1 . DNA标记是DNA（或基因）中一些稳定的特征性碱基序列。选择相应的DNA标记进行PCR扩增，通过产物的电泳图谱可进行遗传病的基因定位。下图1为1号家庭甲、乙两种遗传病的相关基因（包含正常基因和致病基因）定位电泳图，图2为2号家庭甲、乙两种遗传病的家族遗传系谱图，已知甲乙两病中只有一种为显性遗传病。甲种遗传病的相关基因为A、a，乙种遗传病的相关基因为B、b，不考虑X、Y染色体同源区段上的基因。请回答下列问题：
   
(1)甲种遗传病的遗传方式是____，乙种遗传病的遗传方式是____。
(2)1号家庭和2号家庭中，儿子的基因型分别是____、____。
(3)若要判断1号家庭中父亲是否患有甲种遗传病，可选择____，对其甲种遗传病有关的DNA标记PCR扩增产物进行电泳，并将其电泳图与1号家庭父亲的电泳图进行比较。
(4)PCR技术除用于上述基因定位外，在基因工程中还可以用于____

2 . 基因定点整合可替换特定基因，该技术可用于单基因遗传病的治疗。苯丙酮尿症是由某基因（A）突变引起的，将正常A基因定点整合到A基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上，替换突变基因，可用来研究该病的基因治疗过程。基因定点整合的过程如图所示，已知neo^r基因可作为标记基因，含有neo^r的细胞具有对G418的抗性。回答下列问题：

(1)构建重组载体，常用的工具酶有__________。构建重组载体时，需要大量A基因，常用__________技术合成A基因，利用该方法合成A基因时需要设计并合成__________种引物。
(2)将重组载体导入患病小鼠胚胎干细胞的常用方法为__________。检测患病小鼠胚胎干细胞中是否导入重组载体的方法是在含有__________的培养液中培养胚胎干细胞。
(3)用图中重组载体转化胚胎干细胞时，会出现A基因错误整合。错误整合时，重组载体上的两个HSV-tk至少会有一个neo^r一起整合到染色体DNA上。已知HSV-tk1、HSV-tk2的产物都把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。将导入重组载体胚胎干细胞置于同时含有G418和DHPG的培养，存活下来的是__________（填“正确整合”或“错误整合”）的胚胎干细胞
(4)将上述筛选得到的胚胎干细胞培育成转基因小鼠，还需要__________技术和_________技术。

3 . 新型冠状病毒（COVID-19）的核酸检测采用逆转录PCR技术。先将样本RNA逆转录成cDNA，再以DNA为模板进行扩增。请据此回答下列问题：
（1）样本RNA逆转录成DNA的原料是______________________。
（2）逆转录PCR反应中使用的DNA聚合酶是从水生栖热菌Thermus Aquaticus（Taq）中分离提取。该菌分离提取的DNA聚合酶优势在于_____________。
（3）逆转录PCR反应中热变性过程DNA结构的变化是__________________________。
（4）下表是用于COVID-19的cDNA扩增的两种引物序列，请据表回答相关问题：

引物名称	引物序列（5′-3′）
引物1	TTCGATGTTGAGGGTGCTCAT
引物2	TCACACCAGTTGAAAATCCTAATTG

①引物1对应的模板链序列为________________。
②下图为cDNA的部分序列，请问引物1和引物2分别对应的位置是_________

A．Ⅰ和Ⅱ             B．Ⅰ和Ⅲ             C．Ⅲ和Ⅳ             D．Ⅱ和Ⅲ
（5）PCR技术获取目的基因的优势是________________________________。
（6）能否利用COVID-19的遗传物质作为基因工程的载体?请说明原因_____________________。

4 . PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下，复制出许许多多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。它的基本过程如下：

