1 . 双向启动子可同时结合两个 RNA聚合酶来驱动下游基因的表达，研究人员构建了下图所示的表达载体，以检测双向启动子作用效果。下列分析不正确的是（　　）

A．可用农杆菌转化法将构建好的表达载体导入植物细胞

B．为连入GUS 基因，需用SalI和SphI酶切已整合了双向启动子及LUC基因的质粒

C．在培养基中添加壮观霉素可筛选出成功导入表达载体的微生物受体细胞

D．可通过观察是否出现荧光和蓝色物质确认双向启动子的作用

2 . 大鼠早期胚胎可以利用细胞竞争机制“杀死”外来的人类干细胞，从而导致人—鼠嵌合胚胎的嵌合率低下。科学家拟通过以下途径获得具有人类胰腺的幼鼠，下列分析不合理的是（       ）

A．iPS细胞的分裂、分化能力可能与图中b区域的细胞相当

B．为获得更多的受精卵，可对雌鼠注射适量的促性腺激素

C．步骤①基因编辑的目的可能是破坏受精卵中与胰腺形成有关的基因

D．图中过程涉及转基因技术、动物细胞培养及核移植、胚胎移植等

3 . 多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸，为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1。培育转fat1基因猪，操作过程如图所示。图中GFP基因表达出绿色荧光蛋白。据图回答下列问题：

(1)用PCR技术在体外扩增目的基因时，PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、_________（至少答两点）等。
(2)从图中可知，在构建基因表达载体时，为克服目的基因自身环化（即线性DNA的末端相互连接，变圆环），以及便于目的基因与载体的连接，切割含目的基因的DNA和载体的限制酶应选用_________。
(3)构建的基因表达载体中，GFP基因的作用是_________。
(4)猪成纤维细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期_________，以防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为_________，操作时首先用_________等处理成细胞悬液。
(5)经检测，fat1基因成功整合在猪基因组DNA后，若想获得该转基因动物，需经过胚胎移植过程，该过程需对受体进行_________处理，移植胚胎后需要对受体进行是否妊娠的检查。

4 . 学习以下材料，回答（1）~（5）题。
黑色素干细胞的动态变化
毛发的生长周期包括生长期、退化期和休止期（毛发脱落），毛发的生长和更新由毛囊的变化所驱动，毛囊的结构如图。毛发呈现出黑色是由于黑色素干细胞（McSC）分化的成熟黑色素细胞产生真黑色素将毛发“染”成了黑色。在人类和大多数动物毛囊中，McSC的耗尽会导致毛发变白。
研究人员构建McSC带有红色荧光标记的模型小鼠，对毛囊持续观察，研究McSC的生命历程。发现在毛发的生长期初期，McSC在毛囊的毛基质区增殖后全部分化为TA细胞（一种中间状态的细胞，可快速增殖，然后分化为成熟的黑色素细胞）；生长期中后期，在毛基质区全部为成熟黑色素细胞，这些细胞会在生长期结束时死亡；在生长期中后期，隆起区出现McSC，并表现出增殖能力；退化期后期，McSC出现在隆起区下部，到休止期大多数McSC则定位到毛基质区并保持未分化状态。研究人员据此提出大胆假设，毛基质区的大部分TA细胞会随着毛囊的生长而分化，McSC数量的维持依赖于TA细胞的分化、这有别于以往对成体干细胞的认知。
进一步研究发现，WNT蛋白是McSC分化不可或缺的信号分子，缺乏WNT蛋白将使得成熟黑色素细胞生成不足。MeSC和TA细胞在隆起区和毛基质区的移动，使它们能够处于不同的WNT信号水平，从而可逆地走向分化或去分化。对黑毛小鼠进行反复拔毛以加速毛囊老化的实验中，检测到在第七个休止期的毛基质区有显著的McSC丢失，这些小鼠表现出毛发变灰。值得注意的是，老化的毛囊中许多McSC已经改变了位置，分散到隆起区，而不在毛基质区紧密聚集。隆起区的MeSC数量从拔毛前的10%增加到了50%。
小鼠毛发变白机制可能同样存在于人类，对此进行深入研究有望为实现白发变青丝提供依据。

