1 . PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，与人体细胞内DNA分子复制相比，下列有关叙述错误的是（       ）

A．都遵循碱基互补配对原则

B．DNA聚合酶作用的最适温度不同

C．都是边解旋边复制的过程

D．复制方式都是半保留复制

2 . 细胞介素简称白介素，白介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T细胞和B细胞活化，增殖与分化及炎症反应中起重要作用。利用基因工程技术，可以让哺乳动物批量生产白介素。制备乳腺生物反应器生产白介素的过程图如图3所示。回答下列问题：

(1)可使用_____技术扩增白介素基因。已知DNA复制时，子代核苷酸链只能从引物的3'端延伸，则利用上述技术扩增白介素基因时，应选择图2中的_____（填字母）单链核苷酸序列作为引物。
(2)在构建重组质粒时，只选用BclⅠ切割白介素基因和质粒有何弊端？_____。
(3)可使用含有_____的培养基筛选导入了重组质粒的受精卵。受精卵发育到囊胚阶段时，细胞逐渐分化，将来发育成胎儿的各种组织的是_____，将来发育成胎膜和胎盘的是_____。

3 . 新型冠状病毒在世界范围内广泛传播，各国都在努力加快疫苗研发进度；到目前为止，已有部分疫苗进入临床使用阶段。结合所学回答有关问题。
(1)灭活疫苗方案具有技术方案简单、成熟度高、研发快速的优点，在体外利用_____________（“固体培养基”或“人呼吸道上皮活细胞”）培养新冠病毒，经过灭活减毒处理后，注入人体，刺激其产生____________。
(2)若制备腺病毒载体新冠病毒疫苗，首先以新冠病毒的遗传物质RNA为模板经过逆转录获得DNA，其次制备重组的腺病毒，该过程需要____________酶参与，该步骤在基因工程中被称为____________。
(3)mRNA疫苗就是将病毒靶标蛋白合成所需的一小段mRNA混入载体（如脂质体）中，注入人体后可产生靶标蛋白，激发免疫反应。人没有感染风险的原因是____________。DNA疫苗制备需要扩增新冠病毒的某种基因，扩增时需加入引物，如扩增n次，则需要引物_____________个。
(4)新冠疫苗制备后，经过一段时间后，可能会起不到良好的预防作用，原因是____________。

4 . 下面关于多聚酶链式反应(PCR)的叙述错误的是（       ）

A．常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物

B．PCR的循环过程分为变性、复性和延伸三步

C．PCR技术利用DNA半保留复制的原理，可在短时间内大量扩增目的基因

D．一个目的基因用PCR扩增生成2n个目的基因的过程中需要2n+1个引物

5 . 下列关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验，说法错误的是（       ）

A．PCR利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制

B．PCR的产物一般要通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定

C．凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子的大小有关

D．为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的工具也需要灭菌处理

6 . 体外条件下，DNA复制需要有引物。下列叙述错误的是（       ）

A．用于PCR扩增的引物的长度通常为20～30个核苷酸

B．引物制备的前提是已知目的基因的部分脱氧核苷酸序列

C．进行体外DNA复制时，引物要有两种且不能互补配对

D．脱氧核苷酸作为扩增的原料会依次连接到引物的5′端

7 . 科学家利用逆转录病毒将Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4四个细胞中的转录因子基因转入小鼠成纤维细胞中，然后在培养ES细胞的培养基上培养这些细胞。2-3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态，具有活跃的分裂、分化能力各方面都与ES细胞相似，它们就是iPS细胞。回答下列问题：
(1)Klf4的化学本质是_________。如要在体外对Klf4进行扩增需要使用PCR技术，在其体外扩增的过程中需要在扩增体系中加入的_________酶。若要鉴定PCR产物是否是Klf4，可以采取_________技术鉴定。
(2)将Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4转入小鼠成纤维细胞中时逆转录病毒起到_________的作用。与成体干细胞相比，iPS细胞不具有_________，具有分化成各种组织或细胞的潜能。
(3)若将胰岛损伤的糖尿病病人的皮肤成纤维细胞诱导成iPS细胞，再将它转化成胰岛B细胞，将这些胰岛B细胞移植到病人体内，_________（填“是”/“否”）会引起免疫排斥反应。分析原因_________。
(4)实验证明iPS细胞的产生不是由培养基的作用造成的，为验证该结论设计了对照实验，请写出该实验的实验思路_________。如果要了解Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4在诱导iPS细胞产生时，每个基因作用的相对大小，需要设计_________组实验。

8 . 用PCR扩增下面的DNA片段：
5'GACCTGTGGAAGC……          CATACGGGATTG3'
3'CTGGACACCTTCG……          GTATGCCCTAAC5'
供选择的引物有：
①5'GACCTGTGGAAGC3'、②5'CATACGGGATTG3'、
③5'GTATGCCCTAAC3'和④5'CAATCCCGTATG3'
共四种，应选择（       ）

A．①②	B．②③
C．③④	D．①④

9 . 操作顺序的先后是实验成败的关键，下列操作先后顺序正确的是（       ）

A．测定酶活力时，将酶与底物混合后加入缓冲液，一段时间后检测产物的量

B．观察根尖细胞的有丝分裂时，先低倍镜找到分生区细胞，再在高倍镜下找到中期细胞，然后再找其他时期的细胞

C．对培养液中酵母菌进行计数时，先将菌液滴入计数室，再盖上盖玻片并吸取多余的菌液

D．PCR技术扩增DNA时，一轮循环的温度按95℃→72℃→55℃的顺序逐步降低

10 . 农杆菌Ti质粒上的T-DNA可以转移并随机插入到被侵染植物的染色体DNA中。研究者将下图中被侵染植物的DNA片段连接成环，并以此环为模板进行PCR，扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列，以此可确定T-DNA插入的具体位置。下列说法不正确的是（       ）

注：子链从引物的3^/端开始延伸

A．PCR扩增依据的是DNA分子双链复制的原理

B．进行PCR扩增需要热稳定DNA聚合酶

C．利用图中的引物②、③组合可扩增出两侧的未知序列

D．通过与受体细胞的基因组序列比对，可确定T-DNA的插入位置