2 . 为保障粮食安全，我国科研人员以富含纤维素的农业残渣（秸秆）为原料，利用基因工程改造面包酵母使其表面携带相关酶，可同时高效生产人工淀粉和单细胞蛋白。部分生产工艺如下图，下列叙述正确的是（       ）

注：酵母增殖的适宜温度为28~32℃，适宜pH为4.0~5.0；酵母发酵的适宜温度为24~35℃，适宜pH为5.0~5.8

A．面包酵母的增殖能促进纤维二糖水解及淀粉合成

B．生产单细胞蛋白时选择26℃、pH5.5的条件为宜

C．本生产过程最宜在不加通气和搅拌的啤酒发酵罐中进行

D．生产前培养基高压蒸汽灭菌的条件可为121℃、20min

4 . 在过去半个多世纪里，陆地生物是新抗生素的主要来源。随着研究的不断深入，从陆地生物中发现新的抗生素的机会将大大减少。海洋生物是巨大的潜在药物资源，具有广阔的开发应用前景。科学家采用分离纯化技术获得一株具有一定抑菌活性的海洋真菌S9，并对该菌株的抑菌性能进行初步鉴定。通过对该菌的一些基本特性、培养条件进行初步研究，以期获得具有较高抗菌活性的物质。回答下列问题：
(1)为探究S9的最适培养条件，科学家设置了多种实验条件（如表1所示），其中A为碳源（质量浓度为5g·L^-1）、B为氮源（蛋白胨，g·L^-1）、C为pH、D为培养时间（d），以培养液中的蛋白质（该真菌的次生代谢产物）含量相对值（K）为检测标准进行培养。然后分别以A、B、C、D为自变量设置甲、乙、丙、丁实验，每组实验又设置I、Ⅱ、Ⅲ3个实验组，实验结果如表2所示。由图可知，当碳源为__________、氮源质量浓度为__________ g·L^-1、pH和培养时间分别为__________和__________时，更有利于S9次生代谢产物的产生。
实验条件
表1

水平	A	B	C	D
1	葡萄糖	1.25	5.0	8
2	乳糖	1.50	6.5	10
3	蔗糖	1.75	8.0	12

表2

组别	甲	乙	丙	丁
变量	A	B	C	D
Ⅰ	1	1	1	1
Ⅱ	2	2	2	2
Ⅲ	3	3	3	3
K1	0.58	0.59	0.62	0.60
K2	0.63	0.66	0.63	0.70
K3	0.67	0.62	0.61	0.57

(2)为探究S9的次生代谢产物具有的抗菌作用、科学家把离心后的真菌培养液加入察氏培养基，待凝固后，将稀释后的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白念珠菌接种于平板上，于25℃条件下培养48h，结果如表3所示。
表3

	大肠杆菌	金黄色葡萄球菌	白念珠菌
察氏培养基（含离心真菌培养液）
察氏培养基（不含离心真菌培养液）

①培养基一般使用____________法进行灭菌。表3中大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白念珠菌的接种方法是_________________。
②由表3得出的实验结论是______________________。

7 . 啤酒是世界上消耗量第三的饮品。啤酒的制作过程如图1所示。研究人员探究氯化钙对啤酒发酵的影响，结果如图2所示。下列相关叙述正确的是（       ）

A．糖化是让麦芽糖分解形成糖浆，煮沸是使酶失活及对糖浆灭菌

B．发酵温度应控制在30℃，发酵原理为

C．由图2可知，随着氯化钙浓度的增加，发酵液中酒精体积分数基本不受影响

D．在15~20d期间，各种氯化钙浓度下的酒精体积分数均不再增加的原因基本相同

9 . 蛋白质谷氨酰胺酶（PG酶）能催化蛋白质发生脱酰胺反应，增大蛋白质的溶解性，提高食品工业中蛋白质的利用率。以谷氨酰胺-甘氨酸为唯一氮源，可以筛选土壤中产PG酶的金黄杆菌，流程如图所示。
(1)培养基I中的谷氨酰胺-甘氨酸遇热易分解，灭菌时应选择______。（单选）

A．过滤除菌

B．辐射灭菌

C．烘箱干燥

D．高压蒸汽灭菌

(2)结合下图分析不同培养基的类型和目的：培养基II______；培养基III______。（编号选填）
①固体培养基②半固体培养基③液体培养基④富集培养⑤分离目标微生物   ⑥发酵培养获得目的产物
经检测从土壤中筛选得到的金黄杆菌PG酶产量较低。为获得高产PG酶菌株，研究员以两株野生型PG酶菌株为亲本，用细胞融合技术拟获得PG酶高产融合菌株。

(3)制备细菌的原生质体时，需利用______去除细胞壁；获得原生质体后，可利用______促使原生质体融合。（编号选填）
①纤维素酶和果胶酶②溶菌酶③胰蛋白酶④灭活的仙台病毒⑤农杆菌⑥聚乙二醇
研究人员还设计了利用基因工程高效生产PG酶的方案，流程如图1：

(4)图1中过程①应用了PCR技术，以下说法正确的是______。（多选）

A．PCR中引物长度是影响PCR特异性的关键因素之一

B．PCR过程中新链的合成方向只能从5’—3’

C．PCR过程中引物可以重复利用

D．退火时引物与单链DNA模板结合

(5)完成过程②需要先将PG酶基因与pPIC9K质粒重组，这个过程称为______；图6为相关限制性内切核酸酶的识别和切割位点，根据图1、图2分析，选择用于切割pPIC9K质粒的限制性内切核酸酶是______。
(6)该重组DNA技术的受体细胞是______（产PG酶的野生菌/大肠杆菌/酵母）。
(7)在过程⑤中，每隔一段时间取1mL发酵液，离心后取上清液，加入SDS使蛋白质变性（变为线性形状）后，进行蛋白质凝胶电泳（原理同DNA凝胶电泳），得到图3结果。已知PG酶的理论分子质量约为35kDa。请根据图3结果分析本实验中PG酶酵母表达体系是否构建成功，并说明理由______。