名校
1 . 中国科学家采集了某深海海域的沉积物样品，分离、鉴定得到其中的深海放线菌，以期获得具有前景的抗生素替代品。据此回答下列问题：
(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过_______ 法接种到高氏一号（加数滴质量分数为10%的酚）培养基表面以获得____________ 。培养基中的酚能抑制细菌等杂菌的生长，而放线菌能在该培养基上正常生长，这种培养基属于____________ 培养基。
(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是____________ ，在PCR反应缓冲液中通常要加入____________ ，以激活该酶。
(3)PCR能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是____________ 。PCR的产物一般可通过_____________ 鉴定。
(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过
(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是
(3)PCR能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是
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名校
2 . 细胞介素简称白介素，白介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T细胞和B细胞活化，增殖与分化及炎症反应中起重要作用。利用基因工程技术，可以让哺乳动物批量生产白介素。制备乳腺生物反应器生产白介素的过程图如图3所示。回答下列问题：
(1)可使用_____ 技术扩增白介素基因。已知DNA复制时，子代核苷酸链只能从引物的3'端延伸，则利用上述技术扩增白介素基因时，应选择图2中的_____ （填字母）单链核苷酸序列作为引物。
(2)在构建重组质粒时，只选用BclⅠ切割白介素基因和质粒有何弊端？_____ 。
(3)可使用含有_____ 的培养基筛选导入了重组质粒的受精卵。受精卵发育到囊胚阶段时，细胞逐渐分化，将来发育成胎儿的各种组织的是_____ ，将来发育成胎膜和胎盘的是_____ 。
(1)可使用
(2)在构建重组质粒时，只选用BclⅠ切割白介素基因和质粒有何弊端？
(3)可使用含有
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2023-05-07更新
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234次组卷
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2卷引用：2023届吉林省通化市梅河口市五中高三五模理综生物试题
3 . 下列关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验，说法错误的是（ ）
| A．PCR利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制 |
| B．PCR的产物一般要通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定 |
| C．凝胶中DNA分子的迁移速率只与DNA分子的大小有关 |
| D．为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的工具也需要灭菌处理 |
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2023-05-04更新
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251次组卷
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3卷引用：吉林省长春市博硕学校2022-2023学年高二下学期期中生物试题
名校
4 . 四尾栅藻生长周期短、适应性强，是一种高潜力生物柴油新型原料，但油脂产量低。研究人员从含油量高的紫苏中提取DGATl（催化油脂合成的关键酶）基因，并成功导入四尾栅藻细胞内，获得转基因的产油四尾栅藻。其制备流程如图，图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，LacZ基因可使细菌分解培养基中的物质X-gal，进而使菌落呈现蓝色，无该基因或该基因被破坏，菌落呈白色。回答下列问题：
(1)从高表达的紫苏组织细胞中提取总的RNA，经_________ 获得cDNA，用于PCR扩增，PCR扩增DGATl基因时，使反应体系中的模板cDNA解旋为单链的条件是__________________ 。
(2)在DNA延伸的过程中，使用Taq DNA聚合酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是_____ 。
(3)构建的pMD19-DGATl导入经CaCl2溶液处理的感受态大肠杆菌细胞中，并通过稀释涂布平板法接种到含_________ 的培养基中培养。一段时间后，挑选_________ 色的菌落以提取质粒pMD19-DGATl。
(4)用限制酶BamH I和Xba I切割pMD19-DGATl和pBI121，将其连接成重组表达载体pBI121-DGATl， 并将其导入四尾栅藻细胞中。与单酶切相比，双酶切的优点是________ 。
(1)从高表达的紫苏组织细胞中提取总的RNA，经
(2)在DNA延伸的过程中，使用Taq DNA聚合酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是
(3)构建的pMD19-DGATl导入经CaCl2溶液处理的感受态大肠杆菌细胞中，并通过稀释涂布平板法接种到含
