1 . 传统的基因测序往往需要从大量细胞中提取DNA。科研人员应用单细胞基因组扩增技术，成功地在体外对分离得到的极体进行了基因组扩增（PCR），并完成了测序，从而推测出与被测极体同时产生的卵细胞不含致病基因，最终借助试管婴儿技术帮助女性遗传病患者获得健康婴儿，试管婴儿技术涉及体外受精、胚胎移植等技术。下列有关叙述，正确的是（　　）

A．被测极体的单细胞基因组只包含一个染色体组上的基因

B．体外扩增DNA需要引物，体内DNA复制不需要引物

C．精子获能指精子在获能液中获得ATP后才具备受精能力

D．PCR反应缓冲溶液中要添加Mg2+、耐高温的DNA解旋酶

2 . 如图为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是（       ）

A．催化①过程的酶是RNA聚合酶

B．④过程发生的变化是引物与单链DNA结合

C．催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温

D．如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与U之和也占该DNA碱基含量的40%

3 . 下列生物学实验或实践活动中，不能够达成目的的是（　　）

A．利用无水乙醇提取并分离菠菜叶片中的光合色素

B．选择紫色洋葱鳞片叶的外表皮进行植物细胞的质壁分离及复原实验

C．灭菌后的外植体接种到无菌培养基上，培养获得愈伤组织

D．PCR仪扩增目的基因时应加入解旋酶提高解旋的效果

4 . 下图为数字PCR技术的原理示意图，下列相关叙述错误的是（       ）

A．PCR每一循环包括变性、复性（退火）和延伸三步

B．每个反应单位中都含有耐高温的RNA聚合酶

C．每个反应单位有无荧光取决于是否含有靶分子

D．数字PCR技术有利于提高病原体检测的灵敏度

5 . 某雌雄异株作物的性别决定方式为XY型，抗虫性状由两对独立遗传的等位基因A/a和B/b控制。现用纯合抗虫雌株和纯合不抗虫雄株交配产生F₁，F₁相互交配，F₂表型及比例为抗虫植株：不抗虫植株=15:1。回答下列问题：
(1)欲完成上述杂交实验需要对母本进行的操作是_____________。
(2)进一步统计的结果，若出现_____________，则可判断有一对基因位于X染色体。
(3)科学家从杂草中偶然获得一抗病基因E，运用基因工程技术将该基因导入与上述亲本作物基因型相同植株的染色体DNA上后，获得抗病植株甲、抗病植株乙。科学家利用荧光定量PCR技术，对F₁植株、雄株甲、雌株乙的等量体细胞进行检测，结果如图所示：
   
实验中检测中基因A的目的是_____________。为确定基因E导入的位置，科研人员将雄株甲与雌株乙杂交，统计子代植株表型及比例为抗病雄株：抗病雌株：不抗病雌株=2:1:1。请用“•”在下图中画出雄株甲与雌株乙中的组成体细胞中抗病基因E在染色体上的分布示意图_____________（注：画出抗病基因E的位置即可）。
   

6 . 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，如图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1-4表示DNA上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述正确的是（       ）

A．若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏4个磷酸二酯键

B．若受体细胞为大肠杆菌，则需先用Ca2+处理，更利于实现转化

C．若用PCR技术获取目的基因，则图中的1、4分别是2种引物结合的位置

D．在PCR仪中根据选定的引物至少需经过6次循环才可获得32个符合要求的目的基因

7 . 通过基因工程利用小球藻生产人胰岛素能克服利用细菌生产时的不利影响。小球藻可大规模种植，并且所生产的胰岛素可以直接用于医疗和保健，该技术能提高小球藻的药用价值，形成高附加值的生物技术产品，同时也能降低医用蛋白的价格，使人胰岛素的应用得到普及。回答下列问题：
(1)基因工程操作的核心步骤是____________，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以通过复制遗传给下一代，使目的基因表达和发挥作用。
(2)基因表达载体上的终止子的作用是____________。
(3)在生物体外常用PCR技术来扩增目的基因，PCR的原理是_____________。在PCR体系中需要加入dNTP（dATP、dTTP、dGTP、dCTP），dNTP脱去两个磷酸后形成的物质能作为DNA合成的原料，则dATP和ATP在组成成分上的差别是____________，在PCR体系中____________（填“需要”或“不需要”）加入ATP。

8 . PCR技术可用于临床的病原菌检测。为检测病人是否感染了某种病原菌，医生进行了相关操作：①分析PCR扩增结果；②从病人组织样本中提取DNA；③利用PCR扩增DNA片段；④采集病人组织样本。回答下列问题：
(1)若要得到正确的检测结果，正确操作顺序应该是______（用数字序号表示）。
(2)操作③中使用的酶是______ 。PCR反应中的每次循环可分为______、复性、______三步，其中复性的结果是______ 。
(3)为了做出正确的诊断，PCR反应所用的引物应该能与______特异性结合。
(4)PCR（多聚酶链式反应）技术是指_______________。该技术目前被广泛地应用于疾病诊断等方面。

9 . 玉米的祖先——野生玉米，名叫“大刍草”，经过9000多年人工驯化，被改造成现代玉米。我国中科院科学家经过长达10年不懈努力，从野生玉米“大刍草”中，成功找回玉米人工驯化过程中丢失的一个控制高蛋白含量的优良基因THP9，克隆出来并将此高蛋白基因转移到玉米细胞内，获得了转基因高蛋白玉米新品种。请回答相关问题：

EcoRI	BamHI	KpnI	MfeI	HindⅢ

(1)若科研人员获得了THP9基因对应核苷酸序列，则可利用DNA合成仪直接合成目的基因，该种获取目的基因的方法是___________。
①化学合成法②PCR法③基于大规模筛选的方法
(2)构建基因表达载体时，若科研人员需将THP9基因整合到质粒上，如图，已知图中THP9基因转录方向为从左往右，应使用限制酶______________切割如图中质粒，使用限制酶________________切割图中含THP9基因的DNA片段，以获得能正确表达THP9基因的重组质粒。
(3)限制酶来源于原核生物，不会切割本身的DNA分子是因为_____________________。
(4)TPH9基因转录的模板链是______，利用PCR技术对THP9基因进行扩增的原理是__________。
(5)为了检测转基因技术是否成功，科研工作者在个体水平上的检测方法是____________________。

10 . 研究人员发现，有一种称作XRCC2的启动子（负责RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列）在正常细胞中表达水平很低，而在癌细胞中却高表达。利用该特性，研究人员结合DTA（白喉毒素A基因，其表达产物能够杀死细胞）做了如下图1实验。回答下列问题：

(1)组成XRCC2启动子的基本单位是_____。图2所示为XRCC2启动子两端的部分序列，通过PCR扩增XRCC2启动子，需要设计的两种引物的碱基序列为_____、_____（标明5'和3'端）。
(2)为了成功构建能够特异性杀死肿瘤细胞的质粒，需要先将XRCC2启动子与DTA形成融合基因。请结合图1简述构建融合基因的过程：_____。
(3)要验证重组质粒的表达产物能专一性杀死癌细胞，还需要设置一组对照实验，具体的实验方案为_____。
(4)基因驱动是指特定基因有偏向性地遗传给下一代的自然现象。遗传学家研究发现，基因驱动技术几乎可以百分之百地使突变基因在同一生物的不同种群个体之间传播，某些生物学家曾提出把这种技术应用于消灭一些入侵物种，从而保护那些濒危物种，一些遗传学家立即呼吁增强这种技术的管制。请从生物技术安全性的角度简要谈谈你对该技术的看法：_____。