1 . 双层平板法是对噬菌体进行计数的常用方法。具体做法是：在无菌培养皿中倒入琼脂含量为2%的培养基凝固成底层平板后，将琼脂含量为1%的培养基熔化并冷却至 45~48℃，然后加入敏感指示菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板(见下图)。培养一段时间后，在双层培养基的上层会出现透亮的无菌圆形空斑——噬菌斑，下列有关说法正确的是（       ）

A．实验用到的培养基和培养皿常用干热法进行灭菌

B．若利用双层平板法对 T2噬菌体进行计数，可选用农杆菌作敏感指示菌

C．上层平板上出现的透亮无菌圆形空斑是噬菌体单独在培养基上繁殖形成的噬菌斑

D．倒上层平板时需将培养基冷却至45~48℃时进行接种，目的是防止培养基温度过高引起敏感指示菌和待测噬菌体死亡

2 . 地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶，某研究小组欲从土壤中分离得到纤维素分解菌，如图甲所示；刚果红是一种染料，可与纤维素反应形成红色复合物，但不会与纤维素水解产物发生反应，利用该原理对分离出来的纤维素分解菌进行鉴定，鉴定结果如图乙所示。请回答相关问题：

(1)纤维素酶是一种复合酶，至少包括________三种组分，牛、羊等草食动物可以利用食物中的纤维素的原因是________。
(2)图甲筛选纤维素高效分解菌过程中，培养基的配制步骤包括计算、称量、________、灭菌、倒平板，倒平板所用的培养基常用的灭菌方法是________，图甲中分离纯化纤维素分解菌的方法是________。
(3)筛选纤维素高效分解菌常用刚果红染色法，原理是刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的________，若筛选得到了如图乙所示的菌落，则菌落________是纤维素高效分解菌株。

3 . 自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N₂的细菌，科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。以下叙述错误的是（       ）

A．为防止杂菌污染，实验中的锥形瓶和培养基需经灭菌处理才能使用

B．分离自生固氮菌步骤④采用的培养基应为不含N源的选择培养基

C．可以通过测定步骤⑤中培养液中含N量来检测固氮菌的固氮能力

D．若④中菌落数为120，则每克土壤中自生固氮菌的数量约为1.2×108个

5 . 黄曲霉毒素是由黄曲霉产生的代谢产物，具有极强的毒性和致癌性。科研人员用黄曲霉毒素B（AFB1）的结构类似物——豆香素（C₉H₆O₂）筛选出能高效降解AFB1的菌株，实验过程如下图中的①—④。已知菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解两种。对降解菌的培养液进行离心，发现上清液中AFB1的残留率明显低于菌悬液中的残留率。检测发现上清液中含有蛋白质K，为验证蛋白质K是降解AFB1的有效成分，进行了实验⑤：在A中加入水解蛋白质K的酶、B中加等量的蒸馏水，充分反应后在两试管中均加入等量的豆香素（C₉H₆O₂）。下列说法错误的是（　　）
   

A．1号培养基属于选择性培养基，通常需要提前在121℃下进行湿热灭菌

B．步骤③使用稀释涂布平板法，目的是筛选出能降解黄曲霉毒素的单菌落

C．实验⑤的结果是A试管中豆香素含量基本不变，B试管中豆香素含量减少

D．蛋白质K属于降解菌产生的胞外分泌物，可以分解培养液中的蛋白质

6 . 精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长。为获得精氨酸依赖型菌，将紫外线处理过的菌液接种并培养至菌落不再增加时，菌落如图甲所示，然后向图甲中的培养基添加某种物质后继续培养，获得图乙所示菌落。下列相关叙述正确的是（       ）

A．菌落A是精氨酸依赖型菌种

B．实验过程中用到的培养基和培养皿必须采用高压蒸汽灭菌法灭菌

C．从培养基乙中挑选所需菌落，用平板划线法接种可分离出单菌落

D．若用稀释涂布平板法将野生型菌液接种至完全培养基，估算出的菌落数可能高于实际的活菌数

7 . 某兴趣小组拟检测某品牌直饮水中的大肠杆菌数量是否超标，其部分实验流程如下图，已知步骤④培养后的大肠杆菌菌落数平均值为56个。下列相关叙述正确的是（       ）

A．实验前，微生物培养的器皿、接种工具、操作者的手等应进行灭菌

B．实验后，使用过的培养基及其培养物应直接放入垃圾桶丢弃

C．经计算推测每毫升直饮水中大肠杆菌的数量约为5.6×106个

D．用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数时，稀释度越低越好

8 . 为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员从土壤中筛选纤维素分解菌，并对其降解纤维素能力进行了研究。回答下列问题：

(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即_____________。为从土壤中筛选纤维素分解菌，配制的固体培养基中____________是唯一碳源；配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是 __________。
(2)在分离纯化过程中，土壤样品经梯度稀释后再涂布平板，原因是___________。如果分离纯化菌株不是纯培养物，除稀释涂布平板法之外，还可以采用_________法进一步分离纯化。
(3)在上述长出菌落的培养基上，覆盖质量浓度为1mg/mL的刚果红（CR）溶液，10－15min后，倒去CR溶液，加入物质的量浓度为1mol/L的NaCl溶液，15min后倒掉NaCl溶液，实验结果如下图。图中降解圈大小与纤维素酶的 _____________有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是____________，理由是_____________。

9 . 随着世界人口增长和肉类消费量的持续提高，细胞培养肉有望成为未来肉制品的来源之一，细胞培养肉的制造过程如下图所示。下列叙述错误的是（　　）
   

A．细胞培养肉制造时涉及的生物技术有细胞核移植技术

B．应定期向生物反应器中添加琼脂，同时清除代谢废物

C．干细胞被成功培养为肌细胞与基因的选择性表达有关

D．进行食品化加工时，应对生产器具进行部分消毒处理

10 . 链霉菌是一种异养需氧型的细菌， 为利用链霉菌生产药物 A，研究者构建重组 DNA 并导入链霉菌。重组 DNA 含启动子 P、药物 A 基因和 Neo 基因（卡那霉素抗性基因）。培养和筛选过程如下图所示。

下列叙述不正确的是（       ）

A．实验所用培养基需要先调 pH 再行高压蒸汽灭菌后才能使用

B．稀释后涂布时应用涂布器沾取少量菌液并均匀地涂布在培养基的表面

C．卡那霉素抗性强弱与药物A基因的表达量呈正相关

D．应选用培养基b 的菌株进一步鉴定以生产药物 A