组卷网 > 知识点选题 > PCR扩增的原理与过程
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解析
| 共计 188 道试题
1 . 我国有大面积的沿海滩涂和盐碱地,利用生物技术培育出耐盐农作物,可以合理利用这些沿海滩涂和盐碱地,以此增大我国的人均可用耕地面积。如图表示构建基因表达载体所用到的外源DNA和质粒,其中箭头指向是限制酶识别的核苷酸序列所在位置。另外;BamH I、Sma I和Hind Ⅲ三种限制酶切割DNA时形成的末端均不同。请回答下列问题。

(1)获得的耐盐基因在细胞外进行扩增时,常采用的技术是____________。该技术用到的酶与普通的胞内酶相比,最大的特点是____________
(2)构建该重组质粒时,图中不能使用的限制酶是____________,理由是________________________
(3)重组表达载体除了含有目的基因和图中标出的结构外,还必须有________________________,其中后者具有____________酶识别和结合的位点。
(4)设计一个实验,从细胞水平上鉴定受体细胞内是否成功导入该重组质粒,请写出简要实验思路: __________
2 . 阅读资料1、资料2,回答下列问题。
【资料1】接种新冠疫苗可降低新冠患者出现重症的危险。我国科学家把腺病毒中负责复制的关键基因剪切掉,但保留其侵染人体细胞的能力。随后,将其与逆转录获得的新冠病毒S蛋白(介导新冠病毒感染细胞的关键成分)基因整合,构建出了两种病毒的融合型病毒——重组腺病毒DNA疫苗。
【资料2】新冠病毒核酸测序能够监测新变异毒株的出现,具体做法是:先提取新冠病毒RNA,利用RT-PCR技术(即将病毒RNA逆转录后再进行PCR扩增)获取目标DNA区域;随后进行DNA测序,通常采用双脱氧核苷酸测序法,其原理是:双脱氧核苷酸(ddNTP)的2'、3'碳原子都不含羟基,在DNA合成过程中不能形成磷酸二酯键,因此可以中断DNA分子合成反应。在四个单独的PCR反应体系中,分别额外掺入ddATP、ddTTP、ddGTP、ddCTP,使DNA复制随机终止,产生不同长度的DNA片段,然后进行凝胶电泳分离检测,从而分析获得目标DNA区域的碱基序列。
(1)资料1中,构建出两种病毒的融合型病毒这一步骤在基因工程中被称为__________。融合型病毒入侵人体细胞后,S蛋白基因在人体细胞内的遗传信息传递过程为___________(用文字和箭头表示)。
(2)接种重组腺病毒DNA疫苗后,人体长时间内仍可检测到重组腺病毒DNA。请由此推测重组腺病毒DNA疫苗只需注射一针即可起到长期免疫保护作用的原因是___________
(3)资料2,RT-PCR技术中使用的酶有__________。PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、__________三步,其中复性的结果是__________
(4)下图为资料2中双脱氧核苷酸测序电泳结果,据此可分析出目标DNA区域X的碱基序列为__________(按5'→3'方向书写)。
2023-04-15更新 | 551次组卷 | 1卷引用:2023届吉林省长春市高三质量监测(三)理综生物试题
3 . 重组PCR技术是一项新的PCR技术,通过重组PCR技术能将两个不同的DNA连接成为一个新DNA分子。某科研小组从猪源大肠杆菌中扩增得到LTB和ST1两个基因片段,利用重组PCR技术构建了LTB—ST1融合基因,制备过程如下图所示。回答下列问题:

(1)利用PCR技术扩增目的基因的过程中,向反应体系中加入的物质除了引物和模板链﹐还需要加入________
(2)从P2,P3两种引物的角度分析,LTB和ST1基因能够融合的关键是______。PCR1和PCR2不能在同一个反应体系中进行,原因是_______。②过程不需要加入引物,原因是________
(3)科研小组为了检测是否成功构建出融合基因,将反应后体系中的各种DNA分子进行电泳,结果如图所示。则融合基因最可能是________,判断依据是________
4 . 新型冠状病毒在世界范围内广泛传播,各国都在努力加快疫苗研发进度;到目前为止,已有部分疫苗进入临床使用阶段。结合所学回答有关问题。
(1)灭活疫苗方案具有技术方案简单、成熟度高、研发快速的优点,在体外利用_____________(“固体培养基”或“人呼吸道上皮活细胞”)培养新冠病毒,经过灭活减毒处理后,注入人体,刺激其产生____________
(2)若制备腺病毒载体新冠病毒疫苗,首先以新冠病毒的遗传物质RNA为模板经过逆转录获得DNA,其次制备重组的腺病毒,该过程需要____________酶参与,该步骤在基因工程中被称为____________
(3)mRNA疫苗就是将病毒靶标蛋白合成所需的一小段mRNA混入载体(如脂质体)中,注入人体后可产生靶标蛋白,激发免疫反应。人没有感染风险的原因是____________。DNA疫苗制备需要扩增新冠病毒的某种基因,扩增时需加入引物,如扩增n次,则需要引物_____________个。
(4)新冠疫苗制备后,经过一段时间后,可能会起不到良好的预防作用,原因是____________
5 . Rag2基因缺失的小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失的小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图:

