1 . 如图为某雌蜂（二倍体）体内正在分裂的两个细胞（仅显示部分染色体及基因），下列说法正确的是（       ）

A．乙细胞可以由甲细胞分裂产生，乙细胞分裂产生生殖细胞

B．与乙细胞同时产生的另一个细胞，其基因型一定是Aabb

C．乙细胞为次级卵母细胞，含有基因A、a的原因可能是发生了片段的互换

D．若该雌蜂产生的子代雄蜂体内出现了与乙细胞相同的细胞，其原因只能是基因突变

2 . 紫草是一种重要的药用植物，其根部富含红色的萘醌类次生代谢产物——紫草宁及其衍生物。它们具有抗菌、消炎、活血、诱导癌细胞凋亡等功效，同时也是一种天然染料。由于大规模的乱采滥挖，野生紫草资源已趋于衰竭，为更好地获得紫草宁及其衍生物，利用新生营养芽为外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养来生产紫草宁已成为解决问题的重要手段。请分析回答下列问题：
(1)选用新生营养芽为外植体的原因是______________（答出一点）。外植体经过诱导后形成愈伤组织的过程称为____________。
(2)培养过程中需要加入蔗糖，蔗糖的作用是_____________（答出两点）。还要加入一定的植物激素，常用的植物激素有______。
(3)研究发现，悬浮培养比固体培养更有利于紫草细胞的生长，原因是________。
(4)紫草悬浮培养时细胞的生长曲线如图所示。

   

接种后第3天左右，紫草宁及其衍生物开始形成；对数生长期及直线生长期，紫草宁含量逐步上升；静止期，紫草宁形成速度加快至最高水平。这说明细胞分裂生长缓慢______（填“有利于”或“不利于”）目的产物的形成。

3 . 甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质，为了改善黄瓜的品质，科学家利用农杆菌转化法将一种甜蛋白基因成功导入黄瓜试管苗叶细胞，再经植物组织培养获得甜蛋白基因过量表达的转基因黄瓜植株。图1为甜蛋白基因及限制酶切割位点。请回答下列问题：

   

(1)限制酶切割DNA分子时破坏的化学键是____________。上述实现转基因技术过程中，科学家利用了如图2所示PBI121质粒，为了保证目的基因能够正确插入质粒，切割目的基因及PBI121质粒可用的限制酶为______。
(2)利用农杆菌转化法能将甜蛋白基因转入黄瓜细胞，转化是指____________。
(3)转入甜蛋白基因后的黄瓜细胞，转化后应在培养基中添加______（填“新霉素”或“卡那霉素”或“新霉素和卡那霉素”），筛选转化成功的愈伤组织。若要获得产甜蛋白能力更强的基因，可以对甜蛋白基因进行改造，最终得到更多的甜蛋白，该过程可以通过蛋白质工程完成，基本思路为________________________。
(4)下表是鉴定含甜蛋白基因黄瓜植株的4种方法。请预测同一后代群体中，通过4种方法检出的含甜蛋白基因黄瓜植株的比例，从小到大依次是________________________。

方法	检测对象	检测目标	检出的含甜蛋白基因植株的比例
PCR扩增	基因组DNA	甜蛋白基因	P1
分子杂交	总mRNA	甜蛋白基因转录产物	P2
抗原—抗体杂交	总蛋白质	甜蛋白基因编码的蛋白质	P3
测甜度	黄瓜	含甜蛋白基因黄瓜	P4

4 . 将外源DNA与精子在吡啶核苷酸辅酶剂中一起孵育，精子可捕获外源DNA，并通过受精过程将外源DNA导入受精卵，该方法为精子载体法，能大大简化转基因动物的制备过程。如图表示用该方法制备转基因鼠的流程。据图分析，回答下列问题：

(1)从小鼠体内采集到的精子需要进行______处理才能用于体外受精，同时采集到的卵母细胞一般需培养到______期。
(2)过程③中，受精卵在体外培养时，一般要置于含有95%空气和5%CO₂的混合气体的培养箱中培养，其中CO₂的主要作用是_____________，受精卵增殖为早期胚胎的分裂方式是______。
(3)将早期胚胎移植到代孕母鼠体内时，一般______（填“需要”或“不需要”）使用免疫抑制剂处理代孕母鼠，这是由于____________。
(4)实验人员利用精子载体法将外源DNA导入小鼠精子，检测发现，不同小鼠个体精子中外源DNA的阳性率平均为13%左右。进一步实验，让检测为阳性的精子进行受精作用，将受精卵进行体外培养，胚胎中外源DNA表达的阳性率为4.7%。该实验结果说明运用精子载体法制备小鼠疾病模型______（填“具有”或“不具有”）可行性。

