1 . 在谷类食物如高粱中赖氨酸含量很低。天冬氨酸激酶（AK）和二氢吡啶羧酸合酶（DHPS）是赖氨酸合成途径中两种重要的酶，并协同控制植物中游离赖氨酸的合成速率。科学家把外源AK基因和DHPS基因导入高粱，获得转基因高粱植株若干。利用转基因高粱植株获取cDNA，进行PCR扩增并对扩增产物进行凝胶电泳，结果如图所示。下列相关叙述正确的是（       ）

   

A．转基因植株3和6是实验所需的目的株

B．转基因植株3中一定存在二氢吡啶羧酸合酶

C．转基因植株5的游离赖氨酸含量可能显著增加

D．通过基因工程获得转基因植株的原理是基因突变

2 . 我国科学家将含有人凝血因子基因的DNA片段导入到羊的受精卵中，由该受精卵发育而成的羊，分泌的乳汁中含有人的凝血因子，可用于治疗血友病。下列叙述正确的是（       ）

A．这项研究说明人和羊共用一套遗传密码

B．该羊的乳腺细胞中含有人的凝血因子基因

C．该羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子基因

D．该羊的后代也可能含有人的凝血因子基因

4 . 下列关于基因工程技术的叙述，错误的是（       ）

A．基因工程的操作水平属于分子水平，其原理为基因重组

B．基因工程中的基因载体都是小型环状DNA---质粒

C．基因工程中对基因的剪切和拼接过程是在生物体外完成的

D．基因工程能定向改造生物遗传性状，实现了不同物种间的基因交流

5 . 下列工程中所用技术与原理不相符的是（       ）

A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理----酶的专一性

B．植物组织培养和动物细胞培养----细胞的全能性

C．植物原生质体融合和动物细胞融合----生物膜的流动性

D．基因工程培育转基因抗虫棉----基因重组

6 . 从中国仓鼠卵巢组织分离、培养的CHO细胞是生物制品领域最主要的生产细胞，广泛应用于各种药物蛋白的生产和基因工程。CHO细胞可以在培养基中高密度生长，能够分泌胞外蛋白且自身的分泌蛋白比较少。重组新冠病毒疫苗是将新冠病毒S蛋白受体结合区（RBD）基因通过基因工程技术，重组到中国仓鼠卵巢（CHO）细胞内，在体外培养并大量表达出RBD二聚体的方法。下列说法正确的是（　　）

A．CHO细胞作为新冠病毒的宿主细胞，提供病毒所需的营养物质

B．与培养普通动物细胞相比，CHO细胞两次分瓶之间的间隔时间较短

C．与大肠杆菌相比，CHO细胞表达的外源蛋白与天然蛋白更加相似，后期蛋白质的纯化更容易

D．CHO细胞能够表达出RBD二聚体，说明新冠病毒与仓鼠的遗传物质相同

7 . 面筋是由小麦中的蛋白质形成的，具有很高的强度和延展性，对面团的结构和面包的品质有着重要影响。小麦有三对等位基因（A/a，B₁/B₂，D₁/D₂）分别位于三对同源染色体上，控制合成不同类型的高分子量麦谷蛋白（HMW），从而影响面筋强度。科研人员以两种纯合小麦品种为亲本杂交得F₁，F₁自交得F₂，以期选育不同面筋强度的小麦品种。相关信息见下表。

基因	基因的表达产物（HMW）	亲本		F1	育种目标
		小偃6号	安农91168		强筋小麦	弱筋小麦
A	甲	+	+	+	+	-
B1	乙	-	+	+	-	+
B2	丙	+	-	+	+	-
D1	丁	+	-	+	-	+
D2	戊	-		+		-

