糖皮质激素）与Ins（胰岛素）会竞争性结合InsR（胰岛素受体），使胰岛素敏感性降低。回答下列问题。

   

(1)过度紧张、焦虑时，机体经________（调节方式）调控胰岛素的分泌，胰岛素作用于肝细胞后，“？”处的生理效应是________。
(2)图中激素a为________，与CORT共同作用的靶器官是________。交感神经兴奋使肠道L细胞膜内外电位表现为________。
(3)据图分析，处于过度紧张、焦虑等应激状态下血糖升高，一方面机体经________轴促进CORT的分泌，使胰岛素敏感性降低；另一方面交感神经兴奋使________，从而直接或间接引起胰岛素分泌减少，导致血糖升高，诱发2型糖尿病。
(4)研究发现，糖尿病脑病是由于大脑海马组织中神经细胞长期暴露在高糖环境中引起细胞凋亡所致，其部分信号通路如下图，其中IKKs、NF—xB、Klotho（一种抗衰老蛋白）和PRX2（一种抗氧化蛋白）均为细胞内蛋白质。利拉鲁肽（一种GLP-1受体激动剂，与受体结合后的信号转导与高血糖刺激相似）对糖尿病脑病具有一定的改善作用，为探究其作用机理，进行了相关实验，结果如下表。

   

组别	实验动物	皮下注射处 理（400μg·kg-1·d-1，持 续8周）	8周后蛋白质的相对表达量 （蛋白质的相对表达量=相关 蛋白质的表达量/β—Actin蛋白的表达量）
			IKKs	NF-xB	Klotho	PRX2
1	正常大鼠	生理盐水	0.39	1.0	0.45	0.36
2	糖尿病脑病大鼠	生理盐水	0.76	2.8	0.23	0.43
3	糖尿病脑病大鼠	利拉鲁肽	0.58	1.6	0.53	0.58

①图中，高糖应激下经过程A、B会进一步加剧炎症，加速神经细胞的凋亡，这种调节机制为________。
②实验中，计算蛋白质的相对表达量时以β-Actin蛋白作为参照，原因是________。与组别1相比，组别2中PRX2表达量升高的原因是________，组别3中PRX2表达量升高是因为________。
(5)综上研究，利拉鲁肽对糖尿病脑病具有一定的改善作用，其机理是________。

9 . Cre-loxP系统由Cre酶和loxP序列两部分组成，Cre酶作用能实现特定基因的敲除（如图1），图中箭头表示Cre酶的作用位点。利用基因工程技术培育抗虫抗除草剂水稻可减少因虫害（啃食叶片）和草害造成的稻米产量损失，为了增强食品安全性，科研人员利用Cre—loxP系统和组织特异性启动子P₃驱动Cre酶基因在胚乳中特异性表达，从而培育出了能够特异性删除种子胚乳中外源基因的转基因水稻品系。获得转基因愈伤组织过程如图2。回答下列问题。

(1)图1中，Cre酶作用于DNA特定部位的________键。Cre酶作用于两个loxP位点形成________的黏性末端，从而连接形成环状片段1和片段2。
(2)图2中，过程①使用的限制酶是________，选择P₂作为抗虫基因特异性启动子的优点是________。
(3)图2中，过程③为植物组织培养中的________过程。利用农杆菌转化法将目的基因导入愈伤组织后，将愈伤组织转移到含有________的培养基上筛选出转化成功的愈伤组织，经过植物组织培养获得转基因水稻。
(4)利用RT-PCR方法验证胚乳中外源基因的特异性敲除：提取转基因植物叶肉细胞和胚乳细胞的总RNA、野生型植物的叶肉细胞和胚乳细胞的总RNA，分别以GAPDH基因（内参基因）、EPSPS基因和cry1C基因的序列为依据设计引物进行RT-PCR，扩增后电泳，结果如图3（条带1和2分别为野生型叶肉细胞和胚乳细胞对应的电泳结果）。

①利用RT-PCR扩增EPSPS基因进行鉴定，有关引物必须考虑________。
A.EPSPS基因两边末端与引物等长的核苷酸序列
B.引物的5′端添加限制性核酸内切酶识别序列
C.两个引物及一个引物内部的碱基序列是否配对
D.引物长度、GC含量及在PCR反应体系中的浓度
②根据图3判断，________号条带为转基因叶肉细胞对应的电泳结果。转基因水稻________细胞中无EPSPS基因和cry1C基因，其机理是________。

10 . 小白菜根系部分微生物具有分解有机磷的能力，科研人员从中筛选出了分解能力强的菌株，并对培养条件的优化进行了研究，以期为微生物肥料的开发提供依据，部分研究步骤如下。
步骤1：小白菜根系微生物的分离纯化
取10g小白菜根系土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀并依次进行等比稀释。分别将稀释度10^-2∼10^-4、10^-3∼10^-5、10^-6∼10^-8的菌液接种到真菌、放线菌、细菌的培养基中，置于适宜条件下培养。
步骤2：小白菜根系解磷微生物的筛选
挑取步骤1中培养基上的不同单菌落接种到有机磷培养基A上，培养一段时间后观察菌落及透明圈大小（固体培养基中有机磷在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈），结果如下图（图中字母和数字组合代表菌株种类）。

   

步骤3：菌株解磷能力的测定
将初步筛选的3种菌株分别接种到有机磷培养基B中进行培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量。
步骤4：解磷菌株培养条件的优化
配制有机磷培养基时分别使用葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉、甘露醇作为碳源，并分别设置不同转速进行摇床培养，72小时后检测培养液中可溶性磷含量，结果如下图。

   

回答下列问题。
(1)步骤1取不同稀释度菌液接种到不同种类培养基的原因是________。
(2)步骤2使用的接种工具为________，接种前需进行________，以防止杂菌污染。接种时，可根据菌落的________挑取不同类型菌株分别接种到培养基A上。培养结果初步表明，FG5解磷能力最强，依据是________。
(3)与步骤2中培养基A相比，步骤3中培养基B在成分上的主要差异是________。经测定，培养FG5的上清液中________，则可确认FG5的解磷能力最强。
(4)步骤4进行摇床培养时，转速过低溶液中可溶性磷含量不高，可能原因是________，但转速过高容易导致________，从而影响其解磷能力。
(5)综上研究，在实验条件下为更好地实现有机磷的降解，你的建议是________。