2 . （一）啤酒生产需经过制麦、糖化、发酵等主要环节。糖化主要是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子的过程。主要工艺流程如下图所示，请回答下列问题：

(1)制麦过程需促使大麦种子萌发，发芽大麦合成大量_______________直接促进糖化，淀粉糖化后啤酒酵母才能充分发酵的原因是____________________。
(2)大麦发芽会消耗部分储存的有机物，影响产量，提高了成本，厂家试行用____________（激素）诱导处理大麦种子，解决以上问题。
(3)啤酒泡沫的稳定性是啤酒品质的一个重要指标，发酵液中蛋白质有助于泡沫的稳定，为获得优质啤酒酵母，把经射线处理过的酵母菌液，稀释后___________在酪蛋白固体培养基上，选取周围透明圈小的菌落，表明其蛋白酶活性__________，扩增鉴定后获取用于生产的菌株。
(4)研究把啤酒酵母进行固定化试行连续生产工艺时，使用包埋法固定化细胞比固定化酶有明显优势的原因是_______________；细胞固定化后的缺陷是只能利用__________（胞外、胞内）酶，但同时酶的稳定性相比应用固定化酶技术要高，其原因是______________________________。
（二）基因X仅在水稻体细胞和精子中表达蛋白X，在卵细胞中不能转录。为研究基因 X表达对水稻卵细胞的影响，进行如下实验：
(5)从水稻体细胞提取基因X的mRNA，首先需破碎细胞，经离心后获得______________，利用基因X的局部特定短序列做______________，从中钓取相应mRNA经______________后获取目的基因。
(6)将基因X编码序列与Luc基因（荧光素酶基因，荧光素酶能催化荧光素产生荧光）拼接成X-Luc融合基因（表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能），并将融合基因插入到_____________的T-DNA中，利用_______________法将融合基因转入水稻愈伤组织。
(7)经修饰处理的T-DNA上______________可与卵细胞RNA聚合酶结合，从而在转基因水稻卵细胞中能表达基因X。分离并培养转基因水稻卵细胞，添加_____________即可筛选出成功表达基因X的卵细胞。
(8)水稻卵细胞在未受精时一般不进行发育，从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含一个染色体组，表明基因 X对水稻卵细胞的影响可能是_______________________。

3 . 生物学实验中通常利用颜色反应进行物质检测。以下相关操作，错误的是（　　）

A．检测蛋清中的蛋白质时，将蛋清稀释后依次加入适量双缩脲试剂A液和B液

B．模拟尿糖的检测时，将适量本尼迪特试剂滴加到葡萄糖试纸上观察颜色变化

C．检测固定化α-淀粉酶的水解作用时，向淀粉溶液中加入KI-I2作为对照

D．检测泡菜中亚硝酸盐时，需向样品处理液中加入显色剂进行显色反应

4 . （一）请回答利用枯草杆菌生产α­淀粉酶及酶固定化实验的有关问题：
（1）筛选高表达菌株的最简便方法之一是_____。一般通过_____两种手段实现。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用_________培养基进行扩大培养。
（2）利用物理或化学的方法将α­淀粉酶固定在_____的介质上成为固定化酶。
（3）实验过程涉及两次蒸馏水洗涤反应柱的操作，所用的蒸馏水体积为装填体积的_____，第二次洗涤的目的是除去________________________________。
（4）在建立和优化固定化酶处理工艺流程时，除考虑固定化酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的主要有_________和__________________________。
（5）从反应柱下端接取少量流出液进行 KI－I₂ 溶液颜色测试，结果未呈现红色。下列有关此现象的解释一定错误的是_____。
A．反应柱中没有α­淀粉酶被固定
B．流速过快，淀粉未被水解       
C．接取的流出液是蒸馏水          
D．流速过慢，淀粉被水解成葡萄糖
（二）请回答与“泡菜的腌制”实验有关的问题：
（1）用胡萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用_____浸泡1分钟， 可抑制某些微生物产生____，从而使成品泡菜口感较脆。基本过程是将蔬菜、盐水、糖、白酒等放入洗净的菜坛中，混合均匀，坛口加盖后用_____封好。加入的白酒，既可作为调味剂，增加醇香感，还具有_________的作用。
（2）腌制泡菜过程中起作用的微生物主要是乳酸菌和_________。在发酵中期，乳酸菌大量繁殖， 会使________菌受到抑制。为分离某种美味泡菜汁中的乳酸菌作为菌种，可将稀释后的泡菜汁接种到平面培养 基上，立即将培养皿_____（A．正放于无氧培养箱   B．正放于有氧培养箱 C．倒置于无氧培养箱   D．倒置于有氧培养箱）中培养。

