1 . 某种转基因油菜的产油率明显高于普通油菜，原因是转入的基因A 的表达产物可抑制油菜细胞内糖类和蛋白质的合成，促进丙酮酸大量转化为油脂。如图为科研人员培育产油率高的转基因油菜的主要过程示意图。请回答下列问题：
   
(1)基因A既可以在实验室中直接人工合成，也可以通过构建_________来获取。获取基因A后可利用________技术对其进行扩增，一个基因A 通过该技术进行n次循环，需要消耗_________个引物。
(2)我国科学家独创的将目的基因导入植物细胞的方法为___________________。图中将目的基因导入植物细胞的方法为农杆菌转化法，转化是指____________。
(3)过程①中，通常将基因A插入到 Ti质粒T-DNA 中的_________之间，以利于基因A的表达。过程④中，需要添加的具有启动细胞分裂、再分化作用的关键激素为____________________________。经图示过程获得的油菜是否为产油率高的转基因油菜，还需要对其进行_________的鉴定，该种鉴定方法属于个体生物学水平的鉴定，只有符合要求并通过安全性测试的转基因油菜才能推广并种植。

2 . 赖氨酸是人体八大必需氨基酸之一，能促进人体发育、增强免疫功能，并有提高中枢神经组织功能的作用。某农科所科技人员欲通过将玉米某种蛋白酶改造成“M酶”，从而大大提高玉米种子中赖氨酸的含量，以期待培育出高赖氨酸玉米新品种。回答下列问题。
(1)科技人员先从“提升玉米种子中赖氨酸含量”这一功能出发，预期构建出____________的结构，再推测出相对应目的基因的___________序列，最终合成出“M酶”基因。
(2)科技人员获得“M酶”基因后，常利用_____________技术在体外将其大量扩增。该技术的第一步是使目的基因DNA受热变性，DNA中G+C的含量越多，要求的变性温度越高。其原因是___________。
(3)“M酶”基因只有整合到玉米细胞的____________中，才能确保“M酶”基因在玉米细胞中得以稳定遗传。科技人员将“M酶”基因导入玉米细胞前，需先构建____________，才能保证该基因在玉米细胞内能稳定存在，并能表达和发挥作用。
(4)依据____________的原理，可将含有“M酶”基因的玉米细胞培育成转“M酶”基因的玉米植株。为了确保育种成功，科技人员需要通过测定玉米种子中____________的含量，从个体水平加以鉴定。

3 . 下列关于生物学实验的叙述中，正确的有几项（       ）
①在“DNA粗提取与鉴定”的实验中，向花椰菜组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核DNA
②提取绿叶中光合色素的原理是色素在层析液中溶解度越大，随着层析液在滤纸上扩散得越快
③“T₂噬菌体侵染大肠杆菌”的实验，采用了同位素标记法和对比实验法证明了DNA是主要的遗传物质
④调查某种昆虫卵的密度、作物植株上蚜虫的密度、跳蝻的密度等，可采用样方法
⑤利用溴麝香草酚蓝水溶液鉴定酒精时，溶液由蓝变绿再变黄
⑥PCR过程中，引物可使DNA聚合酶能够从引物的5’端开始连接脱氧核苷酸

A．1项

B．2项

C．3项

D．4项

4 . 请回答下列有关基因工程的问题：
(1)基因工程又叫做______技术，在基因工程中使用的载体除质粒外，还有______、动植物病毒等；早期基因工程操作都用原核细胞作为受体细胞，原因是______（答出两点即可）。基因治疗是治疗遗传病的最有效手段，分为体外基因治疗和体内基因治疗，体外基因治疗的特点是_________。
(2)生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是______；在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是________。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的______。
(3)目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是______。

5 . 新冠疫情的快速控制，离不开我国对新冠病毒（RNA病毒）的快速检测能力。荧光定量PCR技术可检测样本中DNA含量，其原理是：在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成（如图）。Ct值的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法不正确的是（       ）

