1 . 回答下列有关微生物和酶工程的问题：
微生物类群中分布着几乎所有存在于植物和动物体内的酶。比如枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶，蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值，且已大规模产业化应用。
(1)枯草芽孢杆菌属于 。

A．真菌

B．真核生物

C．原核生物

D．霉菌

(2)在培养枯草芽孢杆菌时，必须通过高温蒸汽灭菌的是____。
①培养基②接种环③枯草芽孢杆菌菌种④培养皿⑤超净工作台
为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株，将分别浸过不同菌株（a～e）的分泌物提取液及无菌水（f）的无菌圆纸片置于添加某种高浓度蛋白质的含糖平板培养基表面；在37℃ 恒温箱中放置2～3天，结果如图A。

(3)实验中设置纸片f的目的是____。
(4)此培养基属于 。

A．固体培养基

B．液体培养基

C．通用培养基

D．选择培养基

(5)培养基中高浓度的蛋白质主要作用是提供枯草芽孢杆菌生长的 。

A．碳源

B．氮源

C．生长因子

D．无机盐

(6)大规模产业化首选的菌株是____；理由是____；图B显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性，在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60～70℃保温一定时间，再制备酶制剂。
(7)在 60～70℃保温一定时间的作用是 。

A．诱导蛋白酶的热稳定性

B．有利于发挥蛋白酶的最佳活性

C．裂解枯草芽孢杆菌细胞

D．大幅度降低发酵液中其他酶的活性

(8)利用枯草芽孢杆菌生产蛋白酶制剂的过程中，涉及的生物技术是 。

A．基因工程	B．发酵工程
C．酶工程	D．微生物技术
E．细胞融合技术

2 . 为探究氧气对酵母菌种群数量变化的影响，现设置有氧和无氧两种条件进行实验。在30℃下培养72h，结果如乙图所示，分析回答。

(1)配制好的培养液在接种酵母菌之前，需要__________处理，以避免其他杂菌对实验的干扰。
(2)用血细胞计数板计数时，若小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取的措施是__________。用25×16型计数室（如甲图），一个大方格计数室的容积是0.1m³，统计五个中方格的总菌数为M个，则每毫升培养液中酵母细胞数量为__________个。
(3)结果表明，酵母菌在有氧条件下种群数量呈__________增长； 培养24h后，种群数量不升反降，原因是培养液中的______________，细胞呼吸产生代谢废物使培养液的pH发生改变。

3 . 勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果，研究人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。下列叙述错误的是（       ）

A．统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法

B．除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养

C．培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌

D．初步判断培养基上菌种的类型，可以用肉眼观察菌落的形状

5 . 如图装置常用作果酒和果醋的制作，据图回答下列问题：

(1)在制作果酒时，对进气口应采取的措施是____________，长而弯曲的排气管具有的作用是____________。家酿葡萄酒中酒精浓度往往不超过15%，最可能的原因是____________。
(2)在果醋制作时，起作用的微生物是____________，它与果酒制作的微生物相比，结构上最主要的区别是____________。
(3)为提高果酒和果醋的品质，需要获得纯净的相应菌种。纯化培养的关键是____________，对此，在实验室中常用____________方法。

7 . 检验某水体中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，其操作流程如下图所示。EMB培养基上形成的不同菌落中，大肠杆菌菌落呈深紫色。下列对该实验操作的分析，正确的是（       ）

A．测定前，滤杯、滤膜、滤瓶、镊子和水样均需进行灭菌处理

B．若培养后的平板没有长出菌落，则可能是滤膜孔径过小所致

C．将过滤完的滤膜贴在EMB培养基上，此过程属于接种操作

D．EMB培养基属于选择培养基，只有大肠杆菌能够正常生长

8 . 测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基（EMB培养基）上培养→统计菌落数目。据图回答问题：

(1)过滤待测水样用到的滤杯、滤膜和滤瓶首先需要进行消毒灭菌处理，保证实验不受其它微生物干扰。与过滤有关的操作都要在___________________旁进行。
(2)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的_______________操作。从物理状态角度分析，EMB培养基属于_______________培养基，制备培养基时需要采用_______________法灭菌。
(3)某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将10ml待测水样加入到90ml无菌水中，稀释后的100ml菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为___________________个。
(4)该同学进一步思考，利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，从中检测到两种微生物，它们在结构上的主要区别是___________________。另一份来自某公园的观赏湖，若要通过测量蓝细菌的数目来研究水华，培养基配方中则必需添加___________________（水、无机盐、碳源、氮源）。

9 . 滥用抗生素会导致“超级细菌”（对多种抗生素有高耐药性）的产生。某实验小组研究细菌产生青霉素抗性与青霉素之间的关系，过程及结果如下图。下列叙述正确的是（       ）

A．用接种环在培养基上连续划线获得图示实验菌落

B．结果说明细菌的抗性出现在接触青霉素之后

C．可通过提高抗生素浓度避免超级细菌的产生

D．细菌培养基在使用前、后均需经过高压蒸汽灭菌

10 . 某研究小组将一组相同圆纸片放入不同浓度的麦迪霉素（一种抗生素）溶液中浸泡后，放在均匀地接种了大肠杆菌的培养基上培养，实验结果如下图。请分析并回答下列问题:

(1)在制备固体培养基时需加入的凝固剂，常用的是___________。
(2)图中出现透明圈的原因是________________________________________________________________。
实验结果表明，对大肠杆菌抑制作用最明显的是浓度为_______号（填图中序号）的麦迪霉素。
(3)该实验中，使用_____________________法接种大肠杆菌，在培养和接种大肠杆菌时要注意进行无菌操作。
(4)实验室还有另外一种接种法，即______________法，此种方法对接种环至少需进行______次灼烧灭菌。接种后盖上皿盖，需将平板__________，再放入培养箱培养。
(5)若该研究小组欲筛选能分解尿素的细菌，应使用以_______为唯一碳源的培养基，并加入_______________，便于进一步鉴定此菌。