1 . 油菜籽中有一种有机化合物L-5-乙基呃唑烷-硫酮（VOT），可诱发甲状腺疾病。研究发现反刍动物瘤胃中的部分细菌可以分解VOT，下图是研究人员从瘤胃提取物中分离VOT分解菌的流程。据图回答下列问题：

(1)为了判断培养基的制作是否合格，可以将接种瘤胃提取物的A培养基和一个___的B培养基都放在恒温箱中培养，分别观察并记录结果。若B培养基中长出了菌落，说明___。
(2)纯化菌种时，图乙所示的接种方法是___，利用图中所示的接种方法接种微生物时，需要将菌液进行一系列的梯度稀释，目的是___。
(3)甲为液体选择培养基，甲中的细菌比乙中的生长速度快，原因是___。
(4)在5个平板上各接种稀释倍数为10³的菌液样品0.1mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56，则每升原菌液样品中细菌数为___个。如果用显微镜直接计数法对细菌进行计数，所统计的细菌数通常会比该方法统计数目偏___，原因是___。

2 . 奶牛的瘤胃中有大量的尿素分解菌。现有科学小组利用屠宰场提取的奶牛瘤胃内容物，对其进行分离计数，过程如下图。请据图分析并回答下列相关问题：
      
(1)制备培养基，所使用的培养基按功能来分应为______________培养基。
(2)将5g内容物加入45mL无菌水制成稀释10倍的滤液，并继续进行梯度稀释。取不同浓度稀释液各0.1mL，用涂布平板法接种到培养基上，需在无氧条件下培养，原因是奶牛的瘤胃中有大量的尿素分解菌，其异化作用类型为______________。若在稀释倍数为10⁵的三个培养基中，菌落数分别是156、174、183，则每克内容物中尿素分解菌的数目为____________个。实际活菌值往往比这种方法统计的结果值______。原因是：____________。
(3)为进一步分离纯化尿素分解菌进行了A中的操作， 其采用___________法进行操作，由A图可得，在该操作过程中接种工具至少要灼烧_________次；其中第一次灼烧的目的是：_________。

3 . PBAT（含C、H、O元素）地膜属于可降解地膜，虽然在一定程度上可解决传统地膜造成的“白色污染”问题，但在实际应用过程中其降解效果并不理想。研究人员欲从土壤中筛选出PBAT高效降解菌株，为微生物降解PBAT地膜丰富微生物种质资源。回答下列问题：
(1)实验前，研究人员应在经常使用PBAT地膜的土壤中寻找目的菌株，同时需要制备筛选PBAT地膜降解菌培养基，其营养成分有___；配制时从培养基成分考虑，应以_____来实现培养基的选择培养作用。
(2)为了避免PBAT地膜上原有微生物对实验结果的影响，实验操作前需要对PBAT地膜材料进行灭菌处理，灭菌与消毒的区别是_______。
(3)为了证明所筛选的目的菌株具有降解能力，在恒温培养前，除了将接种有目的菌株的平板进行培养外，还需要_____，同时还可以说明无菌操作是否规范。在菌株降解能力的测定实验中，研究人员需要将温度、pH等环境控制在适宜范围内，原因是_____。
(4)研究人员还分别测定了PBAT地膜在六种菌株处理一段时间后的失重率【（膜片初始质量－膜片被降解后质量）÷膜片初始质量×100%】，如图所示。据图分析，PBAT地膜在____三株菌株处理下的失重率高于另外三株菌株，这说明______。

   
注：CK为对照组

4 . 腐乳是中国流传数千年的传统民间美食，通常分为青方、红方、糟方三大类。请结合相关知识回答下列问题：
(1)在制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的过程中全程需要氧气的是__________。毛霉能在豆腐块上生长，是因为豆腐能为其提供无机盐、_________________等营养物质。
(2)腐乳的发酵过程中能起到防腐作用的物质有__________________三类。现代工业生产腐乳，必须严格控制无菌条件，对豆腐灭菌宜采用的方法是______________。
(3)科学家研究了食盐用量对腐乳品质及发酵周期的影响，结果如下图：

由图可知，随食盐用量的增加，腐乳品质的综合评分总体上呈现________的趋势，选择食盐用量为________较为适宜。发酵周期与食盐的用量呈正相关，原因可能是______________。