5 . 回答下列与果汁、果酒、果醋制作相关的问题：
（1）实验室制作果酒、果醋。
①用果汁制作果酒：将果实打成匀浆后，加果胶酶将果胶分解成__________等物质，再用果胶甲酯酶处理得到较澄清的果汁，装入发酵瓶中。另外，将适量的__________作菌种，用温水加入少量蔗糖制成悬液，活化后加到果汁中混匀，发酵制酒。
②用果酒制作果醋：获得保存在试管LB固体__________培养基的醋杆菌菌种，用_________（填仪器）取菌体放入三角瓶的液体培养基中，置于摇床上振荡培养48小时，使其_________后，用于醋酸发酵。
（2）工业化制作果汁的过程中，对果胶酶需求量很大，目前较好的解决办法是将果胶酶用物理或__________的方法固定在某种介质上，具体是以海藻酸钠为“网格”载体，戊二醛为交联剂，即采用__________两种方法将酶固定化，以实现__________，从而减少对果胶酶的需求。

6 . 枯草杆菌广泛分布于土壤及腐败的有机物中，某工厂为生产耐高温的淀粉酶，开展了枯草杆菌菌株的筛选、酶的固定化分析研究，其流程如图所示：

（1）配制培养基：该培养基应以______为唯一碳源。
（2）取土样加入盛有无菌水的三角瓶中，常压加热至水沸腾后维持20分钟，其目的是______，取出三角瓶置于37℃培养24小时，液面产生黄白色皮膜，用接种环挑取菌膜，用______法接种到平板上，于37℃恒温箱中培养24小时，取出观察，若淀粉被水解，菌落周围会产生______，选择优良的菌株进行扩大培养。
（3）在建立和优化淀粉酶固定化酶柱连续生产工艺研究中，通常要分析汁液中各种成分的浓度和所用酶的活性，然后主要优化各固定化酶反应器中的______（答出2点即可）、反应pH和酶反应时间等因素。其中，酶反应时间可通过______来调节。
（4）固定化酶柱在使用后，需用______洗涤，放置于4℃冰箱中。

7 . 回答下列（一）、（二）小题：
（一） 沙田柚为芸香科柑橘属植物，果肉浓甜，但果皮肥厚。回答以下问题：
（1）果胶是一种天然高分子化合物，适量的果胶能使冰激凌、果酱和果汁凝胶化，因此被广泛应 用于食品工业。柚果皮富含果胶，其含量达6%左右，是制取果胶的理想原料。果胶的制取工 艺大致如下：取原料，在______中漂洗，以降低果胶酶活性，提高果胶得率；酸萃取，并用 活性炭脱色；超滤浓缩；最后加入______，边加入边搅拌，使果胶沉淀析出，真空干燥，得到干制品。
（2）实验室用咔唑比色法测定样品中的果胶含量。已知果胶经充分水解后可在强酸环境下与咔唑 试剂产生缩合反应，生成紫红色化合物，可在530nm波长下测定______予以定量分析。在 样品测定前须______，分别加入浓硫酸和咔唑试剂后，静置30分钟，测定数据 以制作______。对样品溶液进行测定时，应用______替代果胶样品液来作为对照组 测定数据。
（3）科研工作者对改良的沙田柚进行植物组织培养，往往选用作______为碳源。
（二）为获得果胶酶，科研人员进行了下列果胶酶高产菌株的分离、筛选、鉴定及果胶酶在生产上的 应用试验。
（1）为分离产生果胶酶的某种霉菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表中应加入的成分a是______，该成分在培养基中的作用为______；在各种成分溶解配制好后应将pH调到______，再进行______灭菌。

成分	K2HPO4	MgSO4	NaNO3	FeSO4	a	琼脂	蒸馏水
质量	0.1g	0.5g	3g	0.01g	2g	15g	加至1L

（2）将获得的菌株进行扩大培养后，再用______（工具）从滤液中获得粗提的果胶酶。
（3）在果汁和果酒制作过程中，常用果胶酶处理来提高相应产品的______；生产上通过明胶、海藻酸钠（包埋剂）或戊二醛（交联剂）等对果胶酶进行______处理，以减少酶的使用量，降低生产 成本。

