解题方法
1 . 下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。
(1)若根据用途划分，该培养基属于____ （填选择或鉴别）培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分中应将蛋白胨改成____ ，并用____ 作为指示剂。
(2)在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行____ ；操作者的双手需要进行清洗和____ 。
(3)图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是____ 和____ ，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的____ 。图1所用的接种方法可用来对活菌进行计数。
成分 | 蛋白胨 | 乳糖 | 蔗糖 | K2HPO4 | 指示剂 | 琼脂 |
含量（g） | 10.0 | 5.0 | 5.0 | 2.0 | 0.2 | 12.0 |
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL | ||||||
(1)若根据用途划分，该培养基属于
(2)在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行
(3)图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是
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解题方法
2 . 在过去半个多世纪里，陆地生物是新抗生素的主要来源。随着研究的不断深入，从陆地生物中发现新的抗生素的机会将大大减少。海洋生物是巨大的潜在药物资源，具有广阔的开发应用前景。科学家采用分离纯化技术获得一株具有一定抑菌活性的海洋真菌S9，并对该菌株的抑菌性能进行初步鉴定。通过对该菌的一些基本特性、培养条件进行初步研究，以期获得具有较高抗菌活性的物质。回答下列问题：
(1)为探究S9的最适培养条件，科学家设置了多种实验条件（如表1所示），其中A为碳源（质量浓度为5g·L-1）、B为氮源（蛋白胨，g·L-1）、C为pH、D为培养时间（d），以培养液中的蛋白质（该真菌的次生代谢产物）含量相对值（K）为检测标准进行培养。然后分别以A、B、C、D为自变量设置甲、乙、丙、丁实验，每组实验又设置I、Ⅱ、Ⅲ3个实验组，实验结果如表2所示。由图可知，当碳源为__________ 、氮源质量浓度为__________ g·L-1、pH和培养时间分别为__________ 和__________ 时，更有利于S9次生代谢产物的产生。
实验条件
表1
表2
(2)为探究S9的次生代谢产物具有的抗菌作用、科学家把离心后的真菌培养液加入察氏培养基，待凝固后，将稀释后的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白念珠菌接种于平板上，于25℃条件下培养48h，结果如表3所示。
表3
①培养基一般使用____________ 法进行灭菌。表3中大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白念珠菌的接种方法是_________________ 。
②由表3得出的实验结论是______________________ 。
(1)为探究S9的最适培养条件，科学家设置了多种实验条件（如表1所示），其中A为碳源（质量浓度为5g·L-1）、B为氮源（蛋白胨，g·L-1）、C为pH、D为培养时间（d），以培养液中的蛋白质（该真菌的次生代谢产物）含量相对值（K）为检测标准进行培养。然后分别以A、B、C、D为自变量设置甲、乙、丙、丁实验，每组实验又设置I、Ⅱ、Ⅲ3个实验组，实验结果如表2所示。由图可知，当碳源为
实验条件
表1
水平 | A | B | C | D |
1 | 葡萄糖 | 1.25 | 5.0 | 8 |
2 | 乳糖 | 1.50 | 6.5 | 10 |
3 | 蔗糖 | 1.75 | 8.0 | 12 |
组别 | 甲 | 乙 | 丙 | 丁 |
变量 | A | B | C | D |
Ⅰ | 1 | 1 | 1 | 1 |
Ⅱ | 2 | 2 | 2 | 2 |
Ⅲ | 3 | 3 | 3 | 3 |
K1 | 0.58 | 0.59 | 0.62 | 0.60 |
K2 | 0.63 | 0.66 | 0.63 | 0.70 |
K3 | 0.67 | 0.62 | 0.61 | 0.57 |
(2)为探究S9的次生代谢产物具有的抗菌作用、科学家把离心后的真菌培养液加入察氏培养基，待凝固后，将稀释后的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白念珠菌接种于平板上，于25℃条件下培养48h，结果如表3所示。
表3
大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | 白念珠菌 | |
察氏培养基（含离心真菌培养液） |
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察氏培养基（不含离心真菌培养液） |
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②由表3得出的实验结论是
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2024-01-26更新
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60次组卷
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2卷引用：四川省部分学校2023-2024学年高三1月期末联考理综生物试题