注：图中“▄”表示每次扩增过程中需要的引物(用P代表)。每个引物含20个脱氧核苷酸，并分别与DNA片段两端碱基互补，其作用是引导合成DNA子链。
请据图分析回答：
（1）PCR技术的原理是模拟生物体内_______________的过程。
（2）PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理，其目的是_________________，其作用相当于细胞内________酶的作用。
（3）在③适温延伸过程中，必须加一特定的DNA聚合酶，从图示中可判断，该酶与一般人体细胞中的DNA聚合酶相比，最主要的特点是__________________。
（4）假如引物都用³H标记，从理论上计算，DNA片段经3次扩增所得的8个DNA分子中，含有³H 标记的DNA分子占________%。
（5）假定DNA片段含200对脱氧核苷酸，经3次扩增，从理论上计算，除需要引物14个外，还需要游离的脱氧核苷酸________个。

5 . 在遗传病监测及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析，PCR技术能快速扩增DNA片段，在几个小时内复制上百万份的DNA拷贝，有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题：

(1) 在PCR中先用95 ℃高温处理的目的是________；而这一过程中在细胞内DNA复制时是通过________实现的。
(2) 在PCR技术中所需要的引物实质上是一种________，在相应的横线上写出引物Ⅱ________。　
(3) 在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA：________(写出①、②中的一种即可)。
(4) 若将1个DNA分子拷贝10次，则需要在缓冲液中至少加入________个引物。
(5) 在对样品DNA进行分析的过程中发现，DNA掺杂着一些组蛋白，要去除这些组蛋白可加入的物质是________。

6 . 回答下列有关基因工程的问题：
(1)在基因工程中，获取目的基因的方法包括:①从基因文库中获取目的基因，②利用_____________扩增目的基因，③__________________。
(2)在基因表达载体中，启动子是_______________识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是_______________。
(3)将目的基因导入微生物常用______________处理受体细胞，使之变成感受态细胞。我国科学家发明的将目的基因导入植物细胞的方法是________________。
(4)基因工程实施时不能将目的基因连接到运载体上的标记基因中，原因是__________________。

7 . （1）微生物接种的方法很多，最常用的是__________和____________，接种前要对接种环进行灼烧，其目的是为了__________。
（2）用培养基培养微生物时，培养基中应有__________、__________、 __________和_______ 等营养，同时还必须满足微生物生长对 __________ 、 __________ 及特殊营养物质的要求。
（3）制备固体培养基的主要操作步骤为计算、称量、溶化、_______、倒平板。制备固体培养基最常用的凝固剂是___________。
（4）PCR技术中的引物是___________________，DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过温度控制来实现的。一个循环包括 ______________________ 三步。

8 . 请回答下列有关胚胎工程和基因工程等方面的问题：
（1）利用基因工程可以获得转基因羊。若要使获得的转基因羊分泌的乳汁中含有人抗凝血酶III蛋白，构建基因表达载体时必须把目的基因与_________________基因的______________结合，使用该启动子的原因是_____________________________。
（2）应用PCR扩增目的基因时，需要在基因组数据库中查询目的基因的________________序列，以便合成引物。PCR过程第一轮循环的模板是________________。
（3）目前常用的措施是将该基因表达载体导入羊的________________细胞，导入方法是_____________________。

9 . 2013年7月，中国试管婴儿之母——卢光琇教授与研究伙伴共同宣布全球首批经全基因组测序的PGD/PGS试管婴儿在长沙诞生。新技术的突破意味着通过设计试管婴儿解决部分不孕不育问题的同时，部分肿瘤疾病、遗传性疾病的家族性遗传也将有望避免。
（1）设计试管婴儿时为了提高受孕率，胚胎移植时多采用多胚胎移植，因此需要用_________处理，促进母亲排出更多的卵子。
（2）胚胎发育的卵裂期在_________内进行。受精卵经72小时体外培养发育成32细胞左右的桑椹胚，可用于__________。
（3）为了某些需要，需对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效最准确的方法是SRY﹣PCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个__________（填“部位”）细胞，提取DNA；然后用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）的一段碱基作_________，以___________为模板进行PCR扩增；与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎为_________性。
（4）设计试管婴儿、克隆人等都是引起人们广泛争论的问题。我国不反对治疗性克隆，即可利用人体细胞核移植等技术治疗人类疾病，在去除卵母细胞的细胞核时，可用微型吸管把位于___________和________之间的第一极体一并吸出。