5 . 人血清白蛋白（HSA）是血浆蛋白的主要成分，具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。利用基因工程生产重组人血清白蛋白（rHSA）可解决HSA短缺问题。科研人员依据基因组中HSA基因的碱基序列，同时考虑生产菌X（一种组氨酸缺陷型酵母菌）的生理特点，人工设计了rHSA基因。图1表示HSA基因，图2为基因工程所用质粒及相关元件（基因S控制合成信号肽，能引导后续合成的肽链进入内质网腔；HIS4控制合成组氨酸）。请回答下列问题：

(1)若要扩增出HSA基因并用于表达载体的构建，应选择的引物是图1中的______，其作用是___________。
(2)采用PCR技术扩增rHSA时，每次循环一般依次经过变性、复性和______三个步骤。构建基因表达载体时，将HSA基因构建在图2中的S基因后形成融合基因，目的是______。
(3)rHSA基因导入生产菌X需要经过两次筛选：第一次在含有氨苄青霉素的培养基中筛选得到含rHSA基因表达载体的大肠杆菌；第二次筛选时，将上述大肠杆菌与生产菌X混合，然后在___的基本培养基上培养，筛选出含有rHSA基因表达载体的生产菌X。rHSA基因表达载体既可在大肠杆菌中又可在生产菌X中稳定遗传的原因是_______________。
(4)AOX1为甲醇氧化酶的启动子，以其作为rHSA基因的启动子时，在以甲醇为碳源的培养基中rHSA基因正常表达，无甲醇时该基因不表达。从生产控制的角度分析，选用AOX1作为rHSA基因的启动子的优点是_______________。

6 . 苹果富含矿物质和维生素，真菌X可引起苹果树腐烂病，对苹果树威胁很大，目前该病仍以化学防治为主。研究人员欲从土壤中分离筛选出能抑制真菌X的芽孢杆菌进行生物防治。分离筛选芽孢杆菌的实验流程如下图所示，分析回答以下问题：

(1)将5g土壤加入盛有______mL无菌水的锥形瓶中，可得到稀释10倍的土壤悬液；经过梯度稀释后即可接种到培养基上，再根据培养基上菌落的______等特征鉴别出芽孢杆菌并进一步纯化。
(2)上图所示分离筛选芽孢杆菌的方法是______。观察记录结果，若10³稀释倍数下的三个平板菌落数分别为58、73和97，10⁴稀释倍数下的三个平板菌落数分别为8、15和28。据此估算每克土壤中含相关微生物的数目为______个。
(3)目的菌株筛选时，需在上图中多个实验组和对照组的A处接种等量真菌X，并在不同实验组的B处接种一系列不同含量的同种芽孢杆菌，然后在相同且适宜的条件下培养合适的时间。判断目的菌株抑菌效果最佳的依据是____________。
(4)为进一步检测芽孢杆菌的抑菌效果，某同学选用健康苹果树枝条进行测定，请为该同学设计简要的实验思路____________。

7 . 琼脂糖凝胶电泳常用于基因工程中不同DNA片段的检测，研究人员用EcoRⅠ和SmaⅠ两种限制酶处理某DNA分子，得到图2所示图谱，其中1号泳道是标准DNA样品，2号、3号、4号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果；图1为EcoRI切割该DNA分子后的结果。下列说法正确的是（       ）

A．该DNA分子最可能是含1000bp的环状DNA

B．图1中形成的黏性末端仅能用E.coli DNA连接酶连接

C．据图2可知，该DNA分子中EcoRⅠ和SmaⅠ的酶切位点各有一个

D．EcoRⅠ和SmaⅠ的切割位点最短相距约600bp

8 . 为研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型黑鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得诱导胚胎干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图所示。下列叙述错误的是（       ）

A．iPS细胞培养时培养液中通常需要添加血清等物质

B．胚胎移植后，重构胚进一步扩大导致囊胚腔破裂的过程称为孵化

C．为确定克隆鼠培育是否成功，要对黑色鼠3进行胰岛素抵抗的相关检测

D．为获得更多的双细胞胚，可对白色鼠1注射促性腺激素达到超数排卵的目的

9 . 细胞融合技术有着广泛应用。如图为细胞融合的简略过程，下列叙述正确的是（       ）

A．若该图表示植物体细胞杂交技术，则C细胞再生出细胞壁后会发育为愈伤组织

B．若该图表示动物细胞融合技术，则可用高Ca2+-高pH融合法诱导A、B细胞融合

C．若A、B分别是白菜（2n）的卵细胞和甘蓝（2n）的精子，则C细胞发育成的植株不可育

D．若A和B分别为基因型AaBB、aaBb植株的花粉细胞，则去壁后两两融合可得到4种基因型细胞

10 . 生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点，下列叙述错误的是（       ）

A．转基因生物可能会成为新的过敏原，引发新的过敏反应

B．种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性

C．当今社会的普遍观点是禁止生殖性克隆人，同时坚决反对治疗性克隆

D．我国奉行不发展、不生产、不储存生物武器的政策，反对生物武器的扩散