1 . 高压蒸汽条件下持续20分钟会杀死芽孢，因此无菌操作中可利用非致病性的嗜热脂肪杆菌的芽孢作为指示菌来测定灭菌的效果。灭菌结束后在塑料瓶外挤破含有培养液的安瓿瓶，使嗜热脂肪杆菌菌片浸没在紫色培养液内并进行培养，如下图所示。若芽孢可以生长会使培养液变为黄色。下列叙述正确的是（　　）

A．嗜热脂肪杆菌的芽孢耐热性强，高压蒸汽灭菌不能杀死它

B．灭菌后挤破安瓿瓶，一段时间后培养液呈紫色说明灭菌彻底

C．含有嗜热脂肪杆菌菌片的培养液从功能上属于选择培养基

D．设置不灭菌的对照组，挤破安瓿瓶颜色不变说明结果可信

2 . 东北酸菜是白菜经腌制而成的传统食品。发酵过程中若霉菌等微生物大量繁殖会导致酸菜腐败发臭。研究人员从酸菜中分离出具有抑菌活性的乳酸菌，该类乳酸菌因能分泌新型细菌素（多肽）而具有抑菌活性。为获得细菌素表达量更高的工程菌用于生产，进行了相关研究。回答下列问题。
(1)乳酸菌产生的乳酸能溶解碳酸钙而产生溶钙圈。研究人员为从市售多个品牌的酸菜中分离纯化乳酸菌，配制含有碳酸钙的固体培养基，利用_____法对该培养基进行灭菌，并采用_____法将酸菜液接种到培养基中，选择有溶钙圈的菌落并继续进行纯培养。
(2)通过上述方法筛选得到6种乳酸菌，测得它们对霉菌的抑菌率如下表，应选择乳酸菌编号为_____的菌株进行后续操作。

乳酸菌编号	Ll	L2	L3	L4	L5	L6
抑菌率/%	28．57	19．48	58．44	14．28	6．49	36．36

(3)研究人员从上述乳酸菌中提取细菌素基因，将其导入受体菌，再对受体菌做进一步的检测与鉴定。下面是细菌素基因及构建的基因表达载体的示意图。

①利用PCR技术扩增细菌素基因时，应选择的一对引物是_____。PCR过程中，经过4轮循环，消耗引物的个数是_____。
②若以细菌素基因甲链为转录的模板链，为构建基因表达载体，应在与甲链结合的引物的5＇端加入_____（填“BamH I”或“Nde I”）的识别序列。
③转化操作后提取受体细胞中的DNA，并利用选择的引物进行扩增，再对扩增产物进行电泳检测，结果如下图。

1：DNA标准样 2：普通受体菌的DNA 3：转化操作后受体菌的DNA 4：无菌水

设置4号的目的是_____（答出1点即可），电泳结果表明_____。

4 . 为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。请回答以下相关问题：
   
(1)各种培养基的配方不同，但一般都含有____________等营养物质，配制好的培养基通常使用_______________法灭菌。步骤③与步骤②中培养基成分相比，最大的区别是________。与步骤③培养基相比，步骤④加入了_____________凝固剂。
(2)进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示，该接种方法是__________，出现图B结果可能的操作失误是_______________。
(3)对步骤⑤中某瓶细菌计数的方法有两种，一种方法统计出的菌落数可代表活菌数；另一种方法是______________，该方法需要借助血细胞计数板，但此法得出的结果会偏高，原因是_______________。
(4)步骤⑤后取样测定石油含量的目的是__________。步骤⑤需要振荡培养，原因是_________（答两点）。

5 . 微生物的培养在生物科学史和现代生物工程中都是极其重要的基础技术。下图1是某学生重复艾弗里证明DNA是遗传物质实验的其中一组实验；下图2是基因工程中运用影印法将培养基A上的菌落按原来方向印在培养基B上，以检测重组质粒是否导入大肠杆菌的示意图，请据图回答下列问题。

（1）图1、图2的培养结果显示，两实验中使用的都是__________（填物理状态）培养基。
（2）在配制图2中的培养基时。除考虑营养、pH、渗透压等条件外还要考虑在培养基A和B中加入______（填“相同”或“不同）种类的抗生素。在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项不需要的是______（填序号）。①酒精灯   ②接种环     ③高压蒸汽灭菌锅     ④培养皿
（3）培养基灭菌是避免杂菌污染的有效途径之一。适用于图1、图2所示培养基的灭菌方法是_________；接种前还需检测灭菌效果。方法是将____________________置于恒温箱中，在适宜温度下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。
（4）实验证明，上述两项实验中R型菌和大肠杆菌的转化率都很低。为获得图1、图2所示的培养结果，一是要设法提高图1中S型菌的_________________ ；二是要使用恰当的方法接种。两实验都不能用平板划线法和稀释涂布平板法接种，而应采用不加稀释的涂布平板法接种R型菌和大肠杆菌，理由是_______ 。接种培养4天后，可通过观察______的形态特征来识别R型菌和大肠杆菌。

6 . 为了调查长春自来水的质量情况，某研究小组对自来水水样中的细菌含量进行了测定，请回答下列问题：
（1）在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是__________________。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿_______培养。
（2）若小组采用平板划线法分离水样中的细菌，在培养基上共画了5个区域，则共需要_____次灼烧接种环。该培养基从物理状态上看，属于_________培养基。
（3）可通过滤膜法检测自来水中大肠杆菌的数量，将已知体积的水过滤后，将滤膜放在______________________________________________培养基上培养。该培养基除了为大肠杆菌的生长繁殖提供水和碳源外，还应提供___________________________等基本营养成分。
（4）若小组采用稀释涂布平板法统计菌落数目，统计的菌落数往往比活菌的实际数目_______，如果接种后一个平板经培养后的菌落分布如下图所示，推测接种时可能的操作失误是______________________。

7 . 幽门螺杆菌简称Hp，主要寄生在胃幽门、胃窦等附近的黏膜上，是人类至21世纪初唯一的已知胃部细菌。 Hp可产生高活性的尿素酶。
（1）制备幽门螺杆菌培养基时，需将培养基的pH调至___性。 培养皿进行灭菌的常用方法是_________。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是_______________________。
（2）图①表示的是用_________________法接种培养后得到的结 果。图②是在纯化过程中通过_______法分离培养的结果，在培养基上接种时接种环需通过灼烧灭菌，完成图中划线操作，至少需要灼烧接种环____次。

（3）为检测某人体内是否感染了Hp，可让其服用¹⁴C标记的____，定时收集呼出的气体，通过分析呼气中¹⁴C标记的CO₂的含量即可判断。该检测方法和卡尔文研究光合作用的方法一样可称为_______法。