5 . 大肠杆菌结构简单、繁殖速度快，是微生物学常见的实验材料，下图是某校生物兴趣小组开展微生物学实验时观察到的一些实验现象。请结合题中所给信息回答下列问题。

(1)上图所示的接种方法是____________，接种完成后共灼烧______次接种环。
(2)某同学从培养液中吸取部分样液，稀释后将0.1ml液体涂布在培养基上得到平均数如下：

稀释倍数	101	102	103	104	105	106
培养结果
计数（平均值）	难以计数	难以计数	难以计数	159	17	2

由图可知，适宜的稀释倍数是______，每毫升培养液中的大肠杆菌数是__________，这种计数方法得到的细菌数往往偏小的原因是______________。
(3)另一同学采用血球计数板计数，这种计数方法称为_____________，鉴定大肠杆菌可用在培养基中加入__________进行染色。

6 . 下图是果酒和果醋制作的实验流程和优质酵母菌种筛选过程图，据图回答下列问题：

(1)图1中的实验流程是____________。若接种时混入了醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将酒精转变成醋酸并说明理由___________。
(2)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是____________；一般对配制的培养液采用____________法灭菌。
(3)从酒精发酵初期到在酒精发酵旺盛期，容器中酵母菌与其他杂菌的数目变化规律是酵母菌增多，其他杂菌减少，原因是__________。
(4)为了提高果酒的品质和节约生产成本，厂家尝试使用海藻酸钠做____________包埋酵母细胞，这种技术叫做____________。为提高果汁的出汁率及使果汁变得澄清，在果汁生产中常用到____________酶。

7 . 日前微博传言手机细菌比马桶多。如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题：

(1)该实验需制备___________（填“固体”或“液体”）培养基。在液体培养基中加入________可配制成固体培养基。
(2)据图，两电视台均采用__________法接种，接种前需要采用___________法对培养基进行灭菌，以杀死培养皿、培养基中的所有微生物，包括_____________。
(3)通过观察菌落的______________（至少写两个）以初步鉴定手机屏幕和马桶按钮上的生物类群。两电台实验操作均正确，但报道结果截然不同，你认为原因是：_____________________________。
(4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0．1mL稀释倍数为100的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为98、100、102，则该手机屏幕的细菌数为_____________个/平方厘米。该实验对照组要取培养基涂布_____________进行培养。

8 . 测定水样是否符合饮用水的卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的总数。大肠杆菌在含有伊红美蓝的固体培养基(EMB培养基)上长出的菌落星黑色。如图所示；滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到EMB培养基止培养→统计菌落数目。据图回答问题。

(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要经过灭菌处理的是___________。与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行。
(2)待测水样过滤完之后，还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上的操作为_________________________________。
(3)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的___________操作。从功能上看，EMB培养基属于___________培养基。
(4)无菌操作下将90ml无菌水加入到10ml待测水样中，这样就将待测水样稀释了___________倍，将稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数为45，黑色菌落为5，则1升待测水样中的大肠杆菌数目为___________个。
(5)若要测定待测水样中酵母菌的数目，应更换上述过滤装置中的滤膜，选择孔径___________(填“更大”或“更小”)的滤膜。

9 . 牛奶富含矿物质和满足人体生长发育所需的全部氨基酸，消化率高达98%。长期饮用牛奶有利于增强体质，但牛奶也是多种病菌的传播载体。下图是牛奶消毒及细菌检测实验的过程图。请回答下列相关问题：

(1)培养基中的蛋白胨为细菌的生长提供的营养物质主要有___________________(填两个），对培养基常采用___________________法进行灭菌。
(2)步骤①称为________________消毒法，步骤②是_______________。
(3)步骤③的接种方法是_____________。微生物培养过程中，为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿_______________培养。
(4)将接种后的培养基放入________ 中培养，36h后取出，统计3个平板上的菌落数分别是87、83和85。经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是______________个/mL。

10 . 炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。
(一)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。
(二)细菌鉴定：实验流程如下图所示

(1)对配制的液体培养基需采取______________方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为____________(填“无机碳”或“有机碳”)。在提供主要营养物质的基础上，培养基还需要满足炭疽杆菌生长对_____、____以及特殊营养物质的要求。
(2)挑选可疑菌落制片后，用___________观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。
(3)接种可疑菌后，35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是_______________，对照组试管中应加入_______________，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的_______比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。
(4)对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有___________、_________。