3 . 为保障粮食安全，我国科研人员以富含纤维素的农业残渣（秸秆）为原料，利用基因工程改造面包酵母使其表面携带相关酶，可同时高效生产人工淀粉和单细胞蛋白。部分生产工艺如下图，下列叙述正确的是（ ）
| A．面包酵母的增殖能促进纤维二糖水解及淀粉合成 |
| B．生产单细胞蛋白时选择26℃、pH5.5的条件为宜 |
| C．本生产过程最宜在不加通气和搅拌的啤酒发酵罐中进行 |
| D．生产前培养基高压蒸汽灭菌的条件可为121℃、20min |
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2024-01-22更新
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1412次组卷
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7卷引用：2024年1月吉林黑龙江普通高等学校招生全国统一考试适应性测试（九省联考）生物试题
解题方法
4 . 某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。
请分析回答问题：
(1)培养基中加入化合物A目的是筛选“目的菌”，这种培养基属于_______ 培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_______ ，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是_______ 。
(3)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量_______ 的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量_______ 。
(4)转为固体培养时，常采用_______ 的方法接种，获得单个菌落后继续筛选。
(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行_______ 处理后，才能倒掉。
请分析回答问题：
(1)培养基中加入化合物A目的是筛选“目的菌”，这种培养基属于
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的
(3)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量
(4)转为固体培养时，常采用
(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行
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解题方法
5 . 纤维素是由葡萄糖组成的大分子多糖，是植物细胞壁的主要成分。农作物秸杆的再利用可用纤维素分解菌把纤维素分解，为工业酿酒、饲料生产提供了广阔的前景。科研工作者从土壤中提取分离出高效分解纤维素细菌的流程，如下图所示。回答下列问题。
(1)纤维素分解菌之所以能够分解纤维素，是因为它含有纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，其中_____________ 能把纤维素分解成纤维二糖。
(2)在提取分离过程中，对吸管、培养皿通常采用_________ 法进行灭菌，灭菌是指________________ 。
(3)过程③所采用的接种方法是_______ ，培养基乙在培养基甲的基础上通常要加入_______________ 。
(4)过程④为挑单菌落进行接种，在挑选菌落时应挑选透明圈直径与菌落直径的比值最大的菌落，原因是_______________________________________ 。
(1)纤维素分解菌之所以能够分解纤维素，是因为它含有纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，其中
(2)在提取分离过程中，对吸管、培养皿通常采用
(3)过程③所采用的接种方法是
(4)过程④为挑单菌落进行接种，在挑选菌落时应挑选透明圈直径与菌落直径的比值最大的菌落，原因是
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解题方法
6 . 啤酒是世界上消耗量第三的饮品。啤酒的制作过程如图1所示。研究人员探究氯化钙对啤酒发酵的影响，结果如图2所示。下列相关叙述正确的是（ ）
| A．糖化是让麦芽糖分解形成糖浆，煮沸是使酶失活及对糖浆灭菌 |
B．发酵温度应控制在30℃，发酵原理为 |
| C．由图2可知，随着氯化钙浓度的增加，发酵液中酒精体积分数基本不受影响 |
| D．在15~20d期间，各种氯化钙浓度下的酒精体积分数均不再增加的原因基本相同 |
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解题方法
7 . 日常生活中产生的厨余垃圾含有大量有机物，极易腐败发酸发臭、滋生有害生物，若收集转运过程中发生泄漏则会污染空气、土壤及水源。科研人员从绿色木霉中获得了纤维素内切葡聚糖酶基因EGⅢ，并将其导入毕赤酵母中，构建出了基因工程菌（流程如图所示），实现了高效降解厨余垃圾中纤维素的目的。请据图回答下列问题。
注：图中BamHⅠ、ECoRⅠ、SalⅠ为限制酶
(1)限制酶能够识别__________ ，并且使每一条链中特定部位的__________ 断开。为了构建基因表达载体，应该选择__________ （限制酶）切割目的基因和质粒DNA，判断的依据是__________ 。完整的基因表达载体包括__________ 。
(2)将目的基因导入大肠杆菌后，需在培养基上培养，培养基需用__________ 法进行灭菌，培养皿用__________ 法进行灭菌。
(3)毕赤酵母能够表达出纤维素内切葡聚糖酶，转化才算成功，请设计实验检验转化是否成功__________ 。
注：图中BamHⅠ、ECoRⅠ、SalⅠ为限制酶
(1)限制酶能够识别
(2)将目的基因导入大肠杆菌后，需在培养基上培养，培养基需用
