25. 易错PCR是利用低保真的Taq酶和改变PCR的反应条件,降低DNA复制的准确性,在新DNA链的合成过程中增加碱基错配,从而使扩增产物出现较多点突变的一种体外诱导DNA序列变异的方法。从自然界中的生物体内分离得到的天然酶,在工业生产环境中催化效率往往较低。下图是研究人员利用易错PCR技术对某种天然酶进行改造,获得了高催化效率的酶的流程示意图。回答下列问题:
(1)在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
___。PCR反应体系中需添加引物,引物的作用是
___。
(2)图中步骤①为易错PCR过程,其扩增过程中需要加入Taq酶,这是因为Taq酶具有
___的特点。图中步骤②是将构建的重组质粒溶于缓冲液中与用
___处理的受体菌混合,在一定温度下完成转化。转化是指
___。
(3)Taq酶的某一区域负责将碱基与模板链正确地互补配对,Mn
2+可以降低这一功能;非互补的碱基对由于氢键不易形成,稳定性差,Mg
2+可以提高该错配区的稳定性。因此,与普通PCR相比,易错PCR的反应体系中应适当
___(填“提高”或“降低”)Mn
2+浓度、
___(填“提高”或“降低”)Mg
2+浓度。
(4)阐述通过易错PCR技术改造天然酶与通过蛋白质工程改造天然酶原理的本质区别
___。