1 . 某同学从植物中提取了W物质，并研究其抑菌效果。在平板中央处打孔后加入提取物W，测量抑菌圈的大小和计算抑菌圈平均增幅速率，实验方法和结果如图所示。据图分析下列说法正确的是（　　）

A．将一定量菌液与冷却后的灭菌培养基混匀并倒平板可得到实验菌平板

B．在平板上打孔的钢管需要灼烧灭菌，目的是防止微生物污染平板

C．抑菌圈直径的大小与菌体浓度、提取物W的浓度和预扩散时间密切相关

D．提取物W在培养基中扩散，加入提取物W后的2h可获得最佳抑菌效果

2 . 双层平板法是对噬菌体进行计数的常用方法。具体做法是：在无菌培养皿中倒入琼脂含量为2%的培养基凝固成底层平板后，将琼脂含量为1%的培养基熔化并冷却至 45~48℃，然后加入敏感指示菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板(见下图)。培养一段时间后，在双层培养基的上层会出现透亮的无菌圆形空斑——噬菌斑，下列有关说法正确的是（       ）

A．实验用到的培养基和培养皿常用干热法进行灭菌

B．若利用双层平板法对 T2噬菌体进行计数，可选用农杆菌作敏感指示菌

C．上层平板上出现的透亮无菌圆形空斑是噬菌体单独在培养基上繁殖形成的噬菌斑

D．倒上层平板时需将培养基冷却至45~48℃时进行接种，目的是防止培养基温度过高引起敏感指示菌和待测噬菌体死亡

3 . 田间常施用的草铵膦（含碳有机物）农药，在环境中难以降解。科学家通过图1所示方法筛选出了可降解草铵膦的植物乳杆菌（ST-3），并研究了固定态（固定在多孔载体上）和培养液中游离态的ST-3的降解效果，结果如图2所示。下列相关叙述错误的有（　　）

A．图1中②过程可使用无菌水，③④⑤过程应用以草铵膦为唯一碳源的培养基

B．图1中配制好的培养基可放入干热灭菌箱内进行灭菌处理

C．由图2可知，固定态ST-3对土壤中草铵膦的降解效果优于游离态ST-3

D．固定态ST-3降解率高可能是因为载体避免ST-3直接接触高浓度草铵膦

4 . 精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长。为获得精氨酸依赖型菌，将紫外线处理过的菌液接种并培养至菌落不再增加时，菌落如图甲所示，然后向图甲中的培养基添加某种物质后继续培养，获得图乙所示菌落。下列相关叙述正确的是（       ）

A．菌落A是精氨酸依赖型菌种

B．实验过程中用到的培养基和培养皿必须采用高压蒸汽灭菌法灭菌

C．从培养基乙中挑选所需菌落，用平板划线法接种可分离出单菌落

D．若用稀释涂布平板法将野生型菌液接种至完全培养基，估算出的菌落数可能高于实际的活菌数

5 . 大肠杆菌是水体中常见的微生物，经改造的大肠杆菌可用来检测制药厂排出的污水中某化合物X（一种遗传毒性杂质，可损伤细胞DNA，具有致癌可能）的含量。回答下列问题：

      

(1)对培养大肠杆菌的培养基需要___灭菌，为获得一个大肠杆菌繁殖获得的单菌落可以采用___接种方法。
(2)图1中甲、乙、丙、丁是从微生物中分离到的可被化合物X激活的4种毒性响应基因启动子（箭头表示转录方向）；图2质粒中SRR基因的表达产物可使大肠杆菌等细菌裂解。将4种启动子分别插入质粒的P区，以构建表达载体，导入大肠杆菌可获得对化合物X敏感的工程菌。
①图2质粒中的P区能被细胞中___酶识别并结合，以实现SRR基因的表达。
②为使4种启动子正确插入到质粒上，利用PCR技术扩增启动子时，需分别在4种启动子A端和B端添加限制酶___和___的酶切位点。
③为了将基因表达载体导入到受体细胞中，采用的方法是___。
(3)将获得的工程菌甲、乙、丙、丁和对照菌分别培养在细菌培养液中，2小时后在培养液中加入化合物X继续培养，检测细菌的密度，结果如图3所示。实验中的对照菌是___，检测细菌密度的方法有___（写两种），据图3可知，4种工程菌均启动了对化合物X的响应，判断的依据是___。

6 . 科研人员为筛选出能高效降解多环芳烃（PAHs，由C、H两种元素组成）的微生物，进行了相关实验，过程和结果如图所示。下列叙述错误的是（       ）

A．图1中过程①的选择培养过程中需加入葡萄糖作为能源物质

B．用过程②对微生物进行计数时所估算的数值比实际值偏低

C．配置好的培养基应放入高压蒸汽灭菌锅内进行灭菌

D．在降解PAHs方面，微生物L的能力更强

7 . 细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到如下图结果。下列分析不正确的是（　　）

A．实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行消毒处理

B．对上、下层菌计数时应采用稀释涂布平板法而不能用显微镜直接计数

C．由甲、乙、丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性

D．野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势

8 . 酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酵母菌菌株，进行了如图I所示实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，下列说法正确的是（       ）

   

A．传统葡萄酒发酵过程中，为避免污染发酵装置需严格灭菌

B．用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为6．8×106个/L，此数值可能高于实际的活菌数

C．对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，菌种接种过程中的试管口、瓶口等无需再灼烧灭菌

D．由图Ⅱ可知，丙可能是培养瓶密封不严导致，丁组酵母菌产酒精能力比乙强

10 . 粗饲料经过微生物（益生菌）发酵后，其富含的纤维素、半纤维素和果胶等物质被降解为小分子，易于被畜禽采食和消化吸收，用于饲料发酵的益生菌包括乳酸菌（乳酸菌产生的乳酸能溶解碳酸钙）和酵母菌等。生产发酵饲料的大致过程；将适量粗饲料、益生菌和清水等拌匀，放入发酵池或容器中，然后密封发酵。回答下列问题：
(1)粗饲料中富含的纤维素和半纤维素为乳酸菌和酵母菌的生长繁殖提供营养物质中的_______（填“碳源”或“氮源”）。在密封发酵过程中，有机物的种类会_______（填“增加”或“减少”）。
(2)发酵池应该留有排气口，防止______发酵产生大量气体导致爆炸。酵母菌和乳酸菌在发酵液中的位置不同，原因是______。
(3)为从发酵液中筛选出乳酸菌，把发酵液稀释后，接种到含______的不透明平板上进行培养观察，根据透明圈初步筛选出乳酸菌。下图为分离纯化得到的3株乳酸菌的生长曲线图，由图可知，在9h内，生长最快的乳酸菌是________。该实验需设计对照组，对照组的实验处理是_____；若在对照组中检测吸光度，吸光度会随时间发生变化，说明______。