1 . 把酶制剂固定化后作为饵料添加剂，可用于改善海参对饵料的消化吸收。将适量α-淀粉酶与一定浓度的海藻酸钠混合并充分搅拌，滴入CaCl₂溶液中，制成凝胶珠，冲洗并干燥后制成固定化α-淀粉酶。研究适宜条件下固定化α-淀粉酶对海参饵料淀粉的处理效率，部分结果如图。与该实验相关的叙述，正确的是（       ）

A．上述α-淀粉酶的固定化方法属于吸附法

B．CaCl2与海藻酸钠浓度及酶用量均会影响固定化效果

C．固定化α-淀粉酶处理海参饵料的最佳酶解时间为15-20分钟

D．50分钟后淀粉含量不再变化表明α-淀粉酶活性已经丧失

2 . 回答下列（一）、（二）小题：
（一）研究表明低温发酵可以显著提高果酒的口感，但发酵的速度却过于缓慢。为克服这一缺点，科研人员制备了一种在低温下具有较强发酵能力的固定化酵母菌。请回答以下问题：
(1)为获取具有较强发酵能力的酵母菌，科研人员将普通酵母菌用紫外线照射等方法进行__________处理，选择在低温条件上能大量繁殖的酵母菌分别接种于等量的葡萄糖培养液中，然后置于低温、__________条件下培养。一段时间后，取适量发酵液离心，取__________与相应的显色剂反应后，用光电比色法测定酒精含量，从而选择高活性的菌种制成干酵母。
(2)在超净工作台中，将耐低温的高活性干酵母置于适宜温度的__________溶液中，待酵母悬液中出现气泡后，加入包埋介质制备成固定化酵母菌，最后用无菌水清洗以除去__________。用固定化酵母菌能明显缩短果酒发酵时间的原因是固定化使__________，形成酵母菌密度较高的发酵环境，从而加快反应速度。
(3)果酒在醋杆菌的作用下可转为果醋。将果酒、水、醋杆菌等混合液倒入发酵瓶时，不能让发酵瓶中有游离液体存在的主要目的是__________。为鉴定果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、嗅之外，还可以通过检测__________作进一步的鉴定。
（二）下图表示获得抗除草剂转基因玉米的培育过程，图中的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能使某种能被细胞吸收的无色物质K呈现蓝色。请回答以下问题：

(4)构建重组质粒是基因工程的核心，此过程通常需要__________和DNA连接酶等工具酶。Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有一段包含报告基因的T－DNA序列，因该片段能进入植物细胞并__________，从而使其携带的目的基因的遗传遵循孟德尔定律。
(5)图中筛选1的目的是__________。农杆菌转化愈伤组织的过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。因此，进行筛选2时，应在培养基中加__________，并挑选__________的愈伤组织细胞，用于植物组织培养。
(6)将单个转化的愈伤组织细胞置于适当的液体培养基中，经过适当配比的__________诱导，可发育成胚状体，最后发育成完整的植株。此过程始终要在适宜温度、适宜培养基及__________等条件下进行。

4 . 将不同pH的饱和淀粉溶液以一定的速率流经固定化淀粉酶柱，检测流出液中淀粉剩余量，结果如下表。下列叙述正确的是（　　）
表   不同pH淀粉溶液流经固定化淀粉酶柱后的残留率

组别	甲	乙	丙	丁	戊	己	庚
pH	1	3	5	7	9	11	13
淀粉残留率	83%	75%	62%	17%	49%	92%	100%

A．测定淀粉残留率时，通常用饱和淀粉溶液作为对照实验

B．据表分析，固定化淀粉酶柱作用的最适pH范围为7~9

C．甲组使用过的固定化酶柱经蒸馏水反复洗涤后可以重复使用于其余各组实验

D．减慢庚组淀粉溶液流经酶柱的速率，能降低流出液中淀粉残留率

6 . 回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与α-淀粉酶的制备和固定化过程有关的问题：
（1）为了获得优良的枯草杆菌菌株，研究者取5克土样加到有95ml_________的三角瓶中，振荡10分钟，即成10-1土壤液。为了进一步稀释土壤液，应用_________吸取悬液，制成10^-2、10^-3、10^-4、10^-5的土壤稀释液。
（2）筛选产α-淀粉酶的枯草杆菌时，用较低浓度的_________作为培养基中的唯一碳源，接种时宜采用_________接种法。
（3）α-淀粉酶宜采用吸附法进行固定化，下列关于反应柱的理解，正确的是_________
A．反应物和酶均可自由通过反应柱
B．反应物和酶均不能通过反应柱
C．反应物能通过反应柱，酶不能通过反应柱
D．反应物不能通过，酶能通过
（4）为了确定筛选出的α-淀粉酶的应用价值，还需要进一步检测固相α-淀粉酶的活性，在该实验中，亲和层析洗脱液中加入KI-I2指示剂后，试管中呈现_________色。相对于唾液淀粉酶，枯草杆菌产生的α-淀粉酶具有_________特性，从而有利于工业生产。
（二）基于哺乳动物细胞表达的基因工程制药行业在最近10年发展迅速，其中构建稳定表达细胞株是最重要的环节，常见过程为：获得目的基因—将目的基因导入宿主细胞—初步筛选—扩增—单克隆化—筛选—驯化-工业生产。回答下列问题：
（1）如果该目的基因的序列是未知的，我们可以建立一个_________，然后在这里面寻找到要研究的目的基因。
（2）为了实现工厂化生产蛋白质类药物，常用CHO细胞（中国仓鼠卵巢的建株纤维母细胞）作为哺乳动物表达系统的宿主细胞，这种细胞应该具有_________能力，从而可以反复传代使用。为了得到CHO细胞,可以直接将组织从机体中取出后立即进行细胞、组织培养，当细胞从组织块中迁移出来，形成_________并增大后，再传代培养。
（3）利用“裹有重组质粒的脂质体与动物细胞融合”、“病毒侵染细胞”是将目的基因导入动物细胞的两种常用方法，前者所用的脂质体结构上由_________分子构成，后者不能用噬菌体的原因是_________。
（4）对细胞进行单克隆化培养时，培养基中往往需要添加血清、激素、滋养细胞等，这些措施的目的是_________。确定生产用的细胞株后，需要对细胞驯化使其适应生产规模下的培养条件，工业生产使用的培养基大多是无血清培养基，这对生物制品的好处有_________

