1 . 解偶联蛋白1（UCP1）具有消除线粒体内膜两侧的H⁺浓度差，减少ATP合成、增加产热的功能。我国科学家应用CRISPR/Cas9技术将猪的UCP1基因置换成小鼠的UCP1基因，并使鼠UCP1基因在猪的白色脂肪组织中特异性表达，获得脂肪沉积少的“瘦肉猪”。下图是“瘦肉猪”的主要培育过程，相关叙述错误的是（       ）

   

A．应用CRISPR/Cas9技术育种的主要原理是基因重组

B．过程b进行有限稀释培养的目的是获得阳性单克隆细胞系

C．过程d的受体细胞最好是去核的猪卵母细胞

D．过程e要对代孕猪进行同期发情处理，并选择发育正常的原肠胚植入代孕猪输卵管

2 . 回答下列小题：
（一）回答与黄酒制作有关的问题：
氨基甲酸乙酯（EC）作为一种潜在致癌物，广泛的存在于发酵食品和酒精饮料中。在各种发酵酒中，黄酒面临的EC超标问题更为突出，利用酸性脲酶消除其前体物质尿素被认为是最为有效的一种方法。
（二）德尔塔变异毒株已成为全球新冠肺炎传播的主要变异株，我国研究团队最新发现针对德尔塔变异株有效的单克隆抗体。该抗体在新冠肺炎的短期预防与早期治疗上有较大的应用价值。图1表示制备该抗体的实验流程。回答下列问题：

   

(1)获取含有酸性脲酶菌的土样，加入______制备成土壤悬液，并对土壤悬液中的酸性脲酶菌进行扩大培养。从适合使用的角度分析，该酸性脲酶菌应对富含______的发酵液有很好的耐受性。
(2)常用于分离菌种的方法是______，经过酸性培养基的初筛培养后，还要在添加酚红的中性固体培养基上进行复筛，应该挑选_____（填“有红色圈的菌落”或“无红色圈的菌落”）为目标菌株，最后将其接种在_______中，4℃冰箱中保藏。
(3)酸性脲酶菌的产酶能力受到许多因素影响，除培养基的营养成分、温度、pH外，在摇床培养时还应考虑_______。
(4)丙操作指的是________，甲中含有________种两两融合的细胞。
(5)乙中可以获得________的杂交瘤细胞。
(6)利用小鼠制备的单克隆抗体，在给人体使用时，可能会被人体免疫细胞清除，影响抗体的作用效果。抗体的结构如图2所示，下列技术可以解决此问题：从杂交瘤细胞中提取编码鼠源单克隆抗体_____（填“5区”或“6区”）序列的基因，与从人体中获取的编码抗体____（填“5区”或“6区”）序列的基因，进行拼接，然后导入骨髓瘤细胞中，进行培养获取新的抗体，改造过程涉及以下哪几项技术？( )
A．动物细胞培养       B．转基因技术       C．细胞核移植       D．体外受精

3 . 下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是（       ）

A．蛋白质工程实施过程中可对关键氨基酸直接置换或增删

B．实施蛋白质工程的基本途径必须从预期蛋白质功能出发

C．蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的二代基因工程

D．构建基因表达载体也是蛋白质工程的核心步骤

4 . 经遗传改造的小鼠胚胎干细胞注入囊胚，通过胚胎工程的相关技术可以获得具有不同遗传特性的实验小鼠。下列说法错误的是（       ）

A．用促性腺激素处理雌鼠可以获得更多的卵子

B．体外受精前要对小鼠的精子进行获能处理

C．胚胎移植前不需要对受体进行处理

D．遗传改造的小鼠胚胎干细胞可以通过转基因等技术获得

6 . 大肠杆菌β-半乳糖苷酶（Z酶）可催化底物（X-gal）水解产生蓝色物质。在pUC18质粒中，LacZ′编码Z酶氨基端的一个片段（称为α-肽），该质粒结构及限制酶识别位点如下图甲所示。已知α-肽、缺失α-肽的Z酶片段单独存在时均无Z酶活性，共同存在时就会表现出Z酶活性。利用下图乙中的DNA片段与pUC18质粒进行基因工程操作。

(1)实验中使用限制酶破坏了pUC18质粒和DNA片段的______键。限制酶来源于原核生物，不能切割原核生物自身DNA分子的原因是___________。DNA连接酶主要有E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类，后者的特点是____________。
(2)为保证能通过菌落的颜色辨别出含重组质粒的大肠杆菌，本实验作为受体细胞的大肠杆菌中Z酶基因应满足的条件是____________。用重组质粒转化改造后的大肠杆菌，将其接种到含氨苄青霉素和X-gal的固体培养基上进行培养。含重组质粒的大肠杆菌的菌落颜色为______，原因是_________。
(3)有科学家检测了291种没有经过人工转基因操作的栽培番薯，发现这些番薯都含有农杆菌的部分基因，并且在番薯的根、茎、叶等器官中都检测到了相关基因的表达。但是，科学家在番薯的近缘野生种中却没有发现这些基因，产生这种现象的原因可能是____________。这一事实对我们认识有关转基因食品的安全性有什么启示_______________。

7 . 基因工程是一项过程复杂方法多样的系统工程，“筛选”是基因工程中常用的技术手段。下列说法错误的是（　　）

A．pmi基因编码的蛋白质可使细胞在特殊培养基上生长，可用于目的基因的筛选

B．构建乳腺生物反应器需先将目的基因与乳腺中特异性表达的基因启动子连接到质粒上

C．对转基因抗虫棉进行个体水平的鉴定筛选时，需用PCR技术或抗原-抗体杂交的方法

D．基因工程转化后，利用标记基因可以将含有目的基因的受体细胞筛选出来

8 . 番茄含有丰富的维生素，但不耐寒。科学家将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄细胞，并进行组织培养得到转基因番茄植株，并将该植株种植在寒冷环境中，发现番茄植株并无抗寒性状。为了找出不抗寒的原因，科学家提取转基因番茄细胞中的有关成分进行了如下分析。回答下列问题：
(1)提取细胞中的_________，采用抗原―抗体杂交技术进行检测，若能检测到抗冻蛋白，但含量非常少，其原因可能是_________。鱼的抗冻蛋白基因能在番茄细胞内成功表达的理论基础是_________。
(2)若经上一步检测确定细胞中无抗冻蛋白，可采用分子杂交技术检测细胞中的RNA和DNA。该技术依据的原理是__________，检测过程中需使用DNA探针进行检测，若出现DNA―RNA的杂交带，说明__________，则可能是_________导致无抗冻蛋白。
(3)若经检测确定细胞中无抗冻蛋白的mRNA，使用DNA探针对细胞内的基因组DNA进行检测，若出现DNA―DNA的杂交带，说明_________，则可能是抗冻蛋白基因反向插入质粒中导致抗冻蛋白基因无法正常表达。若经检测确定细胞中无抗冻蛋白基因，说明在转化过程中，可能导入番茄细胞的是___________（填“普通质粒”或“重组质粒”）。

10 . 下列关于基因工程的概念和理论基础，说法错误的是（       ）

A．通过基因工程，人类可以定向地改变生物性状

B．基因工程又称转基因技术或体外DNA重组技术

C．基因工程可以打破物种界限，实现遗传物质横向转移

D．对基因进行人为改造，创造自然界没有的新基因