(4)用限制酶BamH I和Xba I切割pMD19-DGATl和pBI121，将其连接成重组表达载体pBI121-DGATl， 并将其导入四尾栅藻细胞中。与单酶切相比，双酶切的优点是
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2023-05-03更新
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102次组卷
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2卷引用：吉林省梅河口市博文学校2022-2023学年高二下学期第二次月考生物试题
名校
5 . 体外条件下，DNA复制需要有引物。下列叙述错误的是（ ）
| A．用于PCR扩增的引物的长度通常为20～30个核苷酸 |
| B．引物制备的前提是已知目的基因的部分脱氧核苷酸序列 |
| C．进行体外DNA复制时，引物要有两种且不能互补配对 |
| D．脱氧核苷酸作为扩增的原料会依次连接到引物的5′端 |
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2023-05-03更新
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250次组卷
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3卷引用：吉林省长春市博硕学校2022-2023学年高二下学期期中生物试题
名校
6 . 土壤盐渍化影响水稻生长发育，将水稻耐盐碱基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育耐盐碱水稻新品种，其操作流程及可能用到的限制酶如图，其中bar为抗除草剂基因，Tetr为四环素抗性基因，Ampr为氨苄青霉素抗性基因，①~⑦表示操作过程。
(1)OsMYB56基因游离的磷酸基团侧为__________ （“5'”或“3'”）端，过程①PCR扩增OsMYB56基因时加入的酶催化__________ 键的形成，还需要添加引物，应选用引物组合__________ 。
①5'-CTTGGATGAT-3' ②5'-TAAGTTGTCT-3' ③5'-TAGTAGGTTC-3'
④5'-TCTGTTGAAT-3' ⑤5'-ATTCAACAGA-3' ⑥5'-ATCATCCAAG-3'
(2)根据基因表达载体的结构组成分析，Ti质粒中的CaMV35S是___________ ，其功能是___________ 。基因表达载体中，OsMYB56基因和bar基因编码链的方向___________ （填“相同”或“相反”）。
(3)过程③应选用限制酶__________ 切割质粒，利用所选限制酶进行操作的优势是__________ ，切割后需要用___________ 进行连接才能获得重组质粒。
(4)为了筛选出含重组质粒的受体细胞，④过程应在添加___________ 的选择培养基上培养。培养后获得的菌落不能判定是否含有重组质粒，原因是___________ 。
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | SmaⅠ | Sau3AⅠ |
识别位点及切割位点 | -G↓GATCC- | -T↓GATCA- | -CCC↓GGG- | -↓GATC- |
①5'-CTTGGATGAT-3' ②5'-TAAGTTGTCT-3' ③5'-TAGTAGGTTC-3'
④5'-TCTGTTGAAT-3' ⑤5'-ATTCAACAGA-3' ⑥5'-ATCATCCAAG-3'
(2)根据基因表达载体的结构组成分析，Ti质粒中的CaMV35S是
(3)过程③应选用限制酶
(4)为了筛选出含重组质粒的受体细胞，④过程应在添加
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2023-04-28更新
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762次组卷
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4卷引用：吉林省长春市东北师范大学附中2022-2023学年高二下学期期末生物试题
名校
7 . 红细胞生成素（EPO）是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然 EPO来源极为有限，某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO。下列有关叙述错误的是（ ）
| A．构建表达载体时需将EPO基因插入乳腺蛋白基因的启动子的上游 |
| B．一般情况下，该转基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺细胞中表达 |
| C．可用显微注射技术将含有EPO基因的表达载体导入羊的受精卵中 |
| D．用PCR扩增人EPO基因，需要一段已知的EPO基因核苷酸序列 |
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2023-04-24更新
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1131次组卷
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9卷引用：吉林省通化市梅河口市五中2022-2023学年高二下学期期末生物试题
名校
8 . 我国有大面积的沿海滩涂和盐碱地，利用生物技术培育出耐盐农作物，可以合理利用这些沿海滩涂和盐碱地，以此增大我国的人均可用耕地面积。如图表示构建基因表达载体所用到的外源DNA和质粒，其中箭头指向是限制酶识别的核苷酸序列所在位置。另外；BamH I、Sma I和Hind Ⅲ三种限制酶切割DNA时形成的末端均不同。请回答下列问题。