7 . 回答下列（一）（二）小题：
（一）回答固定化果胶酶制备及其应用相关的问题：
（1）植物、霉菌、细菌等都能产生果胶酶，其中_____________等霉菌生产的果胶酶在食品加工中被广泛使用。为筛选果胶酶高表达菌株，将腐烂水果浸出液接种到以_____________为唯一碳源的固体培养基上培养，选取_____________的单菌落。分离后的菌种再接种到液体培养基中扩大培养，培养液中经分离纯化可获得果胶酶。
（2）为提高果胶酶的稳定性，可采用的固定方法是将果胶酶先与戊二醛交联，然后再用海藻酸钠等包埋，制成小球。滤出小球以_____________洗涤数次，滤纸吸干，低温保存备用。果胶酶需先与戊二醛交联后再包埋的原因可能是_____________。
（3）果胶水解的主要产物_____________与3，5-二硝基水杨酸共热呈现棕红色，这一原理可用于固定化果胶酶活性的研究。果胶溶液经固定化酶处理后再加入显色剂，充分反应后，使用_____________法在520nm波长处测定OD值。OD值越大，说明果胶酶活性_____________
（二）人参是珍贵的药材，其主要药用成分为人参皂苷。回答下列有关问题：
（1）为解决优质人参苗遗传不稳定问题，取人参幼苗茎段经_____________后形成愈伤组织，先在发芽培养基中长成丛状苗，分株后经生根培养获得再生植株，移至草炭土中通过逐渐______________进行炼苗方可移栽。与胚胎发生途径相比，上述过程不需要经过______________阶段。
（2）在黑暗条件下，对人参根进行多次______________培养，可获得大量根的无性系，用于制药。此外，也可以将人参愈伤组织经培养及筛选形成特定______________，经规模化悬浮培养后，从培养液中直接获取人参皂苷。
（3）为进一步研究杂种优势对提高人参药用成分产量的作用，将人参叶片______________后，置于经过滤除菌的含有______________酶的高渗透压酶解液中低速振荡处理，获取原生质体。将人参原生质体与胡萝卜原生质体融合，______________后成为完整的杂种细胞。培养杂种细胞，提取、纯化并检测药用成分，发现多种人参皂苷产量明显上升。

10 . 回答下列（一）、（二）小题：
（一）新型冠状病毒可通过表面的棘突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合侵入人体，引起肺炎。我国科学家研发出腺病毒（DNA病毒）为载体的重组新冠病毒疫苗，回答下列问题
（1）2020年1月11日，中国共享了冠状病毒基因组的全部序列，据此科学家可以用
_______法获得S基因，并用_______技术扩增S基因，随后在____________酶的作用下构建出重组腺病毒穿梭质粒，与腺病毒DNA共同导入相应的受体细胞，经筛选、检测等步骤完成重组新冠病毒的制备。
（2）为检测重组腺病毒携带的目的基因是否在人体细胞内表达，可检测细胞内是否含有相应的_______或S蛋白分子，若检测S蛋白分子可用_______技术。
（3）为研制抗S蛋白单克隆抗体，需提取经____免疫小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，用HAT培养基筛选获得_______细胞后，还需用抗体继续筛选才能获得分泌抗S蛋白的单克隆抗体细胞株，选择阳性细胞进行___________培养，分离提纯相应抗体。
（二）（1）某兴趣小组欲探究抗生素对细菌的选择作用，制备________培养基，在_______条件下进行高压蒸汽灭菌后再倒平板，用_________吸取200µl菌悬液于平板上，用玻璃刮刀涂抹均匀，然后将直径约为6mm的滤纸片浸入用________配置的不同浓度的抗生素溶液，取出并贴在平板上，在37培养24h，取出测定__________________。
（2）用果胶酶处理鲜榨果汁的主要目的是___________。为确定果胶酶的处理效果，对不同浓度果胶酶处理后的果汁进行离心，然后用比色计对上清液进行测定，OD值_____的处理效果好，为提高果胶酶的使用次数，可对其进行___________处理。