请回答下列问题:
(1)上述图解中涉及到的生物技术有__________________。(答出两点)
(2)在核移植前,需要对卵母细胞进行“去核”处理,去的“核”其实是_________。用蛋白酶合成抑制剂处理重构胚,其目的是_________
(3)步骤②培养到_________胚胎阶段,取其中的_________细胞分离培养得到ES细胞。
(4)步骤③中,如获取的Rag2用基因数量较少,需利用PCR技术扩增,从下图中选出_________作为引物,如果以一个目的基因为模板PCR循环4次,共需要_________个引物。
6 . 黄金大米是一种新型转基因大米,其β-胡萝卜素含量是普通大米的23倍,因大米在抛光后呈黄色而得名。八氢番茄红素合酶(其基因用psy表示)和胡萝卜素脱饱和酶(其基因用crt表示)参与β-胡萝卜素的合成。科学家将psy基因和crt基因转入水稻,使水稻胚乳中含有β-胡萝卜素,由此生产出的大米称为“黄金大米”。回答下列问题:
(1)转入水稻的psy基因和crt基因的基本单位是_____________,这两段基因与β-胡萝卜素的合成之间的关系是____________
(2)利用PCR技术,可以将目的基因在短时间内大量扩增,由此可知,PCR技术本质上是_____________。PCR扩增与体内DNA复制有许多方面的不同,主要表现在____________
(3)水稻是单子叶植物,将psy基因和crt基因导入水稻细胞通常采用的方法是____________psy基因和crt基因导入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程称为____________
(4)我国对农业转基因生物实施标识制度,比如某种食品含有的麦芽糖是从转基因大米中提取出来的,但该品的说明中仍可标注为“本产品加工原料中有转基因大米,但本产品已不再含有转基因成分”,其依据是____________
7 . 二倍体作物M有抗虫、高产等多种优良性状,但不甜。育种工作者通过基因工程将二倍体作物N的高品度基因A(表达产物是A蛋白)转入了M,获得了高甜度的M。
(1)用PCR技术可从N的细胞中获得A基因,在设计PCR引物时,必须依据____________的特异性核苷酸序列来进行,PCR过程每次循环分为3步,包括变性、复性和延伸,复性的结果是____________
(2)将A基因插入农杆菌Ti质粒上的______中,得到重组质粒。进行该过程时,DNA连接酶催化生成的化学键是____________,A基因的上游还应该加上特定的____________,以便A基因在受体细胞能正常表达。
(3)转入了A基因的M细胞经过培养,得到了能稳定表达A基因的愈伤组织,则说明A基因已经整合到M细胞__________________
(4)现已获得纯度高的A蛋白(可微抗原),可通过____________技术制备特异性探针,然后利用该探针,检测转基因植株的A基因是否成功表达。
8 . 酶具有高效性和专一性,在生物工程中被广泛使用。下列技术中没有酶的应用的是(       
A.制备植物细胞原生质体B.PCR扩增DNAC.早期囊胚的胚胎分割D.贴壁生长的动物细胞的解离
2022-12-09更新 | 288次组卷 | 5卷引用:吉林省长春市第二实验中学2022-2023学年高三上学期期末理综生物试题
9 . 研究人员发现,有一种称作XRCC2的启动子(负责RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列)在正常细胞中表达水平很低,而在癌细胞中却高表达。利用该特性,研究人员结合DTA(白喉毒素A基因,其表达产物能够杀死细胞)做了如下图1实验。回答下列问题:

(1)组成XRCC2启动子的基本单位是_____。图2所示为XRCC2启动子两端的部分序列,通过PCR扩增XRCC2启动子,需要设计的两种引物的碱基序列为__________(标明5'和3'端)。
(2)为了成功构建能够特异性杀死肿瘤细胞的质粒,需要先将XRCC2启动子与DTA形成融合基因。请结合图1简述构建融合基因的过程:_____
(3)要验证重组质粒的表达产物能专一性杀死癌细胞,还需要设置一组对照实验,具体的实验方案为_____
(4)基因驱动是指特定基因有偏向性地遗传给下一代的自然现象。遗传学家研究发现,基因驱动技术几乎可以百分之百地使突变基因在同一生物的不同种群个体之间传播,某些生物学家曾提出把这种技术应用于消灭一些入侵物种,从而保护那些濒危物种,一些遗传学家立即呼吁增强这种技术的管制。请从生物技术安全性的角度简要谈谈你对该技术的看法:_____
2022-09-08更新 | 114次组卷 | 1卷引用:吉林省八所省重点中学2021-2022学年高二下学期期末联考生物试题
10 . 我国在新冠疫情方面取得了显著的成效,但全球疫情形势仍然非常严峻、尤其是病毒出现了新变异株—德尔塔、奥密克戎,更是威胁着全人类的生命健康。
(1)新冠病毒核酸定性检测原理是:以新冠病毒的单链RNA为模板,利用_______酶合成DNA,然后经PCR扩增,然后在扩增产物中加入特异的核酸探针,如果检测到特异的杂交分子则核酸检测为阳性。
(2)接种疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制备技术要点是:将腺病毒的复制基因敲除;以新冠病毒的_______基因为模板合成的DNA插入腺病毒基因组,构建重组腺病毒。重组腺病毒在人体细胞内表达产生新冠病毒抗原,从而引发特异性免疫反应。在此过程中,腺病毒的作用是作为基因工程中目的基因的_______。将腺病毒复制基因敲除的目的是_______
(3)单克隆抗体有望用于治疗新冠肺炎。单克隆抗体的制备原理是:取免疫阳性小鼠的_______细胞与骨髓瘤细胞混合培养,使其融合,最后筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。与植物组织培养相比,杂交瘤细胞扩大培养需要特殊的成分,如某些激素和_______
2022-08-22更新 | 68次组卷 | 1卷引用:吉林省长春市六中2021-2022学年高二下学期期末生物试题
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