(1)干细胞是动物或人体内保留的少数具有_________能力的细胞。成熟黑色素细胞由McSC转变而来，请从分子或细胞水平提出可以区分这两种细胞的检测思路_________（答出2条）。
(2)文中提到对McSC的认知“有别于以往对成体干细胞的认知”，是指McSC可来源于_________。
(3)根据文中信息，下列与WNT有关的推测合理的是________。

A．毛基质区WNT基因表达量在生长期高于休止期

B．隆起区WNT基因表达在生长期中后期被上调

C．持续激活隆起区WNT信号，会促进McSC分化

(4)根据文中研究成果提出有望使反复拔毛小鼠毛色扭转的思路。_________。

5 . 羊乳因其营养成分最接近人乳，且不含牛乳中的某些可致过敏的异性蛋白质而受到消费者的青睐，但市场上存在着用牛乳冒充羊乳欺骗消费者的现象。对此，研究人员开发制备了羊乳asl-酪蛋白单克隆抗体检测试剂盒。下图为制备asl-酪蛋白单克隆抗体的示意图，1～6代表相关过程，a～e代表相关细胞。据图回答下列问题：

(1)过程1是指将_________（填“asl-酪蛋白抗原”或“asl-酪蛋白抗体”）注入小鼠体内，一段时间后，取小鼠的脾脏组织剪碎后用_________酶处理使其分散成单个细胞，以获得相应的细胞。
(2)对于图中的细胞d，需用HAT选择培养基筛选出_________；过程3再对其进行_________和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的细胞e。
(3)在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径（途径一）是由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径，另一辅助途径（途径二）是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据这样的原理，向经诱导后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基嘌呤_________（填“能”或“不能”）筛选杂交瘤细胞。

6 . 如图是科学家通过不同方法培育优良种牛的过程，其中①～⑤表示操作过程。请回答以下问题：

(1)哺乳动物体内受精的场所是_________。图中①过程中防止多精入卵的两道屏障依次为_________、卵细胞膜反应。
(2)③过程是早期胚胎培养，胚胎发育到_________阶段，可做胚胎移植。
(3)图中c代表囊胚的_________，将来发育成胎儿的各种组织。
(4)图中由一个囊胚经④过程得到的B、C牛性别相同，可以取囊胚的_________细胞做DNA分析，鉴定性别。

7 . 某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下：
材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24h。
(1)将DNA的粗提取物溶于2mol/L的NaCl溶液中，加入_________试剂，在沸水浴条件下进行鉴定，结果如下表：

材料保存温度	花菜	辣椒	蒜黄
20℃	++	+	+++
-20℃	+++	++	++++

注：“+”越多表示蓝色越深。
(2)该探究性实验课题的名称可能是“探究不同材料和不同_________对DNA提取量的影响”。
(3)根据实验结果分析：
①结论1：与20℃相比，相同实验材料在－20℃条件下保存，DNA的提取量更_________（填“多”或“少”）。
结论2：等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从_________中提取的DNA量最多。
②针对结论1，请提出合理的解释：低温抑制了_________的活性，DNA降解速度减慢。

8 . 细胞a和细胞b经过细胞融合形成细胞d，如下图所示，下列说法正确的是（       ）

A．若d为杂交瘤细胞，则经选择培养基筛选后，可用于生产单克隆抗体

B．若d为动物细胞受精卵，则形成d的过程涉及细胞膜的选择透过性

C．若d形成无性杂种植株，则直接用PEG诱导a、b细胞融合为c

D．若d形成无性杂种植株，则其涉及的变异类型属于染色体变异

9 . 下图为动物细胞培养过程中细胞的增殖曲线。下列叙述错误的是（       ）

A．图中A点进行的是细胞的原代培养

B．B点无需使用胰蛋白酶处理细胞

C．B点到C点过程中进行了多次传代培养

D．D点以后的细胞具有无限增殖的特点

10 . 下列关于细胞学说的建立过程及内容的叙述正确的有几项（       ）
①细胞是一个有机体，一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成
②细胞学说揭示了细胞的多样性和生物体结构的统一性
③细胞学说完全由施莱登和施旺提出
④细胞学说认为细胞分为原核细胞和真核细胞
⑤列文虎克发现并命名了细胞
⑥细胞学说使人们对生命的认识由细胞水平进入到分子水平

A．一项

B．两项

C．三项

D．四项