(1)获得的耐盐基因在细胞外进行扩增时，常采用的技术是____________ 。该技术用到的酶与普通的胞内酶相比，最大的特点是____________ 。
(2)构建该重组质粒时，图中不能使用的限制酶是____________ ，理由是________________________ 。
(3)重组表达载体除了含有目的基因和图中标出的结构外，还必须有____________ 、____________ ，其中后者具有____________ 酶识别和结合的位点。
(4)设计一个实验，从细胞水平上鉴定受体细胞内是否成功导入该重组质粒，请写出简要实验思路：__________
(1)获得的耐盐基因在细胞外进行扩增时，常采用的技术是
(2)构建该重组质粒时，图中不能使用的限制酶是
(3)重组表达载体除了含有目的基因和图中标出的结构外，还必须有
(4)设计一个实验，从细胞水平上鉴定受体细胞内是否成功导入该重组质粒，请写出简要实验思路：
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9 . 阅读资料1、资料2，回答下列问题。
【资料1】接种新冠疫苗可降低新冠患者出现重症的危险。我国科学家把腺病毒中负责复制的关键基因剪切掉，但保留其侵染人体细胞的能力。随后，将其与逆转录获得的新冠病毒S蛋白（介导新冠病毒感染细胞的关键成分）基因整合，构建出了两种病毒的融合型病毒——重组腺病毒DNA疫苗。
【资料2】新冠病毒核酸测序能够监测新变异毒株的出现，具体做法是：先提取新冠病毒RNA，利用RT-PCR技术（即将病毒RNA逆转录后再进行PCR扩增）获取目标DNA区域；随后进行DNA测序，通常采用双脱氧核苷酸测序法，其原理是：双脱氧核苷酸（ddNTP）的2'、3'碳原子都不含羟基，在DNA合成过程中不能形成磷酸二酯键，因此可以中断DNA分子合成反应。在四个单独的PCR反应体系中，分别额外掺入ddATP、ddTTP、ddGTP、ddCTP，使DNA复制随机终止，产生不同长度的DNA片段，然后进行凝胶电泳分离检测，从而分析获得目标DNA区域的碱基序列。
(1)资料1中，构建出两种病毒的融合型病毒这一步骤在基因工程中被称为__________ 。融合型病毒入侵人体细胞后，S蛋白基因在人体细胞内的遗传信息传递过程为___________ （用文字和箭头表示）。
(2)接种重组腺病毒DNA疫苗后，人体长时间内仍可检测到重组腺病毒DNA。请由此推测重组腺病毒DNA疫苗只需注射一针即可起到长期免疫保护作用的原因是___________ 。
(3)资料2，RT-PCR技术中使用的酶有__________ 。PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、__________ 三步，其中复性的结果是__________ 。
(4)下图为资料2中双脱氧核苷酸测序电泳结果，据此可分析出目标DNA区域X的碱基序列为__________ （按5'→3'方向书写）。
【资料1】接种新冠疫苗可降低新冠患者出现重症的危险。我国科学家把腺病毒中负责复制的关键基因剪切掉，但保留其侵染人体细胞的能力。随后，将其与逆转录获得的新冠病毒S蛋白（介导新冠病毒感染细胞的关键成分）基因整合，构建出了两种病毒的融合型病毒——重组腺病毒DNA疫苗。
【资料2】新冠病毒核酸测序能够监测新变异毒株的出现，具体做法是：先提取新冠病毒RNA，利用RT-PCR技术（即将病毒RNA逆转录后再进行PCR扩增）获取目标DNA区域；随后进行DNA测序，通常采用双脱氧核苷酸测序法，其原理是：双脱氧核苷酸（ddNTP）的2'、3'碳原子都不含羟基，在DNA合成过程中不能形成磷酸二酯键，因此可以中断DNA分子合成反应。在四个单独的PCR反应体系中，分别额外掺入ddATP、ddTTP、ddGTP、ddCTP，使DNA复制随机终止，产生不同长度的DNA片段，然后进行凝胶电泳分离检测，从而分析获得目标DNA区域的碱基序列。
(1)资料1中，构建出两种病毒的融合型病毒这一步骤在基因工程中被称为
(2)接种重组腺病毒DNA疫苗后，人体长时间内仍可检测到重组腺病毒DNA。请由此推测重组腺病毒DNA疫苗只需注射一针即可起到长期免疫保护作用的原因是
(3)资料2，RT-PCR技术中使用的酶有
(4)下图为资料2中双脱氧核苷酸测序电泳结果，据此可分析出目标DNA区域X的碱基序列为
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10 . 重组PCR技术是一项新的PCR技术，通过重组PCR技术能将两个不同的DNA连接成为一个新DNA分子。某科研小组从猪源大肠杆菌中扩增得到LTB和ST1两个基因片段，利用重组PCR技术构建了LTB—ST1融合基因，制备过程如下图所示。回答下列问题：
(1)利用PCR技术扩增目的基因的过程中，向反应体系中加入的物质除了引物和模板链﹐还需要加入________ 。
(2)从P2，P3两种引物的角度分析，LTB和ST1基因能够融合的关键是______ 。PCR1和PCR2不能在同一个反应体系中进行，原因是_______ 。②过程不需要加入引物，原因是________ 。
(3)科研小组为了检测是否成功构建出融合基因，将反应后体系中的各种DNA分子进行电泳，结果如图所示。则融合基因最可能是________ ，判断依据是________ 。
(1)利用PCR技术扩增目的基因的过程中，向反应体系中加入的物质除了引物和模板链﹐还需要加入
(2)从P2，P3两种引物的角度分析，LTB和ST1基因能够融合的关键是
(3)科研小组为了检测是否成功构建出融合基因，将反应后体系中的各种DNA分子进行电泳，结果如图所示。则融合基因最可能是
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2023-04-12更新
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295次组卷
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2卷引用：吉林省白山市2022-2023学年高三下学期4月期中理综试题