注：“+”表示有相应表达产物；“-”表示无相应表达产物。
回答下列问题：
(1)在小麦细胞中，以mRNA为模板合成高分子量麦谷蛋白（HMW），mRNA的合成场所和执行功能的场所分别是____________（填“细胞核和细胞质”或“细胞质和核糖体”）。研究发现，基因D，发生突变后，其转录形成的mRNA上有一密码子发生改变，但翻译的多肽链氨基酸序列和数量不变，原因是_____________。
(2)在F₁植株上所结的F₂种子中，符合强筋小麦育种目标的种子所占比例为_________，符合弱筋小麦育种目标的种子所占比例为__________。
(3)序列分析发现a基因是A基因中插入了一段DNA，使A基因功能丧失。为获得纯合弱筋小麦品种，研究者选择F₂中含_________（多选，选“甲”、“乙”、“丙”、“丁”或“戊”）产物的植株，运用转基因技术，在A基因中插入一段DNA，培育新品种。

8 . 有机磷农药会造成严重的环境污染，并直接或间接的危害人类健康，某研究小组采取下列流程获取农药降解菌：从受农药污染严重的土壤中筛选分离具优良性状的菌种→定向培育优良菌种→在此基础上进行诱变育种及构建工程菌。回答下列问题：
(1)在采集的样品中，一般目的菌种在数量上并不占优势，为提高分离效率，可以先采用富集培养，即在培养基中加入___，使所需要的微生物繁殖，造成数量上的优势，限制不需要的微生物生长繁殖。磷在体内可以参与合成___（答出2种即可）等生物大分子。
(2)富集培养并不能获得农药降解菌的纯种，可以通过___和___的方法进行纯化。
(3)为了进一步获得优良菌种，可采用物理化学（如紫外线、亚硝酸钠等）诱变方法进行微生物育种，其原理是___，也可采用___等技术定向改造菌株。
(4)研究小组进一步研究了碳源对有机磷农药降解率的影响，得到如下结果，从图中可以得出的结论有：___。
   

9 . 猕猴桃溃疡病是一种严重影响猕猴桃产量的细菌性病害。为获得抗猕猴桃溃疡病的转基因猕猴桃，科研人员以猕猴桃的愈伤组织（对卡那霉素敏感）为转基因受体，通过农杆菌转化法将抗菌肽基因导入猕猴桃。图1表示抗菌肽基因和卡那霉素抗性基因（nptⅡ基因）及其上限制酶酶切位点的分布情况，图2表示Ti质粒及其上限制酶酶切位点的分布情况。回答下列问题：
   
(1)限制酶能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的_______断裂。限制酶主要来源于原核生物，但不会切割原核生物自身的DNA分子，推测原因是______。目的基因可随T-DNA整合到目的细胞的染色体DNA上，这体现了_______的生物学变异原理。
(2)若只用EcoRI切割目的基因和Ti质粒，会产生多种连接产物。为筛选出含有目的基因正向连接的重组Ti质粒的菌株，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到了①②③三类菌落，其生长情况如下表，“+”表示生长，“-”表示不生长。根据表中结果判断，应选择的菌落是_____（填表中序号），菌落②的导入情况是_______。

项目	①	②	③
无抗生素	+	+	+
卡那霉素	-	-	+
氨苄青霉素	-	+	+
卡那霉素+氨苄青霉素	-	-	+

(3)若既要避免上述多种连接情况的发生，又要使目的基因最终能整合到猕猴桃愈伤组织细胞的染色体DNA上，最好选择限制酶_________对目的基因和Ti质粒进行切割。

10 . 抗除草剂转基因作物的推广可有效减轻除草劳动强度、提高农业生产效率。图1为抗除草剂转基因玉米的技术流程，报告基因GUS只能在导入真核细胞后正确表达，在农杆菌中不能正确表达。报告基因GUS(含有内含子)，表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。

(1)基因工程的原理是____，基本操作步骤有____。
(2)科研人员研发了新的DNA重组方法——无缝克隆In-Fusion技术，如图2所示。In-Fusion酶能够识别任何具有相同15bp末端序列的线性DNA分子并使其形成黏性末端，据此实现目的基因和载体的连接。和传统方法比，无缝克隆In-Fusion技术的优点是____。

(3)农杆菌转化愈伤组织时，常用含除草剂的选择培养基筛选转化的愈伤组织。由于愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未成功转化的愈伤组织也可能在选择培养基上生长。针对上述现象，可以在选择培养基中同时加____进行筛选，其中周围的培养基____（“显”或“不显”）蓝色的愈伤组织是转化成功的，原因是____。