(3)毕赤酵母能够表达出纤维素内切葡聚糖酶，转化才算成功，请设计实验检验转化是否成功
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名校
解题方法
8 . 某兴趣小组为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，将每道菜分为3 盘，一盘取样冷藏，一盘使用公筷，一盘不用公筷，实验过程如下图。下列相关操作或叙述正确的是（ ）
| A．将细菌接种在固体培养基 X上可采用平板划线法 |
| B．根据菌落的特征可以准确判断细菌的种类 |
| C．配制的培养基需经湿热灭菌后调整pH，冷却后倒平板 |
| D．固体培养基 X 对菜品中的细菌没有选择性 |
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2024-02-26更新
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1076次组卷
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4卷引用：2024届广东省梅州市高三一模生物试题
名校
解题方法
9 . 牛奶是适合微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要用巴氏消毒法消毒，以杀死有害微生物。某小组为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行了如图所示操作。请据图回答：
(1)图1所示方法为___ ，若取最终的牛奶稀释液0.1mL在培养基上进行涂布，应选择的工具是图2中的___ （填图2中的字母）。
(2)理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65、63、64，则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为___ 个。
(3)接种操作完成后，需将平板倒置放入培养箱中培养，如果培养基上出现___ （填菌落特征，答出两点即可）不同的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
(4)用平板划线法纯化菌种时，在固体培养基上连续进行了4次划线，则需要对接种环灼烧___ 次。其中第二次灼烧接种环
目的是___ 。
(5)某同学在学习了传统发酵技术的应用后，进行了酸奶制作的实践，将高温加热过的牛奶冷却后倒入已灭菌的发酵瓶中，加入菌种后需将瓶盖拧紧的目的是___ 。
(1)图1所示方法为
(2)理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65、63、64，则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为
(3)接种操作完成后，需将平板倒置放入培养箱中培养，如果培养基上出现
(4)用平板划线法纯化菌种时，在固体培养基上连续进行了4次划线，则需要对接种环灼烧
目的是(5)某同学在学习了传统发酵技术的应用后，进行了酸奶制作的实践，将高温加热过的牛奶冷却后倒入已灭菌的发酵瓶中，加入菌种后需将瓶盖拧紧的目的是
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2023-11-10更新
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231次组卷
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2卷引用：广东省汕头市潮阳实验学校2023-2024学年高三上学期期中生物试题
10 . 大肠杆菌是水体中常见的微生物，经改造的大肠杆菌可用来检测制药厂排出的污水中某化合物X（一种遗传毒性杂质，可损伤细胞DNA，具有致癌可能）的含量。回答下列问题：___ 灭菌，为获得一个大肠杆菌繁殖获得的单菌落可以采用___ 接种方法。
(2)图1中甲、乙、丙、丁是从微生物中分离到的可被化合物X激活的4种毒性响应基因启动子（箭头表示转录方向）；图2质粒中SRR基因的表达产物可使大肠杆菌等细菌裂解。将4种启动子分别插入质粒的P区，以构建表达载体，导入大肠杆菌可获得对化合物X敏感的工程菌。
①图2质粒中的P区能被细胞中___ 酶识别并结合，以实现SRR基因的表达。
②为使4种启动子正确插入到质粒上，利用PCR技术扩增启动子时，需分别在4种启动子A端和B端添加限制酶___ 和___ 的酶切位点。
③为了将基因表达载体导入到受体细胞中，采用的方法是___ 。
(3)将获得的工程菌甲、乙、丙、丁和对照菌分别培养在细菌培养液中，2小时后在培养液中加入化合物X继续培养，检测细菌的密度，结果如图3所示。实验中的对照菌是___ ，检测细菌密度的方法有___ （写两种），据图3可知，4种工程菌均启动了对化合物X的响应，判断的依据是___ 。
(2)图1中甲、乙、丙、丁是从微生物中分离到的可被化合物X激活的4种毒性响应基因启动子（箭头表示转录方向）；图2质粒中SRR基因的表达产物可使大肠杆菌等细菌裂解。将4种启动子分别插入质粒的P区，以构建表达载体，导入大肠杆菌可获得对化合物X敏感的工程菌。
①图2质粒中的P区能被细胞中
②为使4种启动子正确插入到质粒上，利用PCR技术扩增启动子时，需分别在4种启动子A端和B端添加限制酶
③为了将基因表达载体导入到受体细胞中，采用的方法是
(3)将获得的工程菌甲、乙、丙、丁和对照菌分别培养在细菌培养液中，2小时后在培养液中加入化合物X继续培养，检测细菌的密度，结果如图3所示。实验中的对照菌是
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134次组卷
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2卷引用：湖南省邵阳市双清区昭陵实验学校等多校联考2024届高三上学期11月月考生物试题