A．检测新冠病毒时，需加入逆转录酶将新冠病毒RNA转化为cDNA

B．子链延伸时，脱氧核苷酸原料首先加到引物的3'端

C．Ct值越大表示被检测样本中病毒数目越多，患者危险性更高

D．若样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，检测结果可能为阴性

6 . 利用新冠病毒（SARS-CoV-2）包膜表面的S蛋白研发的疫苗已在我国广泛接种。下图表示制备疫苗的相关过程，其中m、n分别是启动子和终止子，箭头处是限制酶的切点，SUC2是酵母菌的蔗糖转化酶基因，其终产物存在于液泡中，可以催化蔗糖水解成单糖被细胞利用。下表是可供选择使用的限制酶及其识别序列和切割位点。

限制酶	BamHI	NheI	NcoI	SphI	Sau3AI
识别序列和切割位点	5'-G↓CTAGC-3'	5'-G↓GATCC-3'	5'-C↓CATGG-3'	5'-GCATG↓C-3'	5'-↓GATC-3'

(1)上图②过程所使用的两种酶是______________________，选择两种酶切割的优点是_______________________。
(2)由上图推测，目的基因S表达的模板链是a链，理由是_____________________；该目的基因的表达离不开m，原因是_____________________。
(3)RT-PCR是将RNA逆转录（RT）和聚合酶链式反应（PCR）相结合的技术。利用S蛋白的RNA作为模板进行过程①，首先需要加入缓冲液、原料、酶I、引物I等物质后进行RT，获得单链DNA后，还需要添加与单链DNA互补的引物II及酶II，在PCR过程中酶I所处的状态是______________。以一个单链DNA为起点，进行n次循环的扩增，理论上需要________个引物Ⅱ；PCR每次循环一般可以分为变性、______________、延伸三步。
(4)SUC2作为B上的标记基因，可以对导入B的酵母菌进行筛选。筛选时，需要使用以蔗糖为唯一碳源的培养基，对受体突变型酵母菌的要求是______________。
(5)与普通灭活或减活疫苗相比，上述方法制备的疫苗对人体更安全，主要原因是_______________________________。

7 . 近期《肝脏学》杂志发表了一篇文章称科学家经研究发现：乙肝病毒HBX蛋白质调控宿主细胞内许多基因的转录，广泛影响宿主细胞的各种生命活动，包括调节细胞凋亡、抑制细胞DNA的修复、干扰细胞有丝分裂和细胞周期进程等，因此可利用该蛋白质治疗乙肝。下图表示利用乳腺反应器生产乙肝病毒HBX蛋白的流程示意图：

（1）已知HBX蛋白基因的核苷酸序列，则①可采用________获得目的基因，并用________技术进行扩增。
（2）为获得更高活性的HBX蛋白质，需要对蛋白质结构进行设计改造，这种技术属于______________工程的范畴，该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过________，对蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质的技术。在该实例中，为什么不直接改造蛋白质？原因是___________________________________________________________。
（3）图中载体④的种类有________，HBX基因之所以能“插入”到羊的染色体内，原因是___________________________________________，⑥为胚胎移植到受体，在该步骤操作前对胚胎进行了检查和筛选，发现有些胚胎因为外源基因的插入而死亡，请你分析外源基因插入导致胚胎死亡的原因______________________________________________________________________________

8 . 下图表示通过DNA过程获得目的基因并利用PCR扩增的示意图。据图分析，下列有关叙述正确的是

A．催化①过程的酶是RNA聚合酶

B．③过程不需要DNA解旋酶

C．④过程需要两个相同的引物

D．催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，均须耐高温

9 . 下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述，正确的是

A．DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的碱基黏合，形成重组DNA

B．限制性核酸内切酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗一个水分子

C．Taq酶是用PCR仪对DNA分子扩增过程中常用的一种耐高温的DNA聚合酶

D．纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体，便于植物杂交育种