1 . 做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（       ）

A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖

B．用记号笔标记培养皿中菌落时，不能标记在皿盖上

C．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

D．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

2 . 玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

（1）玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供________。发酵过程中检测酵母菌数量可采用_______法或稀释涂布平板法计数。
（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用_______法或________法从玉米胚芽中提取。
（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。
（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的_______催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。

3 . 【生物技术实践】
科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白，这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。
（1）分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的______________、大小及形状不同，在电场中的________不同而实现分离。
（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_________和_______________。
（3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的_____________，确定该蛋白质的抗菌效果。
（4）细菌培养常用的接种方法有_______和___________。实验结束后，对使用过的培养基应进行_____________处理。

4 . 某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。

回答下列问题：
（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________。甲、乙培养基均属于______________培养基。
（2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×10⁷ 个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。
（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1点即可）。
（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤________________。
（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即________________。

5 . 2019 年 7 月，《上海市生活垃圾分类管理条例》施行，生活垃圾分类成为市民的日常生活方式，生活垃圾分类中的湿垃圾是指可被微生物降解的有机物。
1．下列属于湿垃圾的是______。
①剩余饭菜     ②玻璃碎片     ③植物落叶     ④过期面包 ⑤果皮果壳
2．湿垃圾降解后才能被植物利用，是因为根毛细胞难吸收     。

A．尿素

B．矿物质

C．H2O

D．大分子有机物

处理是垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解。下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。

3．培养基中加入碳源是____。根据上图，将菌液接种到培养基的方法是___。
4．据图，菌落①与菌落②周围透明圈的大小不同，原因可能是两个菌群        。

A．对碘液分解能力不同	B．分泌的淀粉酶活性不同
C．合成淀粉量不同	D．受淀粉抑制程度不同

5．对筛选到的菌落①与菌落②进行鉴定，发现①属于真菌，②属于细菌，两者的本质区别是 。

A．细胞膜的成分

B．有无细胞结构

C．核糖体的有无

D．有无完整核膜

6．若垃圾分类不当，在湿垃圾中混入了过期的抗生素或电池等，将不利于微生物分解，原因是 。

A．会抑制微生物生长	B．是微生物的生长因子
C．促进有机物的合成	D．为微生物提供碳源和氮源

6 . 已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌（目标菌）。
Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X（5g/L）。
Ⅱ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），X（15g/L）。
Ⅲ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量）。X（45g/L）。
回答下列问题。
（1）在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是___________。Ⅱ、Ⅲ号培养基为微生物提供碳源的有机物是_________。
（2）若将土壤悬浮液种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_________，其原因是_________。
（3）Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是______________。
（4）假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供_________和_________。

7 . 某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。 下列叙述正确的是

A．培养基分装到培养皿后进行灭菌

B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线

C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养

D．培养过程中每隔一周观察一次

8 . 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

9 . 胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：

（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用___________或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是_________ 。
（2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R生长提供__________和__________。
（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和______以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用______方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是_______。
（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准样品作为______。

10 . 由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的 α-淀粉酶 基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。

(1)图甲中，过程①需要的酶有_____________ 。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以____________ 作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是______________ 。
(2)某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________________ ；推测该同学接种时可能的操作失误是______________ 。
(3)以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________ 。
(4)用凝胶色谱法分离α 一淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较________ 。