1 . 在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：
（1）在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具________（填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是________。
（3）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能________，在照射前，适量喷洒_________，可强化消毒效果。
（4）水厂供应的自来水通常是经过________（填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。
（5）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是__________________________。

2 . 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。下列关于培养基的叙述错误的是（       ）

A．制作固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂	B．培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素
C．培养霉菌时需要将培养基调至碱性	D．对培养基进行灭菌可以采用湿热灭菌

5 . 啤酒是以大麦为主要原料，添加啤酒花（一种草本植物），经酵母菌发酵制成的。其工业化生产的主要流程为：

回答下列问题：
(1)利用_________处理大麦，可以使大麦种子无须发芽就可以产生淀粉酶。加啤酒花后煮沸的目的是_________。
(2)流程图中步骤“A”的操作为_________，充氧气的作用是_________。发酵的最适条件应为__________。
(3)77℃保温30分钟处理类似于巴氏消毒法，该操作既可以杀死啤酒中的微生物，还可以_________。
(4)若要进一步研究淀粉酶的特性，需从发芽大麦种子中提取和分离淀粉酶，主要步骤是原料处理→___________→纯化→纯度鉴定。鉴定淀粉酶纯度的方法常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，凝胶中加入SDS的作用是__________，同时SDS所带的大量负电荷大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，从而可以使测定的结果只是单条肽链的分子量且电泳迁移率完全取决于分子量的大小。

7 . 牛奶中富含多种营养物质，但牛奶也是多种病原体的传播载体，比如牛奶中可能存在金黄色葡萄球菌，该菌是一种高度耐盐的兼性厌氧微生物，可引起人类肺炎和肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌，操作流程如图所示。下列说法错误的是（　　）

   

A．配制好的肉汤培养基应采用湿热灭菌法进行灭菌

B．振荡培养有利于微生物的生长繁殖

C．在血平板上的接种方法是稀释涂布平板法

D．用7.5%NaCl进行培养可增加金黄色葡萄球菌的数量

8 . 油菜籽中有一种有机化合物L-5-乙基呃唑烷-硫酮（VOT），可诱发甲状腺疾病。研究发现反刍动物瘤胃中的部分细菌可以分解VOT，下图是研究人员从瘤胃提取物中分离VOT分解菌的流程。据图回答下列问题：

(1)为了判断培养基的制作是否合格，可以将接种瘤胃提取物的A培养基和一个___的B培养基都放在恒温箱中培养，分别观察并记录结果。若B培养基中长出了菌落，说明___。
(2)纯化菌种时，图乙所示的接种方法是___，利用图中所示的接种方法接种微生物时，需要将菌液进行一系列的梯度稀释，目的是___。
(3)甲为液体选择培养基，甲中的细菌比乙中的生长速度快，原因是___。
(4)在5个平板上各接种稀释倍数为10³的菌液样品0.1mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56，则每升原菌液样品中细菌数为___个。如果用显微镜直接计数法对细菌进行计数，所统计的细菌数通常会比该方法统计数目偏___，原因是___。

9 . 地膜的主要成分是聚乙烯，化学式是（C₂H₃）_n。残留在土壤中的地膜难以被降解，为筛选出高效降解地膜的细菌，研究人员进行了如图所示操作。下列说法正确的是（       ）

A．覆盖地膜的土壤在富集培养前需要进行湿热灭菌处理

B．X培养基以聚乙烯为唯一碳源，属于选择培养基

C．降解地膜最高效的是细菌①，可挑选①中的菌种接种到Y培养基上

D．Y培养基属于固体培养基，其pH一般调至中性或弱酸性

10 . 大丽轮枝菌（一种丝状真菌）是引起棉花黄萎病的主要病原菌。为观察大丽轮枝菌对棉花根的侵染路径，研究人员利用绿色荧光蛋白基因（sGFP）转染大丽轮枝菌，培育出表达绿色荧光蛋白的转基因菌株，主要过程如下（图中a链和b链分别是相应基因转录模板链）。分析回答下列问题：

(1)过程①中，PCR扩增sGFP的原理是______________，该过程除需要根据______________设计特异性引物序列外，为保证sCFP正确插入质粒中，还需要在引物的5'端添加限制酶识别序列，图中b链的黏性末端碱基序列（5'→3'）为______________。
(2)过程②需要的工具酶是_______________。研究中将sGFP插入构巢曲霉启动子和终止子之间的目的是______________。
(3)过程③中需要配制细菌培养基，配制时要在培养基灭菌并冷却到80℃左右后，再加入潮霉素溶液，潮霉素不能与培养基一同灭菌的原因是______________。
(4)选择过程③筛选培养得到的不同农杆菌菌落，分别提取细菌质粒DNA，并用BamHI和HindⅢ完全酶切，可以得到______________种长度不同的DNA片段。
(5)将导入重组质粒的农杆菌加入大丽轮枝菌的孢子细胞悬液中，在适宜条件下完成转染后利用滤膜过滤得到孢子细胞，再在真菌培养基上培养获得菌落，最终通过检测_________________筛选出绿色荧光蛋白旺盛表达的大丽轮枝菌。