8 . 如图1所示为利用苹果制备果汁、果酒、果醋的流程图．

（1）果胶酶可以通过苹果青霉来生产，___________是筛选高表达菌株的最简便方法之一．筛选出的菌株 在发酵生产之前还需利用___________培养基进行扩大培养．
（2）酶在水溶液中很不稳定，且不利于工业化使用，常用固定化技术使之成为___________而又有酶活性的制剂．如图2所示是澄清苹果汁生产实验示意图，下列相关叙述中，正确的是___________．
A．实验中所用的固定化果胶酶吸附后可永久使用
B．为防止杂菌污染，图示装置制作完毕后需瞬间高温灭菌
C．通过控制阀调节苹果汁流出的速率，保证反应充分进行
D．固定化果胶酶不可重复使用，每次生产前需重新装填反应柱
（3）图1中①过程也可利用附着在苹果皮上的___________做菌种．为获得高纯度、糖含量高的苹果酒，需向果汁中添加___________．
（4）由图1中①转变为②，除改变温度、调节pH外，还需调整的发酵条件是___________．

9 . 回答下列（―)、（二）小题：
（一）下图为利用苹果制备果汁、果酒、果醋的流程图。

（1）果胶酶可以通过苹果青霉来生产，____________是筛选高表达菌株的最简便方法之一。筛选出的菌株 在发酵生产之前还需利用__________培养基进行扩大培养。
（2）酶在水溶液中很不稳定，且不利于工业化使用，常用固定化技术使之成为____________而又有酶活性的制剂。下图是澄清苹果汁生产实验示意图，下列相关叙述中，正确的是___________。

A.实验中所用的固定化果胶酶吸附后可永久使用
B.为防止杂菌污染，图示装置制作完毕后需瞬间高温灭菌
C.通过控制阀调节苹果汁流出的速率，保证反应充分进行
D.固定化果胶酶不可重复使用，每次生产前需重新装填反应柱
（3）图中①过程也可利用附着在苹果皮上的____________做菌种。为获得高纯度、糖含量高的苹果酒，需向果汁中添加_____________。       
（4）由图中①转变为②，除改变温度、调节pH外，还需调整的发酵条件是____________。
（二）科研工作人员利用胚胎干细胞（ES细胞）通过胚胎工程克隆鼠，以供医学治疗需要，其技术流程如下图：

（1）图中的X细胞可以称为___________细胞。
（2）图中的X细胞依次经___________后由代孕母鼠产生克隆鼠。
A.核移植、胚胎培养、胚胎移植            B.胚激活、胚胎培养、胚胎移植
C.胚胎培养、胚激活、胚胎移植            D.核移植、胚激活、胚胎体外培养
（3）在克隆胚胎的培养基中以___________作为能源物质。
（4）为了提高已有胚胎的利用率，可采取____________技术。进行胚胎移植时，代孕母鼠对移入子宫的克隆胚胎基本上不发生___________，这为克隆胚胎在代孕母鼠体内的存活提供了可能。
（5）若分离出内细胞团进行胚胎干细胞培养，当干细胞达到一定的密度时，需进行___________培养以得到更多数量的细胞。还可以对胚胎干细胞进行______________________，通过一系列的培育过程，以获得适合人体移植的动物器官，减弱或消除排斥反应。

10 . 啤酒酵母是啤酒工业发酵菌种，对啤酒的品质、风味有很大影响。请回答下列问题：
（1）若实验室中啤酒酵母菌种被杂菌污染，可采用________进行纯化培养：接种时，先将接种环在酒精灯火焰上灼烧，待其________后，蘸取带菌培养物放到新的培养基中。倒置培养皿恒温培养直到出现________，再进行菌种鉴定。
（2）为实现啤酒发酵连续生产，酵母细胞固定化技术已在啤酒工业中广泛应用。例如，将啤酒酵母和海藻酸钠混合均匀，经CaCl₂处理形成凝胶颗粒，而酵母细胞则被固定在其内部。这种固定化方法称为________（A.吸附法   B.包埋法   C.交联法   D.共价偶联法）。
（3）科研人员将表达乙肝病毒表面抗原的基因构建在重组质粒中，进而转入________，发酵生产转基因酵母乙肝疫苗。在构建重组质粒过程中，通过同种限制性核酸内切酶（－G↓ AATTC－）切割得到的一个目的基因和一个开环质粒，共有________（A.1个   B.2个   C.3个   D.4个）黏性末端。将重组质粒导入受体细胞的操作步骤完成以后，需要对所有受体细胞进行筛选，这是因为________________________________。该转基因技术实践应用的成功标志是________________________________。
（4）转基因技术结合胚胎工程在高等动物育种中也有成熟应用。人们将经过基因改造的胚胎干细胞核与________融合，得到________，并促使其在体外分裂发育成________，再通过胚胎移植获得后代。目前胚胎移植是胚胎工程中获得后代的唯一方法，其原因是______________________________________________。
（5）胚胎干细胞具有重要的生产和临床医学价值。在培养胚胎干细胞时，首先要在培养皿底部制备一层细胞，称为________，其